Сколько живет спермотоксикоз: /material.read?material_id=501013

про спермотоксикоз , «я обычный ролевик» — фанфик по фэндому «Stray Kids»

недостаток секса в крови сказывался буквально на всем. его движения в танцах, мимика и жесты в повседневной жизни, боже, да даже то, как он заправлял волосы за ухо — это все говорило, буквально кричало: код красный! у хван хенджина полгода не было полноценного секса. естественно, дрочка в душе и все четыре пальца в задницу совершенно не спасали его состояние и единственной отдушиной были танцы, куда он выливал всего себя до поры до времени. все разрушил минхо одним своим: — блять, хенджин, соберись и перестань трахать пол. хенджин тогда просто вышел из зала и не вернулся ни в этот раз, ни еще через три тренировки, настолько ему все надоело и хотелось простого человеческого потрахаться. даже волосы перестал собирать в пучок и ограничивать себя в достаточно… женственных жестах, которых, конечно, раньше не замечал. всем своим видом показывая и давая понять, что ало! он тут! и его можно трахнуть! это не работало. он только пару раз схлопотал по лицу за свои ‘гейские замашки’ в университете. и это был конец. потому что любые руки и любые действия по отношению к его телу возбуждали до пиздеца. хотелось ужасно, звон в яйцах уже был не только в яйцах, но и в мозгах. и даже ебучий конский дилдо, не такой большой как у мальчиков на порнохабе, но достаточный, чтобы понимать — ему мало. хотелось живого, горячего, настоящего, а не вот это все. блять, он даже согласился бы, если бы те утырки еще раз дали ему по лицу. все что угодно. тогда на ум пришли две идеи (конечно, не хенджину, а чонину, который просто заебался отбиваться от рук хенджина, которые ползли куда не надо): либо пойти поролить, либо уже найти себе кого-нибудь на сайте знакомств. конечно, хенджин выбрал второе. кто вообще ходит ролить с такой степенью недотраха? ему повезло с сайтом. там все были с ровно таким же недотрахом, как и у него самого. и даже тупое ‘покажы сиску’ выбивало его как пиздец. конечно, он над таким не думал и просто переключал собеседника, пока не наткнулся на сообщение, которое перевернуло его мир, жизнь и вообще, блять, ну просто… хенджин, соберись, говорил он себе, пытаясь кашу в голове на порции хотя бы разложить. ему так хотелось. до звездочек перед глазами, он был готов хныкать. ли феликс, сеул, 9см боттом, готов ко встрече хоть завтра фотография он был красивым. хенджин закусил губу, сдерживая порыв, чтобы не закричать. зато активно задышал, так, что листы в бардаке на столе начали двигаться к стенке, создавая еще больший хаос. да, хенджин хотел, чтобы его трахнули, но… феликс был хорошеньким, таким хорошеньким, что он был не против побыть сверху, к тому же, не зря конский дилдо на его кровати лежал там 24/7. что-то подсказывало, что с этим мальчиком ему точно свезет. внутри разливалось такое… хенджин первый раз подобное чувствовал. он облизнул погрызанную губу, двигая к себе ноутбук, наконец.

можешь прислать мне еще фотку, что ты не фейк? 😉

ого ты не прислал мне дикпик фотография на фотографии все было в рамках приличия. но хенджин отлично увидел, что да, точно девять сантиметров. ни больше, ни меньше. и даже спрашивать не стоит, в состоянии крайнего неудовлетворения у него открывались сверхспособности, вроде рентгеновского зрения. что насчет тебя? хенджин приоткрыл рот. а потом открыл вебку на ноутбуке, чтобы сфотографировать свое лицо в самом выгодном свете и позе: облизал губы посильнее, скосил глаза, распустил волосы и высунул язык, показывая верхние зубы.

хван хенджин, сеул, 17см боттом, но для тебя буду свитч, детка фотография

хенджин обожал себя иногда. у него не было проблем с самооценкой, не было комплексов никогда. сколько себя помнил, всегда держал свое тело в нормальном состоянии, комфортном для него, конечно, благодаря танцам и здоровой психике.

о боже хенджин снова закусил губу и поморщился. он сгрыз ее в кровь сегодня утром, когда засмотрелся на бедра одногруппника, представляя, какой член может быть спрятан в этих штанах.

назначим встречу?

а может секстинг для начала? секстинг хенджина не удовлетворял, наоборот, распалял еще больше. но феликс, действительно, был хорош в этом. на удивление хорош. он, блять, был просто идеален. и хенджину пиздец как хотелось, чтобы феликс ‘поскакал на его члене’ или ‘взял его глубоко в глотку’, да что угодно. он, серьезно, был готов умолять о встрече. феликс, кажется, ментально его услышал, потому что этим же вечером ему пришло уведомление о предложении встречи. мол, феликс, оказывается, ждет не дождется, и, в конце концов, просто проверял, не сольется ли хенджин. три дня прошло. уже было сложно ходить из-за постоянного стояка и писать лекции на парах из-за стертых в мозоли ладоней. он даже не шутил, когда отковыривал высохшую кожицу с одной из них. даже пробки не спасали, держи он их внутри два часа, до следующей дрочки, или весь день. было сложно сказать, что хенджин не нервничает. конечно, он нервничал. не каждый день ты знакомишься с чуваком по интернету, а потом вы встречаетесь просто ради того, чтобы потрахаться. а если он его наебал? и все это время ему писал какой-то озабоченный старик или — хуже — школьник, который угарает сейчас над его искренними, пропитанными страстью сообщениями вместе с друзьями. хотелось хныкать. прямо по-настоящему, чтобы боги, все, которые там живут на этом дурацком небе, его слышали, что хватит уже издеваться над хван хенджином из сеула, у которого семнадцать сантиметров и он, ради хоть какого-то секса, готов побыть сверху.

ты не сказал, что выглядишь как охуенная модель с ногами антилопы в жизни 🙁 написал феликс в чат, и хенджин заозирался по сторонам. ему стало страшно и одновременно хорошо. окей, он был готов достать член прямо тут, чтобы феликс узнал его наверняка — все-таки подобные фотографии всплывали в переписке гораздо чаще, чем фотографии лица. перестань так озираться, я брал кофе. случайно тебя увидел у хенджина было только два вопроса к жизни: какой нахрен кофе и когда его уже перестанет мучать вселенная. феликс шел к нему медленно. и выглядел, вообще-то, не хуже, чем он сам. у него были замечательные ноги, бедра и… он снова забыл посмотреть выше, куда обычно смотрят людям при встрече, в лицо, например. — привет, — феликс улыбался просто очаровательно. и волосы с глаз убирал тоже очень и очень мило. хотелось прям так… нет. разложить его хенджину по прежнему не хотелось, а вот воплотить свой план в жизнь, как он и задумывал — очень даже. член встал. а он просто оценил взглядом феликса. — ты немой? — хрюкнул феликс. низко так, баритоном. хенджин захотел сесть на колени перед ним и делать все, что феликс скажет — облизывать его кроссовки до идеальной чистоты, тереться об его ногу и просто быть сучкой в его руках. пиздец. феликс удивленно выпучил красивые глаза, облизал губу и поставил второй стакан обратно на подставку, которую нес от кофейни в руках. — я не такой, как ты ожидал, да? — смущенно проговорил феликс и отвел взгляд. переступил с ноги на ногу. неловко взглянул из-под челки. хенджину захотелось рыдать. — ты еще лучше, феликс. в его глазах загорается сначала непонимание, потом испуг, удивление, а только потом уже принятие, и хенджин сам не понимает, как вообще может думать о каких-то там глазах, когда дома его ждет лучший секс в его жизни, этого нельзя отрицать даже в предположениях. хенджин и не думает. хватает феликса за руку и тащит в свою квартиру, потому что ну разве можно устоять? как вообще можно делать что-то, когда он буквально отхапал себе такое сокровище, которым вряд ли захочет делиться, особенно после сегодняшней ночи? хенджин не исключает, ко всему прочему, помутнение рассудка из-за спермотоксикоза, но об этом он подумает сразу после того, как потрахается с феликсом и решит загнаться. — пробка или конский дилдо? — спрашивает хенджин, когда заводит феликса в квартиру и оставляет ключ прямо в скважине, с внутренней стороны. — что? — феликс не вдупляет вообще, что происходит. хлопает глазами невинно. настоящий боттом, думает хенджин. ну ничего, они это быстро поправят. — спрашиваю: ты предпочитаешь анальные пробки или огромные дилдо? хенджин скидывает кроссовки, забирает у феликса кофе, оставляя прямо в коридоре, торопится в ванную мыть руки до локтей, потому что внутри он чистый с самого утра, а пихать в это чистое грязные с улицы пальцы он не позволит даже себе. и феликсу тоже, поэтому руки он ему моет сам, пока тот краснеет и бледнеет, полностью обезоруженный такой спешкой. вообще-то, он до сих пор не ответил на вопрос. хенджин даже прибрался в комнате, чтобы не стыдно было устроить нормальный такой трах на все двенадцать часов счастья, как в симс. — я, если честно, — мнется феликс на пороге комнаты, — та еще ванилла в сексе… хенджин, слыша в баритоне искреннюю неуверенность, наконец натурально стонет и разворачивается к феликсу лицом, подходя ближе, чтобы закинуть руки на его плечи и притянуть к себе. хенджин целуется мокро. до того мокро, что первая слюна бежит по подбородку через какие-то секунды. ему так хочется, ноги дрожат до того, что он действительно сейчас просто сядет на колени перед девяти сантиметровым членом и будет брать его в горло настолько, насколько хватит его и его дыхалки. а дыхалка у него ничего. феликс стонет охуенно. охуенно, звучно, хенджину очень и очень нравится, он хочет услышать еще, поэтому: — феликс, — шепчет он в его щеку, облизывает мокрые губы и тычется горячим носом в кожу, бесконечно утопая в своем состоянии предвкушения. — феликс, скажи мне, чтобы я сел на колени, феликс. руки по рубашке скользят, хенджин чувствует ненакачаную грудь, но очень даже поджарый живот и едва выступающие мышцы пресса. ему так хочется феликса облизать с головы до ног, притереться к нему всем своим телом, а потом долго пускать слюни и скакать на маленьком члене до конца своих дней, как в ебучих фиках по омегаверсу, чтобы смазки выше крыши. — сядь? на колени?… — неуверенность феликса придает ему шарм. поэтому хенджин спускается ровно в тот же момент когда феликс перестает тянуть слог. и тычется в его пах прямо так, лицом, вдыхает запах глубоко, отлично чувствуя щекой еще не полноценное, но возбуждение феликса. охуенно. — я щас сам сяду, хенджин, ты зачем такой… хенджин цокает. сев на кровать, феликс оказывается гораздо увереннее, даже тянет руку к волосам хенджина, легко гладит по голове, пока сам хенджин быстро поднимает кисть и убирает ленту со своих волос, распускает их, смотрит вверх, расстегивая чужую ширинку дрожащими пальцами. — будешь тянуть меня за волосы, когда тебе будет особенно охуенно, понял? феликс сглатывает. — хенджин, я же так не… стон срывается с красивых губ феликса, когда хенджин прижимается языком к его полувозбужденному члену через ткань боксеров. он просто не может по-другому, хенджин в прямом смысле сходит с ума, когда собственной слюной мочит эту самую ткань, когда тычется лицом в мокрое и трется, нюхается, как ебучая собака, которая никогда в жизни не ела и вот, наконец, дорвалась. — знаешь, ты еще можешь назвать меня шлюхой или сучкой, феликс, — хенджину хочется растянуть миг, когда он наконец дорывается до желаемого полгода, чтобы запомнить это надолго, а желательно навсегда. — я… н-не смогу, хенджин, с ума сошел, — феликс даже хнычет гулко и звучно, как будто ему все ангелы с того самого блядского неба прокачали голос так, чтобы он во всех вариациях звучал охуенно. хенджин ловит себя на мысли, что хочет послушать его смех. но это он лучше оставит на потом. тут у него полувставший, _действительно_ небольшой член. но размер не имеет значение, имеет значение то, что хенджин умеет этим пользоваться. он вбирает в рот до самого основания. головка оказывается на языке, и он делает глотательное движение, чтобы взять его еще глубже, пока феликс откидывается на кровать и закрывает руками лицо, простанывая высоко. хенджину хочется знать, может ли феликс выше и насколько, если может. феликс кончает. хенджин даже пары движений головой сделать не успевает — откашливается только, когда все до последней капли оказывается у него в желудке и поднимается к кровати, к феликсу, отодвигает его руки и, открывая рот, показывает язык. — посмотри, феликс, я все проглотил. феликс поджимает губы и давится всхлипом. хенджина из транса выкидывает. он так хотел член. он так хотел кому-то отдаться, что забыл совершенно про все, и о чувствах и предпочтениях феликса — тоже. — прости, я не должен был… — нет! хенджин тормозит свои рассуждения, сглатывает слюну, которая все еще держит вкус феликса, и облизывает губы в полном замешательстве. — это было пиздец… как охуенно. феликс снова закрывает лицо ладонями и снова всхлипывает. — я часто плачу после дрочки, хенджин, это нормально. хенджина смущает только то, что ‘после дрочки’, а не ‘когда кто-то берет мой член в рот и заставляет кончить за минуту’, но голова все равно занята не тем. у него просто нет времени думать, поэтому пока что хенджин пытается расстегнуть рубашку феликса, ведя по голой груди. — я могу продолжить? я ужасно хочу член в себе, феликс, просто пиздец как хочу. феликс открывает красные глаза, приоткрывает рот, чтобы что-то сказать, но не говорит и просто кивает. и хенджин за это благодарен. и он может отблагодарить его прямо сейчас. одежда оказывается на полу быстро — хенджин знает по опыту, что лучше сначала снять все, чем потом отстирывать от любимой рубашки смазку и сперму, поэтому остается в одних трусах, когда подползает к феликсу с той самой смазкой, какой-то штукой, а еще пробкой в руках, серебряной такой, небольшой, а на конце стеклянный, красиво переливающийся камушек блестит. — ты же готовился, да? скажи да, феликс. феликс кивает. после оргазма прошло уже несколько минут, а тот все еще не отошел, но, кажется, соображать, что к чему, стал и прикрываться, смущаясь, тоже. хенджину это было не надо, но ему уж очень хотелось, чтобы вот именно феликс и именно с ним почувствовал себя пиздец как хорошо и раскрепощенно, чтобы не смущался и чтобы все-таки сегодня сказал хотя бы разок о том, какая у хенджина охуенная дырка. два пальца в феликса проскальзывают с трудом, поэтому хенджин разрабатывает его в темпе, наклоняясь сверху. — тоже давно не было, да? понимаю, — и целует феликса в щеки, лишь бы ноги пошире раздвинул, а еще доверие себе зарабатывает, на будущее. феликс молчит и стойко терпит проезды подушечками пальцев по простате, которую найти оказалось не так уж и сложно. зато член снова дергается над его животом, капая смазкой. хенджин трет так специально, хочется видеть наверняка, что феликс все еще в строю. а когда пальцы заменяет холодная пробка, феликс мычит недовольно и глаза распахивает, хватая хенджина за плечо. — я не уйду, малыш, боже, — улыбается хенджин от уха до уха и слабо трется членом о свою пятку, поза позволяет. и терпеть он уже не может. он растянут уже три месяца как. и сегодня утром без конского члена тоже не обошлось, поэтому он просто седлает феликса сверху, перед этим стянув трусы, наливает себе в ладонь смазку, греет ее пару секунд, а потом проталкивает в себя сразу три пальца, выгибаясь так, чтобы феликсу показать себя со всех сторон и сразу в нужном свете. феликс под ним дышит часто, глотает слюни. а ладони, как неуверенный девственник, держит на его бедрах, не решаясь сделать больше ничего. — у тебя действительно большой, хенджин, я бы хотел…. — начинает феликс, но тут же получает поцелуй в губы, а его ладонь с бедра тянут вниз, чтобы феликс сам в полной мере оценил, насколько хенджину сейчас жизненно необходим его член в заднице. — не сегодня, детка, я очень, очень сильно хочу тебя в себе, хорошо? — но у меня же… — у тебя идеальный, феликс, не обязательно иметь сорок сантиметров, чтобы получать удовольствие, понимаешь? феликс мотает головой. не понимает. но пальцами скользит туда, откуда на его живот капает смазка и скользит пальцами внутрь, прямо к хенджиновым, захлебывается стоном прямо в чужой рот. смешок с губ срывается сам по себе. — понимаешь теперь? — пальцы феликса короткие, маленькие, миленькие, а еще до пиздеца горячие. и хенджин уж точно наверняка знает, где у него эта самая простата, чтобы палец феликса направить прямо к ней, у себя, блять, внутри, и надавить его пальцем на нее. хенджин выдыхает громко, сглатывает, тычется лицом снова в феликсово и оказывается на седьмом небе, когда по щекам поцелуи начинают расцветать. феликс входит в кураж, и это не может не радовать. — дай я сяду на тебя, детка, — шепчет хенджин и терпит то, как феликс в очередной раз закрывает лицо, прячась в сгибе локтя, кивая. он направляет член в себя сам, садится на него медленно, растягивая все девять сантиметров удовольствия. и несмотря на короткость, он оказывается достаточно толстым, чтобы хенджин чувствовал его и хотел еще и еще. ничего, конечно, совершенно ничего не могло сравниться с настоящим членом, даже тот резиновый конский. феликс стонет. толкается бедрами вперед, на что хенджин без устали шикает и придерживает, а потом упирается одной ладонью в грудь феликса, второй убирая руки от его лица, шепча непрестанное: — феликс, милый, посмотри как мне хорошо, когда я сижу на тебе, — и двигаться начинает не вверх-вниз, а так, чтобы член внутри разрабатывал его еще больше, чтобы головка о стеночки билась и чтобы хенджин мог чувствовать все девять в полной мере, чтобы до конца, так, как ему хотелось все это время. феликс смотрит на него со слезами на глазах, шмыгает носом, а потом опускает ладони на его бедра и старается задать темп так, чтобы хенджину действительно было приятно. получается. — ты такая умничка, мой сладкий, просто замечательный, феликс. хенджин теряется в стонах. ему охуенно. и охуеннее этого было только три дня назад встретить феликса. феликс обнимает за плечи, когда он наклоняется ближе, шепчет что-то на ухо и сам старается бедрами подаваться так, как, думает, будет приятно. хенджин его без устали хвалит, ведь может ли быть что-то лучше, чем партнер, который старается доставить удовольствие ему, который сосредоточен на нем, и который думает за них двоих в данной ситуации? хенджин вспоминает про презервативы в момент, когда феликс вскрикивает, закусывая губу, и изливается в хенджина, возможно, не очень глубоко, но достаточно ощутимо. он совсем не любит, когда кончают в него — столько мороки, что проще… а впрочем, уже неважно. он, весь потный, просто скатывается к феликсу под бок, обнимая его одной рукой. — у тебя все еще стоит, — слышится голос и копошение. хенджин улыбается. — помоги мне немного, феликс, — и глаза открывает, чтобы увидеть, как замечательно, идеально, великолепно у феликса размазалась подводка под глазами. феликс облизывает губы. неуверенность читается в глазах, но он все равно опускает руку, чтобы довести хенджина буквально парой движений: он никогда не был стойким, а сейчас показал очень даже хороший результат, побив свои же рекорды по сдерживанию. — ты волшебный, малыш, — шепчет он, потому что последним стоном, кажется, сорвал себе голос. ему, правда, очень и очень давно не было… ну ладно, полгода, как у него не было секса, ему и не было так хорошо. — я хотел тебе кое-что сказать… хенджин распахивает глаза мгновенно. ну все, сейчас начнется: это все скрытая съемка, у феликса рак, спид, завтра конец света, и он больше никогда не сможет почувствовать на себе эти крошечные умилительные ручки… — я, вообще-то, в этот чат по приколу зашел. и фотку кинул. а там ты. такой красивый… просто охуенный, хенджин, понимаешь? — хенджин кивает слабо, смотря на феликса, поджимая губы и ожидая подвоха. — мне так с тобой понравилось, эм, виртом заниматься, что я совсем забыл, что, ну, ты живой человек… и… — ты девственник, да? — хенджин не дурак, и феликса начинает успокаивать, поглаживая голый бок, чтоб дать понять: не врежет ему по лицу. он отвечает и обещает. — я вообще обычный ролевик, я не думал, что… у хенджина с губ срывается смешок. сначала пытается сдержаться, но не получается — он прикрывает лицо рукой и смеется в голос, но успевает поймать феликса, когда он отодвигаться начинает, а потом притягивает к себе крепче, смеясь ему в светлую макушку. — ты очень, очень, очень милый, феликс. и буквально спас меня от спермотоксикоза, я серьезно. — это значит, что… — знаешь, — хенджин облизывает губу и утыкается феликсу в лоб, оставляя чмок короткий прямо у кромки волос, — если ты не против был потерять свою девственность со мной, как с почти незнакомым, то я не буду ни о чем жалеть. и, конечно, если ты хочешь, мы все забудем прямо сейчас. хенджину, разумеется, забывать не хочется. — не хочу, — феликс гладит по спине голой, изучает прыщик на пояснице и ныряет в углубление, где позвоночник, нежно проводя пальчиками вверх. — мне очень… очень хорошо было. стыдно, правда. ты же все сам сделал. и два раза кончить меня заставил. в общем… — мне было охуенно, малыш. и если ты не против, я бы хотел прямо сейчас пойти на второй заход. феликс мотает головой и слабо ведет бедрами. хенджин вспоминает о пробке внутри него, а еще о том, что вместе с ней и со смазкой принес с собой на кровать эрекционное кольцо. потому что хенджин не мучает совесть показать уже-не-девственнику феликсу все прелести секса. и, возможно, через пару недель феликс все-таки, схватит его за волосы и назовет своей грязной сучкой.

В прокат выходит «Миллион лет до нашей эры-2»

В прокат выходит «Миллион лет до нашей эры-2» — разнузданный и скучнейший гимн похоти, приапизму, зоо- и дендрофилии.

Минор, обитающий где-то на затерянном греческом острове в догомеровскую эпоху, — то ли человек, то ли свинья. Имеющий вполне человеческое обличье, но живет в хлеву со свиньями, говорить не умеет и только хрюкает, и, кстати, его жена – тоже свинья. Последнее обстоятельство, правда, не мешает Минору подглядывать за красавицей Клитией – дочерью старейшины, собирающейся замуж за поэта Каркоса. Однажды, в очередной раз шпионя за знойной брюнеткой, Минор падает с дерева, умирает и почти тут же воскресает. Но уже настоящим говорящим человеком, да еще и с имперскими замашками.

И вскоре, на беду всем и вся, Минор становится правителем острова, а по совместительству — любовником Клитии.

Надо понимать, что все вышесказанное – довольно сдержанный пересказ дико фривольной комедии Жана-Жака Анно «Миллион лет до нашей эры-2», которую в нашем прокате решили связать с комедией Алена Шаба «Миллион лет до нашей эры», хотя к последней фильм Анно не имеет ни малейшего отношения. Впрочем, логика прокатчиков ясна – исторические французские комедии вроде «Астерикса и Обеликса» – такой специфичный и, вместе с тем, однообразный жанр, что все подобные фильмы можно считать сиквелами и римейками друг друга. Между тем, фильм Анно, в оригинале называемый «Его величество Минор», больше похож на «Американский пирог», правда, с поправкой на то, что сделан французами, действие происходит в доисторические времена, и фильм изобилует необязательными отсылками к древнегреческой мифологии. В остальном – примерно тот же тип юмора, но (если вы в состоянии это представить) помноженный на сто.

Мужчинами и сюжетом в фильме владеет перманентный спермотоксикоз, буквально у всех непроходящая эрекция, девственники и девственницы жаждут плотского наслаждения.

Девизом фильма может стать диалог: «Ну что, пришел попрелюбодействовать?» — «Нет, посоветоваться» — «Одно другому не мешает». Рассказывать, кто, с кем и как вступил в половую связь – не хватит и целой рецензии, поэтому ограничимся лишь перечислением главных фигурантов любовного многоугольника – Минор, свинья, Калиста, Сатир и пень, имеющий отдаленное сходство с женской задницей.

При всем при том, «Его величество Минор» представляет из себя скучнейшее зрелище. Неприличные шутки, присутствующие в астрономическом количестве, довольно быстро приедаются и перестают радовать скабрезностью и новизной. Но единственное светлое пятно, заставляющее очнуться от полусна, сквозь который доносятся очередные стоны и тягомотный юмор, – это гвоздь программы Венсан Кассель. В фильме Анно он, как бы патетично это ни звучало, обрел себя. Так убедителен и красив, как в роли Сатира, он не был, кажется, никогда. Здесь у него рожки и козлиные ноги, покрытые кудрявым мехом. И это он (позволим себе небольшой спойлер) неравнодушен к пню.

В случае с «Миллион лет до нашей эры-2» самый интересный момент – это личность режиссера.

Ведь Жан-Жак Анно, известный экранизацией Умберто Эко «Имя Розы» с Кристианом Слэйтером и Шоном Коннери и слащавым «7 лет в Тибете» — про Брэда Питта и буддистов, в тяге к развратной комедии ранее замечен не был. В свое время он снял фильм про доисторические времена «Битва за огонь», за который получил «Сезара» и «Оскар», но то была серьезная и основательная драма про первобытных людей, для которой писатель Энтони Берджес сочинил собственный язык, а ученый Моррис – придумал символику жестов.

Забавно видеть, что два известных пожилых режиссера, недавно выпустивших свои новые фильмы, прошли буквально навстречу друг другу. Если Вуди Ален, ранее снимавший беспутные комедии вроде «Все, что вы хотели знать о сексе, но боялись спросить» закончил Достоевским, Анно, напротив, от Умберто Эко пришел к бесстыжему юмору и зоофилии. И сатир его разберет, какой из этих путей правильный.

Читать книгу Спермотоксикоз (сборник) Андрея Шаргородского : онлайн чтение

Глава одиннадцатая

Катю отпустили в отпуск на целый месяц, и они дружно кинулись в гору забот, без которых не обойтись при подготовке в свадьбе. Кто пережил это – знает. Неделя пролетела как один день.

На роспись приехали к двенадцати. Вошли в зал, и заведующая загсом почти сразу приступила к процедуре. Когда торжественная речь была закончена и все уже были готовы к тому, что сейчас их пригласят для росписи, сзади кто-то громко сказал:

– Стойте! – вышел молодой человек и, встав перед всеми, объявил: – Как жаль, что у нас не спрашивают, как во Франции, нет ли здесь того, кто обладает информацией или знает причины, по которым нельзя заключать этот брак. Я считаю, что пора так делать, и вы, уважаемые присутствующие, сейчас поймёте почему.

– Кто вы такой и по какому праву вмешиваетесь в установленную законом процедуру бракосочетания? – энергично вмешалась заведующая.

– Буквально минуту, и вы поймёте, – он достал планшет из сумки и повернул к присутствующим. – Дело в том, что присутствующая здесь невеста является популярной порнозвездой, смотрите!

С этими словами он включил экран, и все с ужасом увидели ужасные кадры, на которых Катя в окружении трёх смуглых мужиков вытворяла то, за что небезызвестная Саша Грэй получила «Оскара».

Все оцепенели.

– Да это же монтаж, ты кто такой? – Сергей кинулся с кулаками на парня с планшетом.

– А ты у невесты своей спроси – монтаж это или нет!

Все, в том числе Сергей, повернулись к Кате. Она стояла спокойная и, ни капли не смутившись, просто и искренне сказала:

– Он прав, это не монтаж.

Заведующая со своей помощницей, а также кто-то из толпы приглашённых упали в обморок.

– Ты что такое говоришь, Катя? Ты хочешь сказать, что видео подлинное? – Сергея трясло, как больного.

– Это стопроцентно подлинное видео, – с невозмутимым лицом ещё раз повторила она.  – Мама, папа, я могу теперь сказать правду?

Вышел отец, опустил голову и кивком головы показал, что он разрешает.

– Дело в том, друзья мои, что… – тут она сделала паузу, слегка, иронично-горько, улыбнулась, обвела всех взглядом и продолжила: – Это позор нашей семьи, и мы в него стараемся никого не посвящать. Но в данном случае мы сделаем исключение. На этом профессиональном видео работает в кадре моя родная сестра, Тоня. Мы с ней близнецы. Она уехала от нас в Санкт-Петербург четыре года назад и стала профессиональной актрисой этого жанра. Мы с тех пор с ней не общаемся, отец её проклял. Я рада, что все об этом узнали до свадьбы, чтобы потом не было всяких пересудов. Мы, конечно, должны были посвятить в этот секрет Серёжу, но сами знаете, у нас всё настолько быстро произошло, что просто не было удобного случая. А ты что, Серёжа, действительно подумал, что это могла быть я? И вы все тоже?

– Да ты что, Катенька, просто сердце чуть не встало от такого, поставь себя на моё место.

Они обнялись, всех упавших откачали и по-быстрому закончили всю церемонию. Только выходя из зала, когда он взял Катю на руки, он вспомнил о парне, который чуть не сорвал их свадьбу.

– Кто же всё-таки этот парень и где он?

– Это мой двоюродный брат. Я специально так сделала, чтобы никогда ни у кого потом не могло возникнуть вопросов.

– Ты это сделала специально? А если бы кого-то в зале инфарктик посетил?

– Не волнуйся, с моей стороны все всё знали, а у твоих, кроме запаха хорошего скандала, никаких ощущений быть не могло.

Решили ехать в кафе на объездной дороге, так как после произошедшего всем захотелось чего-нибудь принять, тем более что до назначенного срока в ресторане оставалось ещё чуть более часа.

Глава двенадцатая

Праздничные дни пролетели быстро. Молодые решили ехать во Францию, в Париж. Пока переоформили паспорта, пока открыли визу Кате, пока оформили все документы, пролетело две недели. Провожали их родители в аэропорту. Так решили, что Катя тоже будет поступать в Сорбонну, на тот же факультет, где учился Сергей. Если получится, им как мужу и жене дадут отдельную комнату в общежитии, и они смогут спокойно жить без лишних расходов на квартиру. Сергей сказал, что за год найдёт работу и попробует подготовить Катю к сдаче экзаменов. Поэтому проводы были невесёлыми – уезжали надолго.

– Да не волнуйтесь вы, – успокаивал их всех Сергей, – через полгода увидимся. На рождественские каникулы приедем домой.

– Вы, уж если надумаете рожать, то приезжайте сюда, вместе легче будет, – мама Кати не скрывала слёз.

– Хорошо, мама, не плачь, всё будет хорошо.

И они улетели. Домой Иван Николаевич и Валя ехали молча. Завтра он улетал на работу, и она пыталась его отговорить:

– Бросил бы уже эту работу, как-то бы прожили.

– Да, как-то бы, наверно, прожили. Поеду в последний раз, а там посмотрим.

Утром попрощались дома, и она проводила его, как обычно, до автобуса.

– Из аэропорта перед отлётом позвоню. Потом туда не звони – роуминг, дорого, я через недельку сам позвоню. Пока!

Они обнялись, как обычно, и Иван Николаевич уехал. Доехав до аэропорта, он подошёл к стойке регистрации и спросил у девушки, нет ли каких-то изменений по вылету самолёта. Затем пошёл в туалет и, убедившись, что никого поблизости нет, выскочил на улицу через запасной выход. Там его уже ждал на своём «УАЗике» Генка. Он прыгнул в кабину:

– Погнали, вроде никого не было.

– Да, я тоже следил – ни его, ни её не было.

– Значит, парочка уверена, что всё это правда. Тем легче нам будет их застукать тёпленькими. Гони, Генка, как бы нам не опоздать на праздник ненасытной любви.

– А чего ненасытной?

– А того, что я после того как узнал, ни разу к этой твари не прикоснулся. Так что тётенька очень соскучилась по мужской ласке и не будет откладывать встречу в долгий ящик.

– Ты просил меня напомнить, чтобы ты позвонил ей.

– Ах, да! – он вынул телефон и стал набирать. – Валя? Ну всё, регистрация заканчивается, времени мало, пока! До встречи!

Дорога показалась очень долгой. Когда подъехали к подъезду Татьяны, был глубокий вечер. Прошмыгнули в подъезд, зашли в квартиру.

– Ну что, Танюха, ещё не было гостя?

– Нет, не было. Я, как ты, Ваня, просил – следила не отрывая глаз.

– Это хорошо. Будем ждать.

– Я так думаю, что сегодня его не будет. Побоятся, что рейс отменят или чего-то ещё. Хотя всё может быть. Сестрёнка, может быть, соберёшь что-то на стол, а то есть хочется?

– И выпить, – добавил Иван Николаевич.

– Всё готово, сейчас разогрею, я готова ко всему.

Сидели долго, до часу ночи. Хорошо сидели, по очереди наблюдая за подъездом напротив. Генка решил идти домой, а Татьяна погасила свет, чтобы лучше видно было.

– Как думаешь, придёт сегодня?

– Уже нет. Он всегда к часу уже уезжал, дома ведь тоже баба не дура у него сидит. А ему от неё пока деваться некуда, квартира на неё снята, так что нет, сегодня уже кино не будет. Пошли спать.

Легли в одной комнате на разных кроватях.

– Как там лечение, Вань?

– Да так себе. Доктор говорит, что за две недели не могло произойти кардинальных изменений. Но анализы хуже не стали, и это обнадёживает.

– Да, хорошо бы.

– Как молодые?

– Да ты уже слышала, как свадьба чуть не сорвалась?

– Да, тут такое рассказывают.

– Что именно?

– Да что невеста сама это всё подстроила, чтобы потом не объясняться каждому встречному.

– Так и было. Отчаянная девка. Ты знаешь ведь, сейчас половина мужиков в Интернете сидит, да и порнушкой не брезгуют, рано или поздно кто-то бы и нарвался на то видео, и тогда уже никому ничего не докажешь. Облили бы грязью с ног до головы.

А так – всем языки прищемила. Да и в Европу решили поехать правильно. Пока молодые – пусть мир посмотрят, может, и приживутся там.

– Ну, а ты как для себя решил, Ваня?

– Да никак! Пока надо стерву эту проучить, развестись, а там жизнь подскажет.

– Правильно, Ванечка! Знай, что теперь я всегда с тобой буду. Спокойной ночи!

Глава тринадцатая

Пришёл он к ней на третий день. Татьяна заметила его сразу.

– Вон он. Видишь, как крадётся. Осматривается. За пазухой бутылку прячет. Шмыг – и всё, уже в объятьях нашей общей знакомой. Вань, не торопись. Сядь, пусть минут десять пройдёт.

Иван Николаевич еле высидел пять минут.

– Всё, пошёл, а то с ума сейчас сойду.

Выйдя из подъезда в Генкиной синей куртке с капюшоном, в тёмных очках, он быстро юркнул в свой подъезд. Перед дверью своей квартиры остановился, выдохнул, достал ключи и очень осторожно провернул защёлку замка. Дверь, которую он перед отъездом тщательно смазал, так же как и замок, бесшумно открылась. Было тихо. Очень медленно, на цыпочках, он дошёл до спальни и увидел то, что и предполагал. Верхом на таксисте скакала его голая Валька. Бесстыдно, с вздохами, закрыв глаза. Увядающая грудь, которую он так любил целовать, качалась, как уши спаниеля.

Мужик заметил его первый и скинул её с себя в сторону, прикрываясь простынёй. Поднявшись с пола, она громко застонала от досады и ужаса.

Все замерли.

Первым прервал затянувшуюся паузу таксист.

– Слушай, – начал он с характерным акцентом, – я не знаю ваших дел, но она меня сама попросила, говорит, что ты – импотент.

– Так, уже интересно, продолжай, – Иван Николаевич присел.

– Я тут ни при чём, сам разбирайся со своей бабой, а я пошёл, – с этими словами он стал спешно одеваться.

– Ни при чём, говоришь, а как же быть с тем, что ты её, а затем она меня заразила СПИДом?

– Каким ещё СПИДом?

– Болезнь такая есть заразная, которая совсем не лечится. Так вот, дядя, ты сначала её заразил, потом она меня, и в скором времени у нас в городе будет трое внеплановых похорон. Так что быть ни при чём у тебя не получится. Ты, тварь, приговорил нас с ней не просто к разводу, это можно пережить, а ты приговорил нас к неминуемой скорой смерти.

Валька заплакала и стала одеваться.

– Так вот, ребятки сексуальные, за то, что вы сделали, решил я вас наказать. Я бы мог вас здесь обоих пристрелить к чертям собачьим, и мне бы дали годика три, но я решил, что сидеть в тюрьме из-за каких-то тварей мне не понравится. Поэтому тебя, сволочь, – тут он достал из-за пазухи пистолет и направил на таксиста, – я решил кастрировать. Не только за то, что ты со мной и с нею сделал, а ещё для того, чтобы ты, скотина нерусская, больше никого не смог заразить.

Иван Николаевич взвёл курок и выстрелил. Таксист упал, Валька заорала.

– Не ори, дура, это газовый пистолет. Открой форточку. А теперь одевайся.

Он вышел на кухню, взял самый острый нож, который наточил перед отъездом, и спокойно вернулся в спальню. Из кармана достал тонкую капроновую нить и кинул ей.

– Бери, перетягивай ему член у основания.

Она взяла жгут, посмотрела на него и поняла – спорить не надо. Присела и стала вязать. Иван Николаевич достал из кармана телефон и стал снимать происходящее на видео. Когда она всё сделала, он остановил съёмку.

– Теперь, когда я включу камеру, ты возьмёшь и со словами: «За то, что ты меня изнасиловал», отрежешь со злостью ему это дело. После чего мы позвоним в «скорую», а я уйду. Поняла? Я не хочу, чтобы дети знали, какая у них мать. Давай!

Она всё поняла. По его сигналу она сделала, как он говорил. Крови было немного. Таксист от боли очнулся. Валя вызвала «скорую», и Иван Николаевич выключил камеру.

– Заявление в милицию она на тебя писать не будет – ты своё уже получил. После того как выйдешь из больницы, немедленно уезжай. Если увижу в городе – пристрелю по-настоящему.

Он быстро собрался и вышел. Через несколько минут они с Татьяной наблюдали из окна, как врачи выносили на носилках человека.

– Ты что с ним сделал?

– Ничего. Человек просто присутствовал на процедуре нашего развода. Вот, посмотри! – и включил ей видео.

– Тебя не посадят?

– Не знаю, наверно, нет.

– А с Валькой что будет?

– Завтра у доктора договорились встретиться.

Глава четырнадцатая

К доктору Валентина не пришла. Он зашёл сам. Врач констатировал улучшение анализов по раку и отсутствие результатов по СПИДу. Прописал ещё лекарств и попросил прийти через месяц. Выйдя из кабинета, услышал, как звонит телефон. Ему звонили сообщить, что она вскрыла себе вены.

– Она жива?

– Да, и просит вас к ней прийти, в тринадцатую палату.

В палату к ней заходил с жалостью. Всё, что осталось от прежней его жены, – это глаза. Сегодня она их не прятала, а жадно всматривалась в него. Он молчал, даже не поздоровался. Она поняла, что ненависть и отвращение, которое он питает к ней, уже ничем не исправить.

– Спасибо тебе, Ваня, за всё. И за вчерашнее спасибо. Знаю, не простишь, поэтому не буду умолять, скажу лишь, что жаль, мне не удалось уйти тихонько. Второй раз я не смогу. Дай Бог тебе выздороветь, это будет несправедливо, если ты из-за меня умрёшь. Возьми – это завещание на всё на тебя. А это заявление на развод, занеси в ЗАГС.

– Всё?

Она кивнула и отвернулась, так как слёзы брызнули у неё из глаз. Он вышел. То, что произошло, куда-то уплыло. Без всякого сожаления он зашёл в ЗАГС, затем в горисполком, к мэру, и попросил его куда-нибудь пристроить на работу. Они были с ним знакомы давно, ещё до того, как он стал сволочью и вором. Тот пообещал что-то придумать.

Татьяна его ждала.

– Всё, Танюха, заявления в ЗАГСе, скоро разведусь и будем играть с тобой свадьбу! Согласна?

Она кинулась ему на шею и расцеловала.

Вскоре они расписались в тихой деревушке, подальше от людских глаз. Иван Николаевич получил должность инженера по технике безопасности на местном заводе. А Татьяна, так же, как прежде, продолжала шить на дому своим клиенткам. Зарабатывала, между прочим, больше, чем он.

Прошло полгода, и они стали ждать в гости сына. Созванивались редко, поэтому новостей было мало. Он так и не смог сообщить о матери, что она ушла в монастырь, который находился за тысячу километров от их дома. Дело замяли, никто не пострадал. Квартира, в которой они раньше жили, пустовала. Он не хотел там жить, но заходил, проверял, всё ли нормально. Продавать не хотел, надеялся, что сын вернётся и будет жить рядом. Дочка иногда приезжала, но, как ему казалось, во всём винила его, хотя всей правды ей никто не рассказывал. Таксиста посадили за убийство молодой девушки. Было понятно, что он вычислил, кто его заразил, и поквитался.

Болезнь не уходила. Рак отступал, а вот со СПИДом всё было сложнее. Хотя до СПИДа ещё было далеко, так как его диагноз был «ВИЧ-инфицированный», но он понимал – это неизбежно, и тогда, если произойдёт поражение иммунитета, он будет беззащитен против любой инфекции, как и те десятки миллионов человек, которых этот вирус уже убил. И хотя они с Танюхой жили полной жизнью, предохраняясь от заразы, мысль о том, что его жизнь скоро закончится, не давала покоя. По глазам врача он понимал: это не лечится. Горы перелопаченной информации – и тот же результат. Множество примеров, в которых сообщалось об исцелении, в большинстве своём были или рекламным ходом какого-то производителя лекарств, или уловки шарлатанов. За полгода он испробовал почти всё – не помогало. И тогда он решил рассказать всё сыну. Именно поэтому в этот раз он ждал его с особым нетерпением и какой-то призрачной надеждой.

Глава пятнадцатая

Сын его не понял. Вернее, категорически отказался верить тому, что ему рассказал отец. После того вечера, когда они сидели вдвоём до утра, он собрался и уехал к матери в монастырь. Иван Николаевич очень переживал по этому поводу, хотя Татьяна ему твердила:

– Не мог нормальный сын сразу в это поверить. Всё правильно он сделал. Он в данной ситуации единственный, кто может встать на защиту чести своей матери. Так было во все века, и хорошо, что это есть и сейчас. Любая мать, пусть трижды будет пропащей женщиной, всегда останется самой лучшей для сына, так же как и любой сын всегда для матери будет самым лучшим. Теперь всё зависит от неё. Если она захочет тебе отомстить – она легко это сделает. Расскажет ему, что заразу ты привез, что у тебя там были женщины, а эпизод с таксистом и твоё видео спишет на видеомонтаж. И ничего ты уже ему не докажешь. Так что будем ждать, Ванечка.

Ждать пришлось долго – почти неделю. Сын не позвонил, а приехал неожиданно, вместе с Катей. По его виду стало понятно – разговор будет сложный. Решили разговаривать в квартире, где они счастливо жили многие годы. Всё в ней напоминало о тех годах. Сергей обвёл взглядом комнаты – всё было как прежде. Присели на кухне. Отец ждал, что скажет сын, и жадно ловил его взгляд.

– Я не знаю, что тут у вас произошло, мать наотрез отказалась об этом говорить, но то, что произошло что-то очень страшное, это факт. Она попросила больше её не тревожить своими приездами и письмами. Она хочет забыть прошлую жизнь и посвятить себя служению Богу. Я не хочу верить в то, что ты мне рассказал и показал, так как… – тут он запнулся, – так как это моя мать. За последний год это уже вторая попытка отобрать у меня самого близкого человека. В прошлый раз не получилось, и в этот не получится. Я всё равно должен вернуть мать к нормальной человеческой жизни.

– А почему это ты считаешь, что в монастыре ненормальная и нечеловеческая жизнь? Пути Господни неисповедимы.

– Прекрати, отец. Ты понимаешь, что я имею в виду. Я буду настаивать, чтобы ты мне помог в этом. Если ты являлся причиной, по которой она туда ушла, то ты и будешь причиной, которая вернёт её оттуда.

– Сынок, это храм Божий. Туда нельзя приходить и уходить по чьей-то прихоти. Только сам человек может это для себя решить. Только так, и никак иначе. И пожалуйста, не делай меня виноватым. Я тебе всё рассказал, как было, и не думаю, что ты можешь меня судить. Не дай Боже тебе пережить то, что пережил я. К сожалению, я неизлечимо болен, поэтому дни или месяцы мои сочтены. Я хочу, чтобы мы сейчас поговорили о другом. О квартире, о вас и ваших планах.

– Для меня сейчас главное – это мама. Остальное меня пока мало интересует. Я ещё раз настаиваю – помоги мне вернуть мать, и тогда всё будет по-прежнему.

– По-прежнему – это как?

– По-прежнему – это значит, что у меня, как и прежде, будут отец и мать.

– А если я скажу ещё раз тебе, что в этом деле я тебе не помощник?

– Тогда я не смогу спокойно, как прежде, видеться и общаться с тобой.

– Вот оно как. Значит, ты считаешь нормальным, что я десять лет пахал вахтовым методом, чтобы тебя выучить, и заработал в итоге рак простаты – от систематического спермотоксикоза. Что из-за того, что я заработал этот рак, и начались сбои в нормальной половой жизни у нас с твоей матерью, а затем она заимела себе любовника, который заразил нас СПИДом. И вот я, который всё это пережил, теперь готовлюсь к неизбежной смерти, а сын ради которого я работал, заявляет мне, что не хочет со мной видеться? Я всё правильно понял, сынок?

– Пойдем, Катя! – Сергей встал и направился к выходу.

– Уходить никуда не надо. Я в этой квартире жить не смогу, поэтому – она ваша. Вот ключи, делайте что хотите.

Иван Николаевич вылетел из квартиры и бросился на улицу. От обиды ему не хватало воздуха и защемило сердце. Он медленно дошёл до подъезда, где они жили с Татьяной, и присел на скамейку. Выскочила Таня и вынесла в рюмке корвалол:

– Быстро выпей, и давай не будем сейчас умирать от сердечного приступа. Для тебя в этой жизни написан другой сценарий.

Минут через пять отпустило. Они зашли в квартиру, и он ей всё рассказал – чтобы стало легче.

– Ничего, Ваня, вспомни себя в двадцать семь лет. Ещё «Пионерская зорька» в одном месте играет. Ничего, время всё лечит.

– Нет его у меня. Да и не всё оно лечит, к сожалению. Не, ну ты представляешь, это он намекал, чтобы я поехал к ней и ещё просил прощения за то, что она сотворила, а потом ещё уговаривал вернуться, а? Каково тебе?

– Ладно, ладно, успокаиваемся – и за стол. Коньячку пару рюмок, пельменчиков тарелочку и теплая постель с любимой вылечат тебя очень скоро, пошли!

Глава шестнадцатая

Сергей приехал снова только через год. У Кати неожиданно скончался отец от инсульта. После похорон приехали решать вопрос с квартирой. Сергей позвонил и сухо сказал:

– Я хочу продать квартиру.

– Ну, во-первых, здравствуй, сынок! Во-вторых, передай Кате наши соболезнования, мы только вчера узнали от случайных людей. Хотели приехать, но решили, что если бы вы захотели, то позвонили. Вот, дождался от тебя звонка. Квартира твоя, дарственная на твоё имя готова, но я думал, что ты хотя бы из приличия поинтересуешься моим здоровьем. Но, если тебе важнее квартира, приходи, забери документы и делай с ней что хочешь.

– Мне будет удобнее, если ты передашь документы мне сегодня.

Трубку повесили. Таня уже стояла с корвалолом возле него.

– Давай, для профилактики.

Он выпил механически. Взял телефон и позвонил Гене:

– Гена, привет! Ты сегодня во сколько можешь заехать к нам на десять минут?

– Привет! А чего только на десять минут? Я и на пару часиков заеду, с собой прихватить?

– Не надо, всё есть. Так во сколько?

– В пять заканчиваю, в пять пятнадцать у вас.

– Годится! – он положил трубку, повернулся к Тане и убитым голосом объявил: – Приготовь хороший стол на пять часов.

– Что, Серёжа с Катей зайдут? – взволнованно встрепенулась она.

– Нет, мы с Генкой сегодня будем сделку обмывать.

– Да, а какую?

– Вечером узнаешь! Пойду, к врачу схожу, может, чудо случилось, анализы позавчера ведь сдал, сегодня будет результат.

Чуда не случилось, всё по-прежнему было без улучшений. Хотя врач успокаивал, что организму трудно одновременно с двумя такими болячками бороться, он понимал: дела его плохи. По себе он ничего не чувствовал. Они с Танюхой жили в своё удовольствие, много бывали на природе – собирали грибы, рыбачили, охотились. Много ездили по знакомым и одноклассникам в другие города, отдыхали на море. Однако мысли о скором конце всегда его тревожили и не давали покоя.

Вернувшись домой, он поел и уснул. Таня незаметно выскочила на улицу и побежала к Сергею. Дверь открыла Катя.

– Катенька, прими наши соболезнования. Царство небесное твоему папе.

– Спасибо, заходите.

– А Сергей дома?

– Нет, ушёл давать объявление о продаже квартиры.

– Катя, – начала Татьяна, – ты понимаешь, не по-человечески это всё. Отец места себе не находит. Ты должна ему помочь всё-таки встретиться с отцом, ведь неизвестно – свидятся ли ещё.

– Я понимаю, но делать ничего не буду. Это его дело, и я не собираюсь вмешиваться.

– А ты изменилась. Так ты хочешь сказать, что Сергей не собирается с ним встречаться?

– Я хочу сказать, что вам пора. Если придёт Сергей и застанет вас здесь – будет скандал.

– Я поняла, Катя. Мне плевать на скандалы. А вот то, что вы добиваете всем этим и так смертельно больного близкого человека, это не по-людски. Бог вам судья.

Она вышла как оплёванная. Никогда её ещё не охватывал такой ужас от человеческой жестокости. В тот же миг она силой воли вычеркнула этих людей у себя из памяти и спокойно пошла домой. Между домами они столкнулись с Сергеем. Он приостановился, а она прошла мимо, сделав вид, что проходит мимо пустого места.

Придя домой, спокойно стала накрывать на стол. От звона тарелок проснулся Иван Николаевич. Умылся, начал ей помогать.

Гена пришёл, как и обещал, в пять пятнадцать. Зашёл, хотел раздеваться, но Иван Николаевич его остановил.

– Гена, у меня к тебе просьба, не раздевайся. Делона пять минут.

– Ну, давай.

– Вот возьми, занеси в мою бывшую квартиру и отдай эту папку Сергею.

– А почему я, сам, что ли, не можешь?

– Гена, – оборвала его Таня, – тебя попросили как человека, чего выкобениваешься? Сбегал, передал и бегом назад, за стол. У меня уже мясо в горшочках с грибами стынет и водка греется.

– Ладно, чё накинулись, уже и спросить нельзя. Так что, просто отдать и всё?

– Да, просто отдать Сергею и всё, за стол. Давай.

Через десять минут они дружно чокнулись, и Иван Николаевич произнёс как тост:

– За мою бывшую квартиру, пусть новые хозяева в ней живут долго и счастливо.

Выпили, потом ещё и ещё. Таня не уступала мужикам, так как решила сегодня тоже напиться. С каждой следующей рюмкой за столом становилось теплее и спокойнее. Утихала душевная боль, уходило, не оставляя следа, прошлое. Всё затянулось туманом. Хорошим туманом, без которого было бы намного хуже.

Вся правда о спермотоксикозе: alev_biz — LiveJournal

Эта статья пригодится всем, кто всерьез боится спермотоксикоза или аналога этого состояния у женщин. Мы разобрали с точки зрения науки главные опасения, которые связаны с сексуальным воздержанием, и не нашли в нем ничего вредного.

Воздержание не подрывает здоровье

Начнем с очевидных плюсов: полное воздержание — это лучшая защита от ИППП. Половых контактов нет, через сиденье унитаза и в бассейне вы не заразитесь, значит, хламидиоза, гонореи, сифилиса и трихомониаза можно не бояться. ВИЧ и гепатит B можно получить, например, еще через переливание крови, но в любом случае воздержание снижает риски заболеть. Правда, надо помнить, что если вы тем не менее практикуете оральный секс и фингеринг, то все равно надо предохраняться, иначе вполне реально заразиться ИППП.

Если вы долго не занимаетесь сексом, не стоит бояться, что это прямо навредит вашему здоровью: вызовет шизофрению, язву желудка или катаракту. Хотя исследований о влиянии воздержания на здоровье мало, существующие показывают, что беспокоиться не о чем. И на самом деле малое количество работ — это хороший признак того, что воздержание не вызывает у врачей опасений за здоровье пациента, поэтому исследовать такое состояние никто не стремится.

Спермотоксикоза не существует

Сперма состоит из семенной жидкости и сперматозоидов. Ни то, ни другое не токсично для человека. Сперматозоиды вообще периодически погибают и утилизируются, как любые другие состарившиеся клетки организма. Кстати, если предположить, что у мужчин бывает спермотоксикоз, то тогда те, кому провели вазэктомию, должны мучиться от страшного отравления: им перерезают семявыносящие протоки, и сперматозоиды до самой своей смерти уже не смогут никуда деться из яичек. На самом деле поначалу после операции могут быть неприятные ощущения из-за застоя сперматозоидов, но потом в подавляющем большинстве случаев все становится нормально.

Воздержание не делает человека склонным к педофилии и зоофилии

На самом деле никто не знает, почему возникают парафилии (социально неприемлемое сексуальное влечение). Есть несколько теорий, но ни одна из них не связана с длительным воздержанием, и вообще какого-то хорошего совета, который помог бы профилактически защитить себя от такого расстройства, не существует.

Мастурбировать не вредно

«Люди тратят слишком много времени, беспокоясь о мастурбации», — сообщают авторы книги «Размер имеет значение?! И еще 69 развенчанных мифов о сексе» Аарон Кэрролл и Рейчел Вриман. И сложно с ними не согласиться. Мастурбировать — нормально и безопасно. Во-первых, надо, конечно, уточнить, что мастурбация — это не печальный удел одиночек: люди, которые находятся в отношениях, тоже вполне себе мастурбируют, и в конце концов это просто один из видов сексуальной активности. Во-вторых, нет никаких данных, что мастурбация вредит здоровью (до тех пор, пока вы не засовываете в себя неподходящие предметы вроде канделябра или авторучки и не трете слишком активно). В XXI веке странно даже думать о том, что «от онанизма на руках вырастают волосы и можно ослепнуть». Иногда продвинутый врач может даже прописать мастурбацию как лечение от некоторых расстройств.

Что вредно, так это стигма

Мужчину могут считать неудачником, если в 25 лет он по-прежнему девственник. Нередко гинекологи высказывают женщинам, у которых в 20 с лишним лет ни разу не было секса, что-то вроде: «Просто не надо ждать принца на белом коне» или «Тебе уже давно пора вообще-то». Бывает, что человек любит мастурбировать, а его окружающие считают такое поведение неприемлемым или вообще грехом. Все это не добавляет спокойствия и радости тому, у кого нет секса.

Воздержание не помогает добиться лучших спортивных результатов

По крайней мере никаких доказательств этого нет, а есть небольшие исследования, в которых было показано обратное. Дефицит сна, безусловно, может плохо повлиять на состояние человека, но сам по себе секс — очень вряд ли: сложно представить, что профессиональный спортсмен доведет себя до истощения во время полового акта. Но, возможно, если человек верит, что секс ухудшит его состояние, то лучше воздержаться накануне соревнований.

Автор: Дарья Саркисян

Ссылка на источник

Что это — сперматозоид? Специфические особенности мужской гаметы

Медицина богата самыми разнообразными терминами. Одни из них просты и понятны обычным людям. Другие же требуют некоторых объяснений. Данная статья расскажет вам о том, что такое сперматозоид. Вы узнаете об особенностях строения этой клетки. Также сможете выяснить, сколько жив сперматозоид вне тела мужчины. Стоит пояснить и об основных функциях гаметы.

Что такое сперматозоид?

Эта клетка присутствует в организме самцов разных видов. Однако наиболее часто гамета исследуется у человека. Если у вас возник вопрос, что же такое сперматозоид, то данная статья расскажет вам об этом.

Сперматозоид – это репродуктивная клетка, без которой невозможно продолжение рода. Образуется она в яичках мужчины и выделяется во время эякуляции. На производство сперматозоидов оказывают влияние многие факторы. Это работа гормональной системы мужчины, его образ жизни, эмоциональное и физическое состояние. Строение гаметы очень интересно. Что такое сперматозоид? Это клетка, которая имеет головку, основное тело и хвостик. Гаметы обладают довольно высокой скоростью. Именно это позволяет произвести оплодотворение. Те клетки, которые не имеют одной из частей или двигаются неправильно, называются чаще спермиями. Стоит сказать, что именно сперматозоид определяет половую принадлежность будущего ребенка. Данный факт зависит от содержания определенных хромосом в гамете. Набор может содержать икс или игрек хромосому. Соответственно, при зачатии формируется женский или мужской плод.

Строение клетки

Как вы уже знаете, сперматозоид состоит из головки, тела и хвостика. Эти части, в свою очередь, обладают своими особенностями. Рассмотрим их.

• Головка. В этой части содержится ядро, имеющее определенный набор хромосом. Оно очень важно для оплодотворения. Помимо этого, здесь есть акросома. Это вещество не участвует в процессе формирования зиготы. Однако оно позволяет растворить оболочку яйцеклетки и проникнуть внутрь. Центросома – это важная деталь, позволяющая организовать правильное движение хвостика.
• Тело. Тут нет важных для оплодотворения частей. Однако в теле сперматозоида находится цитоскелет. Именно эта часть помогает клетке продвигаться и достигнуть своей цели.
• Хвостик. Эта часть не несет в себе хромосом. Но стоит сказать, что без нее мужская гамета попросту не сможет продвигаться. Работа хвостика регулируется центросомой, которая располагается в головке клетки. Есть одна особенность. Если мужские клетки не имеют хвостиков, то оплодотворение может произойти посредством пробирки.

Правильное строение сперматозоида очень важно для оплодотворения. Именно поэтому врачи обращают особое внимание на этот пункт.

Основные задачи

Что такое сперматозоид, вы уже знаете. Для чего же нужна эта маленькая клетка мужского организма? Основной особенностью гаметы является то, что она может существовать вне тела хозяина. При этом в благоприятной среде сперматозоиды живут до десяти суток.

Главной задачей мужской гаметы является оплодотворение. Происходить оно может естественным или искусственным путем. Клетки попадают в тело представительницы слабого пола и преодолевают цервикальный канал. Стоит отметить, что одной клетки при этом будет недостаточно. Несмотря на то что во время зачатия сливаются единственный сперматозоид и яйцеклетка, для движения мужской гаметы необходимо множество подобных клеток.

После преодоления женских половых органов сперматозоид попадает в яйцеклетку. Далее начинается непрерывное деление. Зигота продвигается по фаллопиевым трубам и попадает в матку. Тут уже образовавшаяся субстанция называется плодным яйцом.

Возможные проблемы

Мужской сперматозоид не всегда имеет правильное строение. Нередко представителям сильного пола приходится сталкиваться с проблемами. Выявляются патологии после проведения анализа под названием спермограмма.

Так, некоторые клетки могут иметь неверное строение или нарушенное движение. Иногда встречаются частичные повреждения головки или хвостика спермия. В медицине существуют определенные нормы, которым должны соответствовать мужские гаметы. При нарушениях и патологиях проводятся коррекции. Лечение позволяет восстановить здоровье сперматозоидов и наладить репродуктивную функцию мужчины.

Подведение итогов

Теперь вам стало известно, что такое сперматозоид. Данная клетка является самой маленькой в организме мужчины, однако она выполняет очень важные функции. Также гамета имеет свои индивидуальные особенности. Именно сперматозоид позволяет мужчине продолжить свой род и воспроизвести потомство. Стоит отметить, что строение и функции этой клетки изучаются еще в школьной программе. Каждый человек, в особенности мужчина, должен знать о том, что такое сперматозоид. Проверьте качество своих репродуктивных клеток. Успехов!

Все отзывы о фильме Турист

The Tourist = перевели как «Турист»…надо же, а чего не «Области тьмы»?? нам же похрен обычно что там на английском …

Делать в субботу вечером, по обыкновению, было нечего и решил я поставить себе давно скаченный, но так и не просмотренный «Турист». А чего? — тандем Джоли-Депп и Далтон в прикуску, обещали, как минимум, скрасить вечерок чем-то вроде «Миссис и мистер Смит»… Ага, щазз…

Первое, что бросилось в глаза — это внешность несколько увядшей красавицы. Как то переборщила Анджелина с диетами что ли.. Ну да ладно, не мое это дело — обсуждать женщину и лучше мне сразу перейти к ее профессиональной деятельности. Коей, в прочем, режиссер да и сценарий фильма похвастаться не дали, ни Деппу, ни Джоли. Ну Депп, плохо играть в принципе не умеет, и вроде пытается соответствовать тому бреду, изобразить который нужно, да у него как у Шарапова среди банды — «10 классов на лбу нарисованы» , то есть выглядит он слишком достойно среди тех идиотов, которыми наводнен сюжет этой фантасмагории. А Джоли… Анджелина уже доказала в Солте, что вполне органично выглядит в киноговне, особенно про каких-то непонятных русских, почему то говорящих на мове.. У меня вообще складывается впечатление и довольно веские опасения, что локализаторы скоро начнут перемонтировать и даже переснимать голливудские фильмы на свое усмотрение и вкус, который у них почти всегда отсутствует напрочь.
Актерский состав, тем не менее доставляет и все они так или иначе засветились уже в ярких и даже эпохальных картинах, вплоть до «Заводного Апельсина» от Сами-Знаете-Кого…Но все они превратились в говно как трюфеля в заурядном супе фабричной столовки… Джоли как бриллиант — его необходимо правильно гранить, и вставлять в соответствующую огранке оправу. А не использовать как инструмент для нарезки оконного стекла — в алюминиевом корпусе с деревяной ручкой.. Но вернемся к кине — она, кина эта, вштырила по самое не балуйся. Начало эпичное — идиоты копы, идиоты разведчики, и кругом предатели, продажные агенты и только один умный интерполовец-венецианской штабквартиры, который понимает что Деппа могут убить ни за что. Остальным на гражданина США тупо насрать.
Но поражают не столько причинно-следственные связи, сколько «входы и выходы» в повороты сцен. Вот сидит вроде не глупый мужик, препод, епта, математег. А верит в сказки как малыш в деда-мороза — пришла такая телка омайгад ниоткуда, села к тебе рядышком и учитель вдруг верит что он ей реально интересен. ОК ну может у перца спермотоксикоз застлал мыслительные процессы, но когда его так романтично кинули спать на какой то кушетке (типа на которой кимарил сам Онорэ и хто-то там ишо) после «такога обешчающяго поцалуя» а утром, втихаря, зачем то запозорили как поца, прислав прислугу что бы та разнесла инфу по всему отелю…О, но это тока начало захватывающей лавстори — диалога тупее чем звонок Деппа по телефону администратору отеля я еще не слышал нигде, даже в фильмах Эйрамджана про бабников. И потом начинается, собственно, сцена за сценой, где события разворачиваются таким нелепым образом, что начинаешь гадать что именно курил драматург во время рождения цепи событий главных героев. Диалоги….ну….нет слов…
Я не пойму кто притягивает к себе — Джоли идиотов-режиссеров или идиоты-режиссеры Джоли. Она прямо-таки где-то упорно выискивает самые говносранные сценарии и ломится в них играть. Экстрим что ли такой…
Ну вечер, прямо скажем, удался одним — я сначала прих..л а потом, спасибо, поржал. Гадя Петрович Хренова, а не фильм получился. Гы-ыы — «Все казино от Лондона до Новосибирска». «Я плакаль».. автор знает ваще хде это — Новосибирск, мля?… А кто там Пирс втыкаешь минут через 7 фильма.

Лучше пересмотрите, а кто не видел — посмотрите впервые «25-й час» с Эдвардом Нортоном — вот как надо писать диалоги, сценарий и играть, мать их, а так же снимать. За такие картины памятник при жизни ставить надо.

Анатолий Штейнберг: О мире, о стране, об отрасли и… немного о себе

Глава наблюдательного совета SFT Group Анатолий Штейнберг

— Анатолий Владимирович, начинаем с общего — заканчиваем конкретным. Мир, страна, отрасль, компания… Что вы видите в мире?

— В мире, если говорить о политической ситуации, я вижу мало хорошего. Мне часто приходится бывать в Европе. У меня есть родственники, которые очень давно живут, в частности, в Германии. Даже выросшие там. Характерная ситуация с одним молодым племянником. Ближе к сорока. У нас была беседа, когда начиналась Арабская весна. Два с лишним года назад. Когда бомбили Ливию, помню, мы обменивались мнениями, что европейцам это аукнется. Во-первых, ливийцы никогда не будут так хорошо жить, как прежде, — Каддафи создал уникальную страну. А во-вторых, я, не будучи политологом, тогда сказал, что все эти люди придут в Европу. А дальше — они перетрахают всех ваших немок по той причине, что придут молодые здоровые мужчины, отягощенные спермотоксикозом.

И вот мне мой племянник звонил после Кельна, после Нового года, у него квартира как раз окнами выходит на эту площадь, он все видел своими глазами. Звонил мне, говорил: “Да что же это, почему такое происходит?” Для меня это простые, абсолютно элементарные, уровня детского сада понятные вещи, без какой-либо политики. Что так должно было произойти, не могло быть иначе. Мне не понятно, когда я смотрю на европейских политиков и на ту же госпожу Меркель. Или это такое дремучее бескультурье, когда люди не знают истории, не чувствуют, плохо владеют культурологией. Изменение культур народов, психология народов и национальностей — на этом попадают очень многие политики. В Советском Союзе проблема была — в свое время не сделали такую культурную оценку Афганистана и попали…

Сколько можно наступать на одни и те же грабли? И в Европе, я вижу, нет политиков, которые понимают культуру других народов. Почему происходит так. А для меня это показатель, что уровень культуры европейских и в целом мировых политиков упал катастрофически по сравнению с политиками конца ХІХ и до середины, наверное, ХХ века, которые были высокообразованные и понимали мир совершенно по-другому.

Это одна сторона вопроса, другая — меня вообще поражает настроение людей и бизнеса в Германии. В достаточно серьезном бизнесе, в том числе в нашей отрасли. Я общаюсь с людьми, занимающими посты в компаниях. Но вдруг сталкиваюсь с фразой: “А нам не рекомендована поставка оборудования в Россию”. Компании наши, отраслевые, которые всегда работали и успешно поставляли оборудование, их всегда поддерживали, в том числе “Дойче лизинг”, система поддержки экспорта. Все было направлено на развитие экспорта. И вдруг сталкиваюсь с тем, что мне говорят: “Нам не рекомендовано”. И стыдливо прячут глаза при этом. Совершенно другая ситуация, когда разговариваешь с американцами. Те приезжают, говорят: “Что? Нам кто-нибудь может рекомендовать? Ни за что. Мы тут же снесем любого президента, если нам не порекомендуют делать бизнес. Мы зарабатываем, у нас не вооружение, не какие-то космические технологии, мы поставляем обычное оборудование для обеспечения жизни людей. Поэтому не может быть никаких рекомендаций”.

И американцы занимают рынки европейцев. Я говорю об этом европейцам, и они опять стыдливо прячут глаза.

Очень странная ситуация и непонятная. Для себя я пока не могу ответить на вопрос, что происходит. Или это действительно такая катастрофическая, чуть ли не сателитная зависимость, или это все-таки проблема культурологии.

Россия — страна европейская, и мы, я имею в виду, все население России и бизнес, давно не мыслим себя вне европейских рамок.

Это главная проблема, которую я вижу сегодня в мире.

Почему я остановился только на Европе? Россия — страна европейская, и мы, я имею в виду, все население России и бизнес, давно не мыслим себя вне европейских рамок. Мы живем в этом обществе и точно так же интегрированы. И для многих из нас эта ситуация с санкциями, если не создает каких-то реальных проблем в бизнесе или текущей жизни,  то все равно имеет такой тяжелый эмоциональный окрас. И хотелось бы от этого избавиться.

Что касается страны… Безусловно, экономическая политика в стране должна быть и могла бы быть более эффективной. Значительно более эффективной, потому что это естественно — поддерживать развитие внутреннего бизнеса, внутреннего производства по всем отраслям. У нас есть такие возможности, уникальные отрасли. И это не какие-то сверхтехнологичные отрасли.

Если говорить о России, то есть две самые главные отрасли в этой стране. Это сельское хозяйство и лесопромышленный комплекс. Почему? Потому что только эти две отрасли закрепляют за страной территорию. Потому что работают на земле с возобновляемым ресурсом. Все остальное — это невозобновляемый ресурс. А для такой страны, как Россия, владеющей огромными территориями, чрезвычайно важно, чтобы эти территории были заселены, успешно вовлечены в хозяйственный оборот.

И, по моим оценкам, лесопромышленный комплекс мог бы давать до 5% процентов ВВП. При этом со стороны государства не надо никаких субсидий. Главное — не мешать бизнесу. Достаточно создать дружелюбное для бизнеса законодательство. Я говорю о лесопромышленном комплексе, но это касается любой отрасли.  

Многие регионы с богатыми лесными ресурсами сегодня недоступны для хозяйственного освоения в силу выработки лесозаготовительной инфраструктуры, созданной еще в советские времена. Отсутствие частной собственности на лесные ресурсы не позволяет бизнесу, крупным компаниям вкладываться, создавать эту лесозаготовительную инфраструктуру. Поэтому происходит нерациональная, хищническая вырубка на тех территориях, где была в советские времена создана лесозаготовительная инфраструктура. В то же время есть регионы, где лес просто гибнет. Есть такой термин, как расчетная лесосека — это количество леса, который можно заготовить на данной территории, при обеспечении его естественного лесовосстановления. Есть территории, где расчетная лесосека вырубается, превышается заготовка. В то же время лесовосстановительных работ не производится. Значит, данные территории выпадут с качественного лесного фонда.

Есть две самые главные отрасли — сельское хозяйство и лесопромышленный комплекс.

Нужно иметь в виду также, что естественное лесовосстановление, происходит  более низкопородным составом. Хвойную древесину вырубили, первоначально самовосстановится лиственная. И только после того, как лиственный лес вырастет и закрепится, постепенно начнет восстанавливаться хвойник. А так просто — вырубил хвойник и он тут же сам восстановился —  не получается.

В нашей отрасли необходимо некое соглашение между государством и бизнесом. Государство освобождает на какое-то время от платы за лесные ресурсы, от налога на имущество. Инвесторам предоставляются льготные налоговые режимы для предприятий… Плюс государство берет на себя социальную инфраструктуру в тех регионах, где создаются новые лесозаготовительные предприятия, потому что нужны школы, больницы, детские сады, дороги, культурные центры. Полная социальная инфраструктура, если мы хотим, чтобы в лес шел высококвалифицированный персонал, который бы там жил не вахтовым методом, а нормально осваивал эту территорию.

Для бизнеса, если он будет брать на себя весь комплекс этих задач, любой проект станет нерентабельным. Единственное обязательство бизнеса —  минимальный уровень заработной платы. И этот уровень заработной платы должен быть высоким и достойным. Скажем, две тысячи долларов. Минимальный уровень заработной платы. Это обеспечивает подоходный налог и все прочие налоги с заработной платы. Именно они должны обеспечивать и содержание территории, и поступления в бюджет государства. Сегодня, многие компании стараются “оптимизировать” выплату заработной платы. Подоходный налог не платится — это надо прекратить.

Достоинство нашего леса — северная сосна. Длинное волокно. Это качественный лес даже по сравнению с южной сосной, где длина волокна более короткая. В свое время у нас была достаточно хорошо развитая текстильная промышленность. В Советском Союзе производили большое количество тканей удовлетворительного качества. Мы обеспечивали свое население хлопковыми тканями. Также производили большое количество искусственного волокна — вискозного. Сегодня у нас практически не осталось заводов по производству вискозных волокон. И целая промышленность уничтожена. В то же время, если говорить об общемировых тенденциях, одним из главных мировых ресурсов является вода. Пресная вода. Выращивание хлопка связано с большим потреблением пресной воды. И в традиционных хлопко-производящих странах, а это Египет, Пакистан и так далее, возникают серьезные проблемы, поскольку, во-первых, нехватка пресной воды, во-вторых,  при интенсивном выращивании хлопка, при таком искусственном орошении, происходит засаливание почвы, то есть плодородные  почвы выводятся из хозяйственного оборота. И, в конце концов, через какое-то время возникнет нехватка хлопковых волокон. Вискозное волокно всегда было заменителем хлопка. И может быть востребовано в ближайшем будущем. 

— Из чего его делают?

— Вискозу? Из целлюлозы. Производится вискозная целлюлоза, а потом, в зависимости от последующей обработки, делают аналог хлопка, аналог шерсти, и даже аналог шелка. То, с чем стопроцентно все сталкиваются, — подкладочные ткани в мужских костюмах — это вискоза. Не считая супер каких-то брендов, где используется чистый шелк. Но это уже товары для снобов, а не для широкого потребления. А учитывая стремительный рост населения в Индии и Китае, Юго-Восточной Азии, скоро они столкнутся и уже сталкиваются с проблемой, что сами себя хлопком не обеспечат. Тем более хлопок дорожает, а население не очень богатеет. И востребованность вискозных тканей будет расти.

Говоря о развитии лесопромышленного комплекса, грамотно спланированное  размещение крупных комплексов, производящих вискозное волокно, даст толчок и для текстильной промышленности. Первым этапом — химическая промышленность, производящая вискозные нити из целлюлозы. И второй этап — непосредственно текстильные предприятия, производящие ткань. Следующий этап — можно самим и шить, почему бы и нет? Казалось бы, простая вещь, но…

Достаточно правильно выстроить цепочку и сформировать налоговые режимы. Я думаю, что возможности такие есть. Мне странно, почему это не делается и не планируется. То же самое я мог бы показать и по другим отраслям.  Но есть, видимо, другие задачи.

— Это вы как государственный муж. А как президент корпорации…

— Мы же говорили о стране, а теперь о бизнесе… Я считаю, что в стране очень низок уровень концентрации бизнеса в нашей отрасли. Очень низкий уровень. Есть практически одна серьезная компания, это группа “Илим”. Мировой масштаб. Есть сыктывкарское подразделение группы “Монди”, и хорошо, что оно есть. Есть Архангельский ЦБК и группа “Палп милл”, которая развивается уже как минимум в двух странах — России и Украине. Собственно, все. Больше серьезных крупных игроков в нашей отрасли нет. Если переходить к отрасли упаковки, в частности, гофроупаковки, то на сегодняшний день у нас нет ни одной компании даже среднеевропейского уровня. Группа “СФТ”, наверное,  по совокупности производства в этой отрасли самая крупная. С учетом того, что мы имеем абсолютно вертикальную интеграцию сбора, заготовки макулатуры,  производства лайнеров. Вышли на объем производства бумаги и картона 400 тыс. т/год . По гофропродукции — порядка 400 млн. кв.м в год. Тем не менее, я считаю, что это даже не уровень среднеевропейской компании. Среднеевропейская компания должна производить около миллиарда квадратных метров гофропродукции по году и тысяч 700 хотя бы тонн по лайнерам. Я вижу, что только крупные компании сегодня в состоянии обеспечивать непрерывную модернизацию производства, сохраняя состояние своего предприятия на актуальном технологическом уровне.

Есть ряд компаний, которые хорошо построены, и в какой-то момент, казалось что они успешно функционируют. И вдруг они начинают банкротиться. А что произошло? России и, наверное, Украине очень повезло с  отраслью гофропроизводства. Потому что в Советском Союзе его практически не было. Это вынудило создавать новые гофропроизводства на современном оборудовании, и мы в этой части на сегодня находимся на нормальном технологическом уровне. Не на самом современном, потому что мы все-таки не покупаем самое передовое и современное оборудование, но и не самое плохое, существенно выше среднего уровня передовых компаний.

Но как это создавалось и как складывалось? Во-первых, Россия имеет избыточное производство крафтлайнеров, чистоцеллюлозных упаковочных картонов. И когда в Россию пришли западные компании, производители продовольствия в первую очередь, они стали диктовать свои требования по  упаковке. На этот запрос бизнес откликнулся, и было достаточно поставить какой-то простенький гофроагрегат невысокого качества и недорогие перерабатывающие линии, но брать крафлайнер, дорогой сверхвысококачественный упаковочный картон и даже на несложном оборудовании ты получал упаковку хорошего качества, которая удовлетворяла западные компании. Так они сформировали моду на качественную упаковку.

Потянулись и отечественные компании, и это сформировало рыночный запрос. Небольшие производители, частные предприниматели, которые начинали буквально с гаража, увидели расширяющийся рынок, воодушевились этим и стали приобретать лучшее, более производительное оборудование. И так появилось несколько хороших предприятий на современном оборудовании. Но ошибка была в чем? В какой-то момент даже эти люди взяли кредиты и построили очень современные, на лучшем немецком оборудовании производства. Они думали, что, создав эти производства, через какое-то время станут счастливыми. Что еще желать, вспоминая то, с чего они начинали. Построим отличный завод, который в принципе соответствует европейскому по оснащению. Но проходит время, и кредиты надо отдавать. А потом, чтобы оставаться на необходимом технологическом уровне, в гофробизнесе надо довольно часто проводить реновации. Нужно вкладывать, вкладывать, вкладывать… А еще висит кредит серьезный.  И тут люди начинают понимать, что счастье не наступает. Что оно все дальше отодвигается.

В какой-то момент производства эти можно было продать. Но — ведь я столько вложил, значит, я должен получить больше. И предприятия загоняются в большую финансовую яму. Я не видел ни одного примера разумного выхода из такой ситуации. Иногда банки забирают акции.  Я считаю, что это тоже не очень положительный пример. Что банку с этим делать? На какой-то период они становятся партнерами, но это тоже достаточно бесперспективно.

И почему я говорю про крупные компании? Только крупные компании, сосредоточив у себя в руках достаточные финансовые ресурсы, имеют возможность консолидировать их на каком-то направлении. Сегодня построили или модернизировали одно предприятие, выдохнули, переждали, пошли на другое и так далее. У них выше финансовая устойчивость, более эффективный менеджмент, поскольку появляется возможность в крупную компанию привлекать дорогих специалистов узких специальностей, но их не надо много на каждый завод, если объектов несколько. Может быть один на всю компанию узкий специалист. Появляется возможность более эффективно работать с поставками сырья, материалом, оборудованием. С крупным покупателем разговаривают совершенно по-другому, появляется возможность на более выгодных условиях привлекать более дешевые финансовые ресурсы. На мой взгляд, у нас отрасль недостаточно пока консолидирована. Отрасли еще предстоит пройти этот путь.

— А кто вам ближе по душе из европейских корпораций? На ком вы учитесь, к кому присматриваетесь?

—  Вот есть книга Майкла Смерфита. Я знаком с этим человеком. Когда я начинал строить этот бизнес, он строился не спонтанно. В чем разница построения бизнеса нашей компании и бизнеса тех людей, которые, может, и случайно пришли в эту отрасль, по стечению обстоятельств.  И постоили достаточно успешно, и дошли до определенного уровня. У нас это было не спонтанное, а осознанное решение. После продажи Байкальского комбината,  вынужденной продажи, прошла моя эвакуация из Сибири в Москву. Возникла проблема — как жить дальше, чем заниматься, как строить бизнес?  Ведь Байкальский комбинат — уникальное предприятие федерального уровня с международным масштабом.  По бизнесу Байкальского комбината я объехал весь мир. Это отдельная, интереснейшая часть моей жизни. Очень горжусь.

В Советском Союзе была монополия внешней торговли. И было внешнеторговое объединение “Экспортлес”, которое занималось  поставкой всей продукции лесной, целлюлозно-бумажной, деревообрабатывающей промышленности на экспорт. В какой-то момент монополия внешней торговли была разрушена. Появилась возможность экспортных поставок. Мне кажется, что я был самым первым, кто осуществил самостоятельную экспортную поставку.

— То есть от предприятия напрямую?

— Напрямую без посредников.

— Что это было?

— Целлюлоза в Китай с Байкальского комбината. Китай тогда (90-е) был только на пороге роста. Потребление целлюлозы было ничтожное. Весь Китай завозил импортной небеленой целлюлозы порядка 200 тысяч тонн в год. Закрывался поставками из США и Канады. Мы начали поставлять и беленую, и небеленую целлюлозу. Байкальский комбинат мог произвести до 100 тыс. т небеленой целлюлозы, кроме того что беленую и вискозную делал. Мы начали конкурировать с американцами. И в какой-то момент пришла мысль: надо их вообще оттуда убрать. Я посмотрел, кто еще производит целлюлозу. Крупнейший производитель небеленой целлюлозы — чилийская компания “Арауко”. Я съездил в Сантьяго, мы договорились с чилийцами, и в течение семи-восьми месяцев довели долю американцев и канадцев на китайском рынке до 5%. Но потом рынок Китая стал так стремительно расти, что невозможно было никому закрыть эту потребность. И кстати, если уже говорить про Китай, то он сейчас один из самых крупных производителей целлюлозы всех видов. Кроме того, он и самый крупный импортер. Не только крупнейший производитель. На порядок выше России. Это была успешная бизнес-идея, которая и реализована была успешно.

Я съездил в Сантьяго, мы договорились с чилийцами, и в течение семи-восьми месяцев довели долю американцев и канадцев на китайском рынке до 5%.

За спиной у меня был масштабный бизнес, поэтому и смотрел на будущее я уже по-другому. Психология людей, которые растут, условно, с гаража, и которые приходят из крупного международного бизнеса, — совершенно разная.

У меня была проблема — надо начинать все снова. А поскольку жизнь проведена в целлюлозно-бумажной промышленности, то трудно придумать что-то другое. Я брал книги, очень благодарен Александру Шварцу, что он издает эти базы предприятий ЦБП. Почти год я сидел и изучал эти базы,  просто листал, думал, размышлял о предприятиях.

Пришла мысль, что есть почти не занятая ниша — производство гофрокартона. Растет в год почти на 14 %. Здорово! А дальше посмотрите, что есть в этой отрасли. А ничего нет. Есть мелкие предприятия, Советский Союз успел построить хороший завод  в Набережных Челнах. Точно такой же завод был построен в Кишиневе и Уссурийске. К сожалению,  кишиневский завод успешно погиб. Уссурийский оторванный от промышленно развитых регионов… Причем эти предприятия были построены не Министерством целлюлозно-бумажной промышленности. А Госснабом. В общем, макулатурщики вложились, не ЦБП. Там предполагалось сразу использование макулатуры, и лесники свысока смотрели на это дело. Но построили. Набережные Челны, я считаю, и сегодня лучший завод. А больше серьезных предприятий не было.

И когда я читал, смотрел, натолкнулся на Каменскую бумажно-картонную фабрику. Я выяснил, что частью акций фабрики владела группа “Фокс”, некий Александр Риммер, и частью предприятия владели, по-моему, самарские газовики. Предприятие было убыточным, 1760 человек работает. Производит порядка 30 тыс. т упаковочного картона  и 30—32 млн. кв. м гофропродукции на петрозаводском гофроагрегате шириной 1400 мм.

Провели переговоры с собственниками, которые, в первую  очередь газовики, продали контрольный пакет. Мы пришли на это предприятие своей байкальской командой. Через пять месяцев предприятие стало давать прибыль. И через полгода там уже работало 1000 человек. Невозможно на такие маленькие объемы продукции иметь такое огромное количество работающих.

— Это градообразующее предприятие?

—  Безусловно, это градообразующее предприятие, Кувшиново, но там всего девять тысяч населения. И предприятие 1760 человек, там больше ничего не было. Все работали на одном предприятии, и это тоже очень плохо. Сокращение мы провели достаточно безболезненно, потому что люди и сами понимали, что они в основном бездельничают на этом предприятии. На фабрике были старые бумагоделательные машины, четыре, полученные из Германии по репарациям после войны. Это машины начала ХХ века. Мы их модернизировали, сегодня они у нас производят около 50 тысяч тонн.

— Сколько работает машин?

— Все четыре работают. Продукция рентабельная, поскольку машины бесплатные практически, они давно самортизированные.   Когда мы подняли объем производства, на гофроагрегате мы достигли уровня 42 млн. квадратных метров, на этом агрегате 1400 мм. Мы поняли, что гофропродукция очень интересная как бизнес-тема. И уже стали смотреть на всю отрасль.

Заводоуправление Каменской БФ

На Каменской фабрике еще было две машины, которые в свое время были куплены в Италии вместе с автоВАЗом для производства специального автомобильного картона, который вставлялся в двери и крыши.

— Прессованный картон?

— Толстый 4-миллиметровый картон, вследствие чего все эти машины гремели, как барабан. Сейчас он не используется. Это был тяжелый и плотный картон.

— Но он не рулонами шел?

— Нет, пластинами. Его решили использовать как переплетный для книжных обложек. Это был хороший рынок, книги издавались. Для нас всегда была важна доля рынка. И если мы делаем лучший переплетный картон на Каменской фабрике, то надо посмотреть и увеличить долю рынка. И мы нашли еще Алексинскую бумажно-картонную фабрику. Она тогда называлась “АКИД”. Мертвая была, абсолютно мертвая фабрика. Производила перед нашей покупкой 3 тыс. т картона в год. Купили эту фабрику, стали на ней тоже производить достаточно большое количество переплетного картона.

Новая БДМ на Каменской БФ

И на какой-то момент на российском рынке мы достигли 40 % переплетного картона. К сожалению, с течением времени потребление переплетного картона стало снижаться, появлялись конкуренты.  Две машины Каменской фабрики — это были машины шириной 4200, которые производили в год всего 16 тысяч тонн картона. Мы посчитали это чрезвычайно нерациональным. Они давали прибыль, но мы приняли решение их демонтировать. И в этом здании построить новую хорошую бумажную фабрику. Что мы и осуществили, и сейчас там у нас самая крупная и самая современная в России бумагоделательная машина. По производству упаковочного картона на новой машине мы вышли на уровень 18 тысяч тонн в месяц. На этой машине у нас предстоит второй этап модернизации. И, думаю, мы добавим порядка 60 тысяч тонн в год. 18 тысяч тонн — это уже 200 тыс. т по году. Мы должны выйти на 250—270 тысяч тонн на этой фабрике.

— У меня как раз перед глазами новость: Пратт поставил машину на 370 тысяч тонн в год макулатурного картона, инвестиция  260 млн. долларов.

— Я не могу сказать, что у нас такие инвестиции, но они сопоставимые. Мы, безусловно, сэкономили за счет того, что за базовую машину взяли секонд-хэнд и модернизировали ее. Модернизацию у нас осуществляла фирма “Андриц”, которая выиграла тендер. В тендере участвовали “Метса” (???), “Фойт” (???)  и “Андриц”. Мы не делали ставки на машиностроительные компании второго эшелона, даже Италию, Францию не брали. Только первый эшелон. У нас абсолютно современная бумагоделательная машина. Мы на сегодняшний день имеем планы по реконструкции Алексина и доведения его до 100—120 тысяч тонн лайнера. есть планы по реконструкции и модернизации машины в Майкопе, смотрим возможности по приобретению гофропроизводств с тем, чтобы выйти на уровень среднеевропейской компании. У нас такие планы…

— Миллиард?

— 800 млн — миллиард по гофре и 600—700 тысяч тонн по картонам. В чем  еще проблема маленьких компаний — у них нет глубокого стратегического планирования. Чем крупнее компания, если она управляется успешным грамотным менеджментом, тем глубже стратегическое планирование. Вы задавали вопрос, на кого я смотрю из западных компаний. Когда я строил бизнес, мы начали развиваться и я посетил практически все ведущие европейские компании. Удивительно, но меня принимали на уровне собственника и топ-менеджмента. Это был 2004 или 2005 год.

В чем  еще проблема маленьких компаний — у них нет глубокого стратегического планирования.

— То есть вы приезжали стучались и спрашивали: “Можно посмотреть, как вы работаете?”

— Я представлялся, и меня принимали. В то время я познакомился с Майклом Смерфитом, был в Дублине. И с Тони Смерфитом, теперешним продолжателем дела. И в офисе встречались, и он приглашал в свой гольф-клуб. В то время на меня впечатление произвела “Сайко” (???), испанская компания с центром в Сарагосе. Одна из крупнейших мировых компаний. Когда я был у них на заводе в Сарагосе, мне показывали бумагоделательную машину. Говорят:

— Вот самая лучшая машина в Европе. Новая, мы построили.

Я всю жизнь в этой отрасли. Идем, смотрим машину. Хорошая машина, стеклянные окна, все видно. “Можно” поднять защиту? Поднимают. Смотрю и спрашиваю:

— А цилиндры какого года выпуска.

— 1956 года.

—  А станина какого года?

—  1956 года.

—  И вы говорите, что это самая современная машина?

—  Да, это самая современная машина, потому что это железо, цилиндры и станина еще сто лет проработают, а качество делает мокрая часть, прессовая часть, автоматизация, приводная часть. Все это новое.

Для меня это был показатель. Нам, растущей компании, не нужно придумывать велосипед и  строить новый завод за 300 или 500 млн. долларов. Не надо! Вот ведущая огромная компания говорит — у нас современная машина. Поэтому наш пример  реализации проекта на Каменской фабрике точно следует идеологии компании “Сайко”. И более того, этим пользуется и компания Смерфит, и другие крупные компании. Не нужно всегда все покупать с нуля. Если есть хорошая база, с хорошей инфраструктурой, тогда получается успешный проект. И нужно же оценивать рынок. Если рынок адекватно воспримет именно это, то надо это и делать. Я сказал, что цифры у нас сопоставимые, тем не менее они существенно меньше, потому что мы использовали готовые здания,  инфраструктуру, дороги и так далее. Вот этим мы добились оптимизации проекта.

Возвращаясь к тем людям из отрасли, с кем я общался, очень важно изучать опыт Майкла Смерфита, который создал крупнейшую компанию. И он за всю жизнь не построил ни одного завода. Вот его отец, то есть дед сегодняшнего главы компании Тони Смерфита строил, а Майкл уже ничего не строил. Он только покупал компании. И это огромное искусство Майкла — он научился успешно покупать компании. Почему иногда или зачастую выгоднее купить, чем построить? Когда ты строишь завод, то, как я понимаю, его нужно строить на растущем рынке. Если рынок уже стабилизировался и рост не такой высокий, то лучше проводить модернизацию или приобретать предприятия, потому что это не влечет за собой скачкообразного изменения рынка, объема продукции. И не влечет за собой возникновения жесточайшей конкуренции за вхождение на рынок.

Ты покупаешь предприятие, у которого уже есть доля рынка. И увеличиваешь его эффективность, если сумеешь это сделать. Ну, не сумел, значит, тебе не повезло. Вот это опыт Майкла Смерфита.

Ты покупаешь предприятие, у которого уже есть доля рынка. И увеличиваешь его эффективность, если сумеешь это сделать.

Достаточно много мне приходилось встречаться с Кордом Принцхорном из «Гамбургер Груп». Он моложе меня существенно, но очень интересные беседы у нас были. В свое время у него были планы построить большую машину в России. Мы у меня в офисе сидели, обсуждали это.

— Я поставлю машину восемь метров шириной и 400 тысяч тонн по объему производства.

Я ему говорю:

— Российский рынок не готов к такой машине. По разным причинам. Как по обеспечению сырьем, так и по объему потребления.  

Через несколько лет он со мной согласился. Сказал: “Ты был прав тогда в оценках”. В конечном итоге  он не пошел сюда, он завод в Венгрии построил. Машину там запустил бумагоделательную.

Богатейшая семья, история длиннейшая, семейная компания. Он предложил меня свозить на один из своих заводов. Километров 120—150, наверное, от Вены. Заехал за мной в гостиницу, сам за рулем. Приехали на завод, провел экскурсию. На заводе был один инженерно-технический сотрудник. Все остальные — рабочие. Их тоже мало. Уровень автоматизации высочайший. И очень памятно для меня, когда он задал вопрос: “Вот скажи, какая у вас глубина стратегического планирования?”

— То есть, на сколько лет вы планируете?

— Да, на сколько лет. Я сказал ему честно — на десять лет. Он ответил, наверное, для вас это неплохо, но у нас — тридцать лет. Глубина стратегического планирования тридцать лет! Я понимаю —  почему. Если говорить о гофропроизводстве, то срок технологической актуальности оборудования, допустим, гофроагрегата, десять лет. А дальше нужно делать модернизацию. Пока мы в этой отрасли, скорости агрегатов уже достигли четырехсот метров в минуту.

Это нормальные, актуальные гофроагрегаты, которые сегодня производятся. Когда мы пришли в отрасль, у нас тут были гофроагрегаты ниже ста метров. Сейчас мы работаем до трехсот метров. А вот в Украине уже поставили гофроагрегат до четырехсот метров скорости. Все очень быстро развивается. Если говорить о бумагоделательной машине, то тридцать лет она будет работать. Я вам привел пример, что основное железо, металл и сто лет проработает. На сегодняшний день есть заводы, которые эксплуатируют машины ХІХ века. С соответствующей модернизацией. Тем более если там хорошее немецкое железо стоит. Тридцать лет — глубина стратегического планирования. Возвращаясь к вопросу о консолидации в отрасли — не может маленькая компания иметь такую глубину планирования, не может делать таких инвестиций. Только крупная компания способна это делать. Это такой хороший пример из общения с Кордом.

— Сколько рынка вы захватили? И что будет через тридцать лет?

—  Планы у нас на десять лет. Выйти на уровень среднеевропейской компании.

— А представляете себе — поменять название компании? Или слиться с кем-то?

— Мы обдумывали и рассматривали возможности поменять название. Само название SFT Group не связано с отраслью — это “Сибирский Финансовый Траст”. За счет своих внутренних ресурсов компания не может быстро расти. Гораздо быстрее компания растет, если привлекается внешнее финансирование. Размышляя над ростом компании, безусловно думаешь о привлечении внешнего финансирования. И здесь, конечно, есть проблема. Вот сегодня ситуация на российском рынке — тот, кто имеет достаточные финансовые ресурсы, может купить много компаний. Если бы не эта ситуация с санкциями, я думаю, европейские компании толкались бы на нашем рынке за возможность приобретать отрасли, занимать доминирующее положение. Сегодня этого нет — санкции.

Это позволяет нам расти естественно… а  продавать компанию не собираемся.

записали Игорь Ткаленко и Константин Шабуневич, Gofro.Expert

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Как долго живут сперматозоиды, количество сперматозоидов и многое другое

Возможно, вы знаете, что для рождения ребенка требуется один сперматозоид и одна яйцеклетка, но если вы похожи на большинство людей, вы, возможно, мало что помните о сперме из уроков биологии. Если бесплодие является проблемой для вас и вашего партнера, полезно понять основы.

Как долго живут сперматозоиды?

Ответ зависит от многих факторов, но наиболее важным является местонахождение сперматозоидов.

На сухой поверхности, такой как одежда или постельное белье, сперматозоиды мертвы к моменту высыхания спермы.В воде, такой как теплая ванна или джакузи, они, скорее всего, будут жить дольше, потому что они лучше всего чувствуют себя в теплых и влажных местах. Но вероятность того, что сперма в ванне с водой проникнет в тело женщины и заставит ее забеременеть, крайне мала.

Когда сперматозоиды находятся внутри женского тела, они могут жить до 5 дней. Если вы мужчина и занимаетесь сексом даже за несколько дней до овуляции вашего партнера, есть вероятность, что он может забеременеть.

Сколько сперматозоидов вам нужно, чтобы забеременеть?

Для оплодотворения яйцеклетки женщины требуется всего один сперматозоид.Имейте в виду, однако, что на каждый сперматозоид, достигший яйцеклетки, приходится миллионы не достигших ее.

В среднем каждый раз, когда мужчины эякулируют, они выделяют почти 100 миллионов сперматозоидов. Почему выделяется так много сперматозоидов, если для рождения ребенка требуется всего одна? Чтобы встретить ожидающую яйцеклетку, сперма должна пройти из влагалища к фаллопиевым трубам, а это трудный путь, который выживают немногие сперматозоиды. Эксперты считают, что этот процесс может быть естественным способом, позволяющим только самым здоровым сперматозоидам оплодотворять яйцеклетку, чтобы обеспечить наилучшие шансы на рождение здорового ребенка.

Для тех сперматозоидов, которые завершают путешествие, попадание в яйцеклетку, покрытую толстым слоем, далеко не гарантировано.

Что вы можете сделать, чтобы улучшить здоровье вашей спермы?

Многое из того, что вы делаете для поддержания своего здоровья, может оказать то же самое и на сперму. Попробуйте некоторые из этих советов:

• Не курите и не принимайте запрещенные наркотики, особенно анаболические стероиды.
• Избегайте контакта с токсинами, такими как пестициды и тяжелые металлы.
• Ограничьте употребление алкоголя.
• Соблюдайте здоровую диету и контролируйте свой вес.
• Держите мошонку в прохладе, потому что жара замедляет выработку спермы. Для этого избегайте горячих ванн, носите боксеры вместо трусов и старайтесь не носить узкие брюки.

Что показывает анализ спермы?

Это тест, который может помочь вашему врачу выяснить, почему у вас и вашего партнера возникают проблемы с рождением ребенка.

Некоторые вещи, которые вы можете узнать из анализа:

Количество и густота спермы. В среднем каждый раз, когда мужчины эякулируют , они выделяют 2–6 миллилитров (мл) спермы, или от 1/2 чайной ложки до 1 чайной ложки.

Меньшее количество спермы может не содержать достаточного количества сперматозоидов для женщины, чтобы забеременеть. С другой стороны, большее количество может снизить концентрацию сперматозоидов.

Сначала сперма должна быть густой, а через 10–15 минут после эякуляции – разжижаться. Сперма, которая остается густой, может затруднить движение сперматозоидов.

Концентрация спермы. Также называется плотностью сперматозоидов. Это количество сперматозоидов в миллионах на миллилитр спермы. Пятнадцать миллионов или более сперматозоидов на мл считаются нормой.

Подвижность сперматозоидов.  Это процент движущихся сперматозоидов в образце, а также оценка того, как они движутся. Через час после эякуляции не менее 32% сперматозоидов должны двигаться вперед по прямой линии.

Морфология. Это анализ размера, формы и внешнего вида сперматозоидов.

Перестают ли мужчины вырабатывать сперму, когда становятся старше?

Мужчины могут сохранять способность к деторождению на протяжении всей жизни. Количество спермы, которую вы производите, уменьшается с возрастом, но даже у пожилых мужчин есть дети.

Не всякая сперма священна; взгляд на мужское бесплодие | Молекулярная репродукция человека

Аннотация

Эта статья представляет собой личный взгляд на мужское бесплодие, состояние, которое не только чрезвычайно распространено, но и является основной причиной, по которой пары прибегают к ВРТ.Внедрение ИКСИ как формы упрощенного оплодотворения оказало революционное влияние на нашу способность лечить случаи мужского бесплодия, связанного с серьезным ухудшением качества спермы. Однако считается, что широкое использование этого метода также сопряжено с риском с точки зрения частоты выкидышей, здоровья и благополучия потомства и сохранения бесплодного фенотипа в будущих поколениях. Более того, появление ИКСИ ограничило интеллектуальный интерес к этиологии, лежащей в основе мужского бесплодия, или к разработке неинвазивных терапевтических стратегий, нацеленных на пациента-мужчину, а не на физическое развертывание его гамет.Как следствие, прогресс в выяснении патологических механизмов, ответственных за мужское бесплодие, был крайне медленным. Генетические и/или эпигенетические дефекты, безусловно, имеют место во многих случаях и могут включать мутации/дефекты сплайсинга, влияющие на целостность профиля тестикулярной РНК, а также на общую кинетику процесса транскрипции. Кроме того, сперматогенез нарушается рядом факторов (возраст, курение, ожирение), многие из которых, как считается, влияют на фертильность и целостность ДНК сперматозоидов посредством создания окислительного стресса.Определение относительного вклада окислительного стресса и генетических/эпигенетических мутаций в этиологию мужского бесплодия станет основным направлением будущих исследований в этой важной, но малоизученной области

.

В начале

Я никогда не собирался становиться андрологом. И моя докторская, и постдокторская работа были посвящены контролю матки за преимплантационным развитием, и я полностью намеревался продолжить свою работу над биохимией эндометрия, когда я присоединился к отделу репродуктивной биологии MRC Роджера Шорта в Эдинбурге в 1977 году.Тем не менее, после нескольких месяцев терпеливого ожидания в гинекологической палате, пока немного ткани эндометрия упадет в мою чашу из нержавеющей стали, я, наконец, признал свое поражение и начал думать о других областях человеческой репродукции, где запас клинического материала может быть менее ограниченным. После обсуждения с Роджером мы определились с двумя приоритетными направлениями исследований: разработка новых подходов к контрацепции, особенно вакцин, и исследование мужского бесплодия.

В то время «мужской фактор» был признан очень распространенной причиной человеческого бесплодия, ответственной за большое количество личных страданий и боли, но полной загадкой в ​​отношении лежащей в основе этиологии. В 1977 году единственным диагностическим инструментом, который у нас был, был обычный описательный профиль спермы, а единственным оружием в нашем терапевтическом арсенале была искусственная инсеминация донором (AID) с использованием криоконсервированной человеческой спермы. Подразделение MRC только что приняло на работу Дэвида Ричардсона, одного из пионеров AID, и спрос на такие услуги был высок. В 1977 г. было получено более 2000 направлений на СПИД и более 200 детей, рожденных в результате этой процедуры (Richardson, 1980). Несмотря на спрос, в то время формальная поддержка таких услуг была очень незначительной, а деятельность центров AID строго не регламентировалась.СПИД был временным, почти тайным решением проблемы, но не лекарством от болезни.

Преобладающие знания о качестве спермы

Что мы знали о мужском бесплодии в то время? Правда очень мало. Мы знали, что мужское бесплодие, как правило, связано с дефектами обычного профиля спермы, которые могут влиять на подвижность сперматозоидов, их количество или их морфологию. Однако у нас было очень мало информации о происхождении этих изменений или их истинном значении.В 1977 г. господствовало мнение андрологов, что бесплодие на самом деле является просто вопросом количества сперматозоидов: пациент либо производит достаточное количество морфологически нормальных подвижных сперматозоидов для установления беременности, либо нет. Этот тип бинарного мышления стоит за пороговыми значениями количества, морфологии и подвижности сперматозоидов, которые были обнародованы Всемирной организацией здравоохранения и о которых спорят по сей день (Zhang et al. , 2014). Такое мышление также привело к тщетным попыткам лечения бесплодия путем осеменения объединенных последовательных эякулятов, чтобы компенсировать низкое количество сперматозоидов, обнаруживаемое у самцов с олигозооспермией.Еще в 1990 г. появлялись статьи, превозносившие достоинства объединения нескольких эякулятов самцов с олигозооспермией для увеличения среднего общего количества подвижных сперматозоидов при подготовке к искусственному осеменению (Tur-Kaspa et al. , 1990). К сожалению, такие благонамеренные стратегии никогда не приносили значительного успеха, потому что лежащий в их основе принцип был ошибочным (Speichinger and Mattox, 1976). Мужская фертильность никогда не была просто вопросом количества сперматозоидов.

Этот вывод был сделан много лет спустя, когда мы проводили в Эдинбурге испытания гормональных подходов к мужской контрацепции.В этих исследованиях мы вводили экзогенный энантат тестостерона для подавления выработки гонадотропинов и временного нарушения сперматогенеза. В ходе этих испытаний мы были удивлены, увидев беременность у мужчин, получавших лечение, с подавлением количества сперматозоидов в пределах патологического диапазона (~3 × 10 ⁶ /мл) (Wallace et al. , 1992). . Подобные результаты наблюдались и другими исследователями (Всемирная организация здравоохранения, 1996 г.) и напоминают нам о том, что фертильность плохо коррелирует с концентрацией сперматозоидов.Если сперматозоиды в норме, то количество сперматозоидов ниже нормы вполне может установить беременность. Точно такой же вывод можно сделать из беременностей, достижимых у пациентов с синдромом Каллмана после лечения экзогенными гонадотропинами, когда беременность наблюдается, несмотря на патологически низкое количество сперматозоидов (Dwyer et al. , 2015; Rohayem et al. , 2016). Еще одна прекрасная иллюстрация слабости, присущей обычному профилю спермы, может быть найдена в недавнем анализе фертильности у пациентов после вазовазостомии.В этой группе мужчин спонтанная беременность была зарегистрирована у 15 % пациентов с концентрацией сперматозоидов <5 млн/мл, у 21,3 % с подвижностью сперматозоидов <10 % и у 14,8 % с нормальной морфологией <1 %. Majzoub и др. , 2017). Авторы правильно заключают, что пороги нормальности спермы, установленные Всемирной организацией здравоохранения (2010), могут неадекватно отражать фертильность у пациентов после вазэктомии с реверсией, у которых нормальный процесс сперматогенеза. Все эти примеры указывают на один и тот же вывод — , что вы не можете определить потенциал оплодотворения популяции сперматозоидов, используя описательные параметры спермы, такие как количество, подвижность или морфология . По сути, не все нормально выглядящие подвижные сперматозоиды созданы одинаковыми.

Конечно, это не означает, что обычный профиль спермы не имеет значения. Напротив, при тщательном выполнении он может дать четкие данные об относительном качестве спермы для данной популяции. Используя пятый процентиль фертильных мужчин (время до беременности ≤12 месяцев) в качестве нижнего порога нормальности (Cooper et al. , 2010; Auger et al. , 2016), вполне возможно определить, является ли качество спермы пациента является «нормальным» по сравнению с мужчинами с доказанной фертильностью в той же популяции.Труднее установить, эквивалентно ли «субнормальное» в этом контексте «субфертильному». Профилю спермы как прогностическому инструменту не хватает точности, потому что он может дать только косвенное указание на относительную эффективность лежащего в основе процесса производства спермы. Мы должны обращать внимание не столько на внешний вид сперматозоидов, сколько на их способность к оплодотворению.

Янагимачи и тест на проникновение ооцитов хомяка без зоны

В 1976 году уважаемый биолог гамет Рюдзо Янагимачи опубликовал дозорную статью об оплодотворении яйцеклеток хомяков сперматозоидами разных видов, включая человека (Yanagimachi et al., 1976). Эта статья была буквально настолько невероятной в то время, что первоначально была отклонена по крайней мере одним из ведущих журналов в этой области на том основании, что она «невозможна». Тем не менее, дальнейшие исследования показали, что способность сперматозоидов человека сливаться с яйцеклетками хомячка, не содержащими зон, была не только возможна, но и имела физиологическое значение, поскольку архитектура соединения сперматозоидов и ооцитов, по-видимому, точно повторяла гомологичную ситуацию, т. е. что экваториальный сегмент капацитированные сперматозоиды, реагирующие с акросомой, внезапно приобретают способность связываться и сливаться с желточной мембраной ооцита MII (рис. 1). Этот биотест дал нам новый мощный инструмент для изучения оплодотворяющего потенциала сперматозоидов и реальной проверки гипотезы о том, что не все сперматозоиды созданы одинаковыми. Мы разработали стандартизированные протоколы для проведения анализа, которые были обнародованы с помощью Всемирной организации здравоохранения (Aitken, 1986), и продемонстрировали, что анализ способен генерировать клинически значимые данные в долгосрочных проспективных исследованиях и программах донорской инсеминации (Irvine and Aitken). , 1986; Айткен и др., 1991). Однако, несмотря на свою биологическую значимость, этот анализ никогда не станет диагностическим тестом для рутинного клинического применения; он был слишком сложным, трудоемким и трудным для стандартизации. Скорее, анализ проникновения ооцитов хомяка был отличным экспериментальным исследовательским инструментом, который позволил нам получить механистическое представление о природе дефектной функции сперматозоидов.

Рисунок 1

Взаимосвязь между образованием АФК сперматозоидами человека и их способностью к слиянию сперматозоидов и ооцитов, измеренная с помощью теста на проникновение ооцитов хомяка без зоны. На вставке показан ооцит хомяка без зон, содержащий несколько деконденсированных головок сперматозоидов человека в цитоплазме (указаны стрелками). Каждая точка данных представляет собой независимого пациента, которого можно отнести к одной из трех общих категорий: (i) высокий АФК, низкий потенциал оплодотворения (синий), когда окислительный стресс связан с бесплодием пациентов, (ii) низкий АФК, низкий потенциал оплодотворения (зеленый), когда бесплодие имеет другую причину и (iii) низкий уровень АФК, высокий потенциал оплодотворения (красный), когда сперматозоиды кажутся нормальными.После того, как Aitken и др. (1989а).

Рисунок 1

Взаимосвязь между выработкой АФК сперматозоидами человека и их способностью к слиянию сперматозоидов и ооцитов, измеренная с помощью теста на проникновение ооцитов хомяка без зоны. На вставке показан ооцит хомяка без зон, содержащий несколько деконденсированных головок сперматозоидов человека в цитоплазме (указаны стрелками). Каждая точка данных представляет собой независимого пациента, которого можно отнести к одной из трех общих категорий: (i) высокий АФК, низкий потенциал оплодотворения (синий), когда окислительный стресс связан с бесплодием пациентов, (ii) низкий АФК, низкий потенциал оплодотворения (зеленый), когда бесплодие имеет другую причину и (iii) низкий уровень АФК, высокий потенциал оплодотворения (красный), когда сперматозоиды кажутся нормальными. После того, как Aitken и др. (1989а).

Важной, но упускаемой из виду особенностью этого анализа было то, что взаимосвязь между концентрацией подвижных сперматозоидов и скоростью оплодотворения можно было точно смоделировать с помощью теории распределения яда (Aitken and Elton, 1984). Мы использовали это оборудование для разработки экспериментов, в которых мы могли сравнить оплодотворяющий потенциал подвижных сперматозоидов от нормальных фертильных доноров с подвижными сперматозоидами, полученными от пациентов с идиопатической астенозооспермией (подвижность <40%), астенозооспермией, связанной с варикоцеле, и олигоастенозооспермией (<20 × 10 ^{). 6} сперматозоидов/мл и <40% подвижности).На основе сравнения подвижных сперматозоидов с подвижными сперматозоидами модель распределения яда убедительно продемонстрировала, что не все подвижные сперматозоиды эквивалентны; те, что были получены от фертильных самцов, обладали значительно более высоким потенциалом оплодотворения, чем те, которые были получены от бесплодных субъектов (Aitken and Elton, 1986).

Итак, если все подвижные сперматозоиды не созданы равными, что определяет разницу в функциональной компетентности? Ключевое понимание этой загадки пришло, когда мы обнаружили, что разница в скорости слияния ооцитов между нормальными и бесплодными самцами по-прежнему очевидна, когда поступление кальция было искусственно индуцировано с использованием ионофора с двухвалентным катионом, A23187 (Aitken et al., 1984, 1993а). Применяя модель Пуассона, мы могли ясно показать, что реакция подвижных сперматозоидов бесплодных мужчин на воздействие ионофора кальция была значительно снижена по сравнению с фертильными донорами (Aitken et al. , 1984). Такие результаты резко привлекли внимание к повреждению плазматической мембраны сперматозоидов, которое может ухудшить их способность реагировать на приток кальция с увеличением фузогенности. Этот ход мыслей в конечном итоге привел нас к сложной картине образования активных форм кислорода (АФК) и окислительного стресса.

Свободнорадикальная теория мужского бесплодия

Еще в 1979 г. Таддеус Манн вместе с Роем Джонсом и Диком Шеринсом опубликовал знаменательную статью, в которой подчеркивалась уязвимость сперматозоидов человека к окислительному стрессу (Jones et al. , 1979). Значение этой работы стало очевидным, когда мы обнаружили, что образование АФК было значительно повышено в суспензиях сперматозоидов бесплодных самцов (Aitken and Clarkson, 1987). Было обнаружено, что избыточное образование АФК этими клетками вызывает пероксидативное повреждение плазматической мембраны сперматозоидов, вследствие чего сперматозоиды теряют способность реагировать на кальциевые сигналы с увеличением слияния сперматозоидов и ооцитов.Таким образом, экспериментально мы могли показать, что если нормальные сперматозоиды были искусственно подвергнуты воздействию ROS in vitro , они потеряли свою способность оплодотворять ооциты после стимуляции A23187, точно воспроизводя ситуацию in vivo (Aitken et al. , 1993b). . Точно так же индукция перекисного окисления липидов в нормальных сперматозоидах после воздействия каталитическими количествами Fe (II) приводила к образованию популяций сперматозоидов, неспособных реагировать на A23187, точно так же, как бесплодная популяция (Aitken et al. , 1993с). Фундаментальный вывод этих исследований заключался в том, что потеря функциональности сперматозоидов в случаях мужского бесплодия связана с некоторым элементом окислительного стресса. Рисунок 1 демонстрирует силу этой ассоциации, при этом наиболее дефектное слияние сперматозоидов и ооцитов связано с высоким уровнем образования АФК. Важно отметить, что это явление не объясняло каждый случай дефектной функции сперматозоидов в когорте обследованных пациентов, но оно составляло примерно 55% случаев, когда оплодотворяющая способность сперматозоидов была серьезно нарушена (Aitken et al., 1989а,б).

Измерение генерации АФК

Основное предостережение в отношении этого типа анализа заключалось в том, что он включал использование люминол-зависимой хемилюминесценции для обнаружения клеточного образования АФК. Метод люминола очень чувствителен, но имеет два основных недостатка. Во-первых, он не специфичен для какого-либо конкретного вида АФК, а во-вторых, он будет генерировать очень сильные сигналы в присутствии лейкоцитов, которыми заражена каждая суспензия спермы человека. В ходе очень долгой и кропотливой работы мы тщательно проанализировали вклад лейкоцитов и сперматозоидов в сигнал хемилюминесценции и пришли к выводу, что, хотя загрязнение лейкоцитами является основным фактором общего образования АФК суспензиями сперматозоидов человека (Kessopoulou et al. , 1992), это не единственный источник (Aitken and West, 1990; Aitken и др. , 1992). К этому заключению впоследствии пришли и другие (Whittington and Ford, 1999) и оно было поставлено вне сомнений с появлением методов проточной цитометрии, которые позволили сосредоточить внимание на выработке АФК популяцией сперматозоидов (De Iuliis et al., 2006 г.; Purdey и др. , 2015).

В настоящее время доступно множество проверенных флуоресцентных зондов для обнаружения образования АФК популяциями сперматозоидов человека. Одним из первых подвергшихся оценке был дигидроэтидий, продукт двухэлектронного восстановления этидия (De Iuliis et al. , 2006). В этом исследовании высокоэффективная жидкостная хроматография, масс-спектрометрия, спектроскопия ядерного магнитного резонанса и спектрофлуориметрия были использованы для демонстрации того, что сперматозоиды человека генерируют из ДГЭ продукт, специфичный для супероксида, 2-гидроксиэтидий.Хотя это исследование предоставило окончательные доказательства образования супероксида человеческими сперматозоидами, есть две оговорки в отношении использования этого зонда в клинической практике. Во-первых, зонд необходимо использовать вместе с красителем, например, SYTOX green. Причина этого в том, что коммерческие препараты ДГЭ содержат следовые количества исходного соединения этидия, которое окрашивает ядра мертвых клеток в красный цвет, независимо от того, генерируют ли они АФК. На практике этот анализ имеет биологическое значение только тогда, когда он сосредоточен на субпопуляции жизнеспособных сперматозоидов.Во-вторых, мы должны признать, что широкий спектр событий окисления будет превращать ДГЭ в чувствительный к ДНК флуорохром, этидий, а не только в супероксидный анион. Поскольку проточная цитометрия не различает сигналы, генерируемые 2-гидроксиэтидием (специфическим для супероксида) и этидием (неспецифическое окисление), следует соблюдать осторожность при приписывании результатов образованию АФК. Эти предостережения (необходимость сосредоточиться на живых клетках и осведомленность о возможности неспецифического окисления) относятся к большинству зондов, используемых в настоящее время для обнаружения АФК с помощью проточной цитометрии.

Источники АФК в сперматозоидах млекопитающих

Митохондрии сперматозоидов как генераторы АФК

Источник АФК в дефектных сперматозоидах также является предметом догадок, хотя существует общее мнение, что утечка электронов из митохондриальной электрон-транспортной цепи (ЭТЦ) является важным фактором (Koppers et al. , 2008; Cassina и др. , 2015). Известно, что такое спонтанное образование митохондриальных АФК приводит к потере потенциала митохондриальной мембраны, индукции перекисного окисления липидов и подавлению движения сперматозоидов (Chai et al., 2017). В этом контексте известно, по крайней мере, три основных пути, которые участвуют в выработке митохондриальной генерации АФК сперматозоидами:

• Воздействие амфифилов, которые нарушают митохондриальный транспорт электронов . Свободные неэтерифицированные полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК) индуцируют высокий уровень образования митохондриальных АФК при добавлении к очищенным популяциям сперматозоидов человека. Эта взаимосвязь важна с биологической и клинической точки зрения, поскольку наблюдалась мощная корреляция между спонтанным образованием АФК сперматозоидами человека и содержанием в них свободных ПНЖК (Koppers et al., 2008 г.). Ключевой структурной детерминантой ПНЖК, способных усиливать митохондриальную генерацию АФК, является то, что они должны обладать амфипатическими свойствами, т.е. иметь гидрофильный участок, располагающийся на поверхности мембраны, и гидрофобный домен, проникающий внутрь мембраны (Aitken и др. , 2006). Встраивание свободных ПНЖК во внутреннюю митохондриальную мембрану, по-видимому, нарушает поток электронов вдоль ЭТЦ, что приводит к утечке электронов и генерации супероксидных анионов.Жирные кислоты не одиноки в этом контексте; мы также обнаружили множество природных (ретиноиды) и неестественных (парабены) амфипатических соединений, которые запускают митохондриальные АФК с помощью того же механизма.

• Химическая аддукция митохондриальных белков с мощными электрофилами . Примерами соединений, образующих аддукты с митохондриальными белками, являются 4-гидроксиноненаль (4HNE) или акролеин, оба из которых являются альдегидами, образующимися в результате перекисного окисления липидов (Aitken et al., 2012). Такая активность объясняет очень важный признак окислительного стресса в сперматозоидах — это самовоспроизводящийся феномен. Как только окислительный стресс инициируется такими факторами, как истощение антиоксидантов, воздействие лейкоцитов, генерирующих свободные радикалы, или лечение такими соединениями, как ПНЖК, состояние стресса становится постоянным, поскольку липидные альдегиды, образующиеся в результате процесса перекисного окисления, запускают еще большее образование АФК из митохондрии после образования аддуктов с белками внутри ЭТЦ, такими как сукцинатдегидрогеназа (рис.2; Айткен и др. , 2012). Генерация АФК, индуцированная АФК, наблюдалась многими авторами (du Plessis et al. , 2010) и объясняется этим механизмом. Кроме того, это явление может также объяснить индуцированную лейкоцитами генерацию АФК человеческими сперматозоидами (Saleh et al. , 2002).

  Важно отметить, что липидные альдегиды не являются единственными электрофилами, способными генерировать эту активность. Госсипол, компонент хлопкового масла, когда-то предложенный в качестве мужского противозачаточного средства, также активирует образование АФК путем алкилирования ключевых белков в ЭТЦ (Aitken et al., 2016b). Циклический аналог гомоцистеина, гомоцистеин тиолактон, является еще одним соединением, способным активировать митохондриальную генерацию АФК вследствие его способности связывать белки в ETC (Aitken et al. , 2016a). Негативное воздействие гомоцистеина усугубляется окислительным стрессом, поскольку параоксоназа 1 (PON-1), основной фермент, ответственный за удаление тиолактона из белков, является еще одной мишенью для алкилирования липидными альдегидами, образующимися в результате окислительного стресса.Таким образом, воздействие 4HNE приводит к накоплению гомоцистеина в сперматозоидах и дальнейшей стимуляции образования митохондриальных АФК. Существует зачаточная литература о взаимосвязи между гипергомоцистеинемией и мужским бесплодием (Ebisch et al. , 2006; Ge et al. , 2008), которая может быть заслуживающей изучения в будущих исследованиях.

• Снижение митохондриальной экспрессии запретинового комплекса . Последний представляет собой макромолекулярную структуру во внутренней митохондриальной мембране, которая, как считается, обладает функцией каркаса, поддерживая структурную целостность комплексов, участвующих в ЭТЦ.Снижение уровня запретина наблюдается в сперматозоидах бесплодных пациентов, что отрицательно коррелирует с индукцией образования митохондриальных АФК (Chai et al. , 2017). Поскольку запретин уязвим к окислительной атаке (Opii et al. , 2007) и может подавляться в семенниках окислительным стрессом (Li et al. , 2016), это может быть еще одним примером АФК. опосредованная атака на мужскую зародышевую линию, приводящая к изменениям, закрепляющим стрессовое состояние.

• Открытие переходной поры митохондриальной проницаемости (Treulen et al. , 2015). Открытие пор приводит к потере потенциала митохондриальной мембраны, нарушению регуляции потока электронов через ЭТЦ и последующему образованию АФК. Еще раз, окислительный стресс может ускорить открытие пор внутренней митохондриальной мембраны с помощью механизмов, которые могут быть обращены вспять в присутствии мелатонина (Waseem et al. , 2016).

• Индукция апоптоза .Одна часть загадки, которую мы не должны упускать из виду, заключается в том, что генерация митохондриальных АФК является ключевой особенностью укороченного пути апоптоза, используемого сперматозоидами, когда они подвергаются стрессу. Нет известных химических триггеров апоптоза сперматозоидов, которые имели бы физиологическое значение; скорее, апоптоз является их состоянием по умолчанию. Сперматозоиды будут автоматически использовать этот путь, если только им не помешает действие факторов выживания. Ключевым моментом здесь, по-видимому, является статус фосфорилирования AKT1 (рис.3). Пока последний фосфорилирован, клетки живы и функциональны, а нижележащие эффекторы апоптоза, такие как Bcl-2-ассоциированный промотор смерти (BAD), молчат. Ключом к поддержанию AKT1 в фосфорилированном состоянии является обеспечение того, чтобы фермент, ответственный за его фосфорилирование, фосфатидилинозитол-3-киназа (киназа PI3), всегда находился в активированном состоянии. Вероятно, существует множество факторов выживания, способных выполнять эту роль; пролактин и инсулин (Aquila et al. , 2005; Pujianto et al. , 2010) — это те, о которых мы знаем, но, несомненно, есть и многие другие. И наоборот, если активность киназы PI3 подавляется таким соединением, как вортманнин, то AKT1 быстро дефосфорилируется, и клетки вступают в внутренний путь апоптоза, характеризующийся активацией каспазы в цитозоле, связыванием аннексина V с клеточной поверхностью, образованием митохондриальных АФК, цитоплазматической вакуолизацией. , окислительное повреждение ДНК и потеря подвижности (Koppers et al. , 2011).

Рисунок 2

Окислительный стресс в сперматозоидах человека представляет собой самовоспроизводящийся процесс, опосредованный альдегидными продуктами перекисного окисления липидов, такими как 4HNE.(A) 4HNE обладает электрофильным атомом углерода в положении 3 (обведен кружком), который будет связываться с различными нуклеофильными мишенями, включая гистидиновые, лизиновые и цистеиновые остатки белков. (B) Мишени для электрофильной аддукции широко распространены по клетке, но особенно распространены в акросоме и средней части. (C) Вестерн-блот-анализ выявляет несколько основных мишеней, одной из которых является дегидрогеназа янтарной кислоты (SDHA). (D) биохимическим последствием такой аддукции является выброс электронов из митохондриальной цепи переноса электронов, что приводит к дозозависимому увеличению образования АФК.(E) Возникающий таким образом окислительный стресс, наряду с прямым воздействием белковой аддукции на функциональность ключевых аксонемных белков, таких как тяжелая цепь динеина (Baker et al. 2015), приводит к значительной потере подвижности сперматозоидов. (F) Генерация митохондриальных АФК в результате аддукции митохондриальных белков гарантирует, что окислительный стресс является самоподдерживающимся состоянием в этих клетках.

Рисунок 2

Окислительный стресс в сперматозоидах человека представляет собой самоподдерживающийся процесс, опосредованный альдегидными продуктами перекисного окисления липидов, такими как 4HNE.(A) 4HNE обладает электрофильным атомом углерода в положении 3 (обведен кружком), который будет связываться с различными нуклеофильными мишенями, включая гистидиновые, лизиновые и цистеиновые остатки белков. (B) Мишени для электрофильной аддукции широко распространены по клетке, но особенно распространены в акросоме и средней части. (C) Вестерн-блот-анализ выявляет несколько основных мишеней, одной из которых является дегидрогеназа янтарной кислоты (SDHA). (D) биохимическим последствием такой аддукции является выброс электронов из митохондриальной цепи переноса электронов, что приводит к дозозависимому увеличению образования АФК.(E) Возникающий таким образом окислительный стресс, наряду с прямым воздействием белковой аддукции на функциональность ключевых аксонемных белков, таких как тяжелая цепь динеина (Baker et al. 2015), приводит к значительной потере подвижности сперматозоидов. (F) Генерация митохондриальных АФК в результате аддукции митохондриальных белков гарантирует, что окислительный стресс является самоподдерживающимся состоянием в этих клетках.

Рисунок 3

Выживаемость сперматозоидов человека зависит от статуса фосфорилирования AKT1.Пока этот фермент фосфорилирован и активен, нижестоящие мишени этой киназы также фосфорилируются, обеспечивая, среди прочего, удержание проапоптотических факторов, таких как BAD, в неактивном состоянии и предотвращение апоптоза. Как только AKT1 дефосфорилируется, BAD диссоциирует от своего белка-хранителя 14-3-3, взаимодействует с митохондриями сперматозоидов и инициирует внутренний апоптотический каскад. Фосфорилирование AKT1, в свою очередь, поддерживается за счет действия киназы PI3 в ответ на стимуляцию факторами выживания, такими как пролактин и инсулин.На основании Koppers et al. (2011).

Рисунок 3

Выживаемость сперматозоидов человека зависит от статуса фосфорилирования AKT1. Пока этот фермент фосфорилирован и активен, нижестоящие мишени этой киназы также фосфорилируются, обеспечивая, среди прочего, удержание проапоптотических факторов, таких как BAD, в неактивном состоянии и предотвращение апоптоза. Как только AKT1 дефосфорилируется, BAD диссоциирует от своего белка-хранителя 14-3-3, взаимодействует с митохондриями сперматозоидов и инициирует внутренний апоптотический каскад.Фосфорилирование AKT1, в свою очередь, поддерживается за счет действия киназы PI3 в ответ на стимуляцию факторами выживания, такими как пролактин и инсулин. На основании Koppers et al. (2011).

НАДФН-оксидаза

Помимо митохондрий сперматозоидов существует множество других потенциальных источников АФК в сперматозоидах, которые представляют значительный интерес, но их значение неизвестно. В течение многих лет понятие НАДФН-оксидазы в сперматозоидах пропагандировалось как возможный источник АФК.Нет сомнений в том, что сперматозоиды действительно содержат NADPH-оксидазы, включая NOX5, NADPH-оксидазу, регулируемую кальцием, которая экспрессируется на высоких уровнях как в семенниках, так и в селезенке (Bánfi et al. , 2001). В соответствии с наличием такой кальций-зависимой оксидазы воздействие на суспензии сперматозоидов человека ионофоров кальция, таких как A23187 или иономицин, как сообщается, вызывает выработку АФК (Aitken and Clarkson, 1987; Musset et al. , 2012). Однако следует признать, что в этих исследованиях не использовались препараты очищенной спермы, из которых были удалены все следы загрязнения лейкоцитами.Поэтому возможно, что предполагаемая НАДФН-оксидаза, обнаруженная в этих суспензиях сперматозоидов, на самом деле была вызвана контаминацией лейкоцитами. Ингибирующее действие апоцинина (ингибитора NOX) на образование АФК человеческими сперматозоидами страдает от той же проблемы, поскольку хемилюминесцентный сигнал, зарегистрированный в этих экспериментах, мог быть вызван загрязнением лейкоцитов (Donà et al. , 2011). Тот факт, что дифениленйодоний подавляет образование АФК сперматозоидами человека, также не является окончательным доказательством существования НАДФН-оксидазы, поскольку этот ингибитор флавопротеина также может подавлять образование АФК митохондриями (Li and Trush, 1998).Кроме того, использование экзогенного NADPH для стимуляции хемилюминесценции люцигенина сперматозоидами человека (Aitken et al. , 1997) не свидетельствует об оксидазе, поскольку сигналы, генерируемые в этих условиях, отражают прямое восстановление зонда оксидоредуктазами; редуктазы цитохрома b5 в случае NADH и редуктазы цитохрома p450 в случае NADPH (Baker et al. , 2004, 2005). и др., 1998).

Оксидаза аминокислот и липоксигеназа

Дополнительные потенциальные источники АФК в сперматозоидах включают оксидазы аминокислот и липоксигеназы. Оксидазы l-аминокислот фактически были первыми ферментами, связанными с образованием АФК в сперматозоидах в результате новаторской работы Тосика и Уолтона в 1940-х и 50-х годах (Tosic and Walton, 1950). Эти авторы продемонстрировали, что потеря подвижности, наблюдаемая у бычьих сперматозоидов в присутствии разбавителей яичного желтка, может быть связана с образованием перекиси водорода оксидазой аминокислот, проявляющей особое сродство к ароматическим аминокислотам, таким как фенилаланин.Тосик и Уолтон также обнаружили, что реактивность этой ферментной системы усиливалась гибелью клеток, что, по-видимому, обеспечивало оксидазе беспрепятственный доступ к ее субстрату. Мы обнаружили точно такую ​​же ферментативную активность в сперматозоидах лошадей (Aitken et al. , 2015) и снова продемонстрировали, что мертвые сперматозоиды особенно чувствительны к присутствию субстратов, таких как фенилаланин, и что АФК, образующиеся в таких условиях, могут нарушить функциональность живых клеток в той же суспензии — но как насчет сперматозоидов человека? Мы обнаружили активность этого фермента в сперматозоидах человека (Houston et al., 2015) и обнаружили, что, в отличие от сперматозоидов лошадей и быков, этот фермент быстро теряется из нежизнеспособных клеток. Однако было обнаружено, что стимуляция образования внутриклеточной перекиси водорода внеклеточным фенилаланином усиливает капацитацию и способность сперматозоидов к акросомным реакциям, что указывает на физиологическую роль оксидазы 1-аминокислот IL4I1 в сперматозоидах человека, потенциально управляемую свободными аминокислотами, присутствующими в выделения женских половых путей (Houston et al., 2015). Нет никаких доказательств того, что IL4I1 каким-либо образом участвует в генерации АФК, наблюдаемой в сперматозоидах субфертильных мужчин.

Другим возможным триггером образования АФК в сперматозоидах человека является липоксигеназа. Известно, что этот фермент (ALOX15) генерирует АФК в нескольких клеточных системах, и его ингибирование в мужских половых клетках приводит к значительному снижению как митохондриальной, так и цитоплазматической генерации АФК, а также резкому снижению 4HNE (Bromfield et al., 2017). Это наблюдение согласуется с повышенной доступностью свободных жирных кислот в сперматозоидах субфертильных мужчин и тем фактом, что воздействие на сперматозоиды свободных неэтерифицированных ПНЖК, таких как арахидоновая кислота, вызывает быстрое образование АФК человеческими сперматозоидами (Koppers et al. , 2010). Это важная область для дальнейшего изучения, поскольку ALOX15 может быть потенциальной мишенью для улучшения окислительного стресса в дефектных сперматозоидах человека. Четкая связь между сохранением избыточной остаточной цитоплазмы сперматозоидами человека и последующим образованием АФК (Gomez et al., 1996) обеспечивает потенциальный механизм, с помощью которого дефектный сперматогенез может генерировать клетки, которые перенасыщены ферментами, такими как ALOX15, которые затем могут запускать повышенную выработку АФК и окислительный стресс.

Значение пероксинитрита

Очевидно, что нет простого ответа, когда речь идет об источнике АФК в сперматозоидах человека, и мы должны непредвзято относиться к тому, какие источники преобладают на разных стадиях развития половых клеток.Более того, хотя этот обзор был посвящен АФК, следует признать, что in vivo реактивные формы азота (RNS) также важны (Uribe et al. , 2015). Действительно, пероксинитрит является очень мощным окислителем, образующимся в результате реакции аниона супероксида с оксидом азота, который, как постулируется, опосредует непрерывный путь капацитации-апоптоза (рис. 3). Согласно этой модели, пероксинитрит, образующийся в сперматозоидах после эякуляции, индуцирует несколько ранних признаков капацитации, включая отток холестерина из плазматической мембраны, экспозицию ФС, презентацию комплексов зона-рецептор на поверхности сперматозоидов, инактивацию тирозинфосфатаз и стимуляцию цАМФ. производство (Айткен, 2011).Однако, если сперматозоиды, капацитированные с помощью этого механизма, не могут встретиться с яйцеклеткой, то продолжающееся образование пероксинитрита перенесет сперматозоиды через вершину холма функциональной компетентности в тупик апоптоза. Это старческая участь, которая ожидает подавляющее большинство сперматозоидов в эякуляте.

Потеря оплодотворяющего потенциала, конечно, не единственное препятствие, создаваемое окислительным стрессом в мужской зародышевой линии. В некотором смысле даже большее значение имеет индукция генетических и эпигенетических мутаций, влияющих на нормальность развития потомства.

Повреждение ДНК сперматозоидов человека

Важность окислительного стресса

Физическая архитектура сперматозоидов предотвращает высвобождение эндонуклеаз из митохондрий (например, эндонуклеаза G [Endo G] или фактор, индуцирующий апоптоз [AIF]) или активацию в цитозоле (например, каспазно-активируемая ДНКаза [CAD]) во время внутреннего апоптотического каскада от проникновения ядро спермия (рис. 4). Это связано с тем, что сперматозоиды структурно уникальны тем, что митохондрии и ядро ​​​​находятся в разных компартментах клетки.В результате этой уникальной структурной особенности ядро ​​спермия в значительной степени защищено от мощных нуклеаз, образующихся в митохондриях и цитоплазме во время апоптоза. Заряженные АФК, такие как анион супероксида, также не могут проникнуть в ядро ​​спермы; однако это ограничение не распространяется на незаряженные АФК, такие как перекись водорода (рис. 4).

Рисунок 4

Необычная архитектура сперматозоидов влияет на индукцию повреждения ДНК в этих клетках.(A) В соматических клетках эндонуклеазы, высвобождаемые из митохондрий или активируемые в цитозоле во время апоптоза, перемещаются в ядерный компартмент и разрезают ДНК, создавая характерную лестничную структуру после электрофореза. (B) В сперматозоидах митохондрии (обозначены черным цветом) и большая часть цитоплазмы расположены в средней части клетки, вдали от ядерного компартмента. (C) В результате этого уникального расположения нуклеазы, связанные с апоптозом, такие как фактор, индуцирующий апоптоз (AIF) и эндонуклеаза G (EndoG), остаются решительно запертыми в средней части клетки, когда апоптоз индуцируется вортманнином.Только проникающая через мембрану молекула, такая как перекись водорода (В), способна перемещаться из средней части спермия в ядро ​​во время апоптоза. Именно по этой причине повреждение ДНК сперматозоидов обычно носит окислительный характер.

Рисунок 4

Необычная архитектура сперматозоидов влияет на индукцию повреждения ДНК в этих клетках. (A) В соматических клетках эндонуклеазы, высвобождаемые из митохондрий или активируемые в цитозоле во время апоптоза, перемещаются в ядерный компартмент и разрезают ДНК, создавая характерную лестничную структуру после электрофореза.(B) В сперматозоидах митохондрии (обозначены черным цветом) и большая часть цитоплазмы расположены в средней части клетки, вдали от ядерного компартмента. (C) В результате этого уникального расположения нуклеазы, связанные с апоптозом, такие как фактор, индуцирующий апоптоз (AIF) и эндонуклеаза G (EndoG), остаются решительно запертыми в средней части клетки, когда апоптоз индуцируется вортманнином. Только проникающая через мембрану молекула, такая как перекись водорода (В), способна перемещаться из средней части спермия в ядро ​​во время апоптоза.Именно по этой причине повреждение ДНК сперматозоидов обычно носит окислительный характер.

Эти соображения имеют большое значение для этиологии повреждения ДНК сперматозоидов, поскольку ДНК может быть фрагментирована только двумя механизмами: (i) воздействием АФК или (ii) действием нуклеаз. Если нуклеазы физически захвачены средней частью клетки, то единственным механизмом, с помощью которого можно вызвать повреждение ДНК, является окислительная атака. Именно по этой причине мы утверждали, что большинство, если не все, повреждения ДНК в сперматозоидах вызываются АФК и отражаются в образовании окислительных аддуктов ДНК, особенно 8-гидрокси,2’дезоксигуанозина (8OHdG) (Kodama et al. ., 1997; Айткен и др. , 2010). Напротив, митохондриальная ДНК не защищена от нуклеаз, высвобождаемых во время апоптоза. Эта особенность, а также тот факт, что митохондриальная ДНК не защищена комплексообразованием с белками, делают эту конкретную форму ДНК превосходным маркером генетического повреждения сперматозоидов (Sawyer et al. , 2003), который в настоящее время используется недостаточно.

Когда происходит повреждение ДНК, это может иметь важные последствия для потомства, поскольку сперматозоиды с поврежденной ДНК все еще могут оплодотворяться (Aitken et al., 1998, 2013). В этом контексте стоит отметить, что хроматин сперматозоидов не всегда уязвим к окислительной атаке. Между хромосомами существуют явные различия в их восприимчивости к окислительному повреждению оснований (плотность 8OHdG), обусловленные высокоупорядоченной и специфической организацией хроматина сперматозоидов. Большинство доменов сперматозоидов, уязвимых для окисления, расположены на периферии ядра спермия, где теломеры сильно сконцентрированы, или близко к средней части спермия, вблизи митохондрий, генерирующих свободные радикалы.Кроме того, существуют особенно уязвимые области ядра спермия между сильно уплотненными тороидами, обогащенными протамином, где уплотнение снижено и ДНК восприимчива к окислительной атаке, потому что она либо обнажена, либо находится в слабо уплотненном нуклеосомном расположении. Эти межтороидальные области особенно богаты короткими вкрапленными повторяющимися элементами (SINE) и длинными вкрапленными повторяющимися элементами (LINE), а также центромерами и теломерами. В сперматозоидах как мыши, так и человека половые хромосомы, по-видимому, особенно хорошо защищены от окислительной атаки, в то время как некоторые аутосомы в силу своего состава и положения в ядре сперматозоида очень уязвимы.В мышиной хромосоме 19 оказывается особенно уязвимой, в то время как в сперматозоидах человека уязвимым хромосомным доменом является 15q13–15q14, потенциально охватывающий унаследованный от отца центр импринтинга, который находится на 5′ от этой области (Noblanc et al. , 2013; Kocer et al. al. , 2015; Xavier, M., неопубликованные наблюдения). Важно отметить, что локус 15q13–15q14 сопоставляется с хромосомной горячей точкой, связанной с вариабельным когнитивным и другим нейропсихиатрическим выражением, включая состояния, которые, как мы знаем, обусловлены отцом и, таким образом, связаны с дефектами сперматозоидов (например,г. эпилепсия, расстройство аутистического спектра и спонтанная шизофрения; Лоутер и др. , 2017).

Репарация ДНК в сперматозоидах

Поскольку ограниченное цитоплазматическое пространство, доступное в этих высокоспециализированных клетках, накладывает ограничения на доступность антиоксидантных ферментов, одной из основных защитных стратегий, используемых сперматозоидами, является создание плотных комплексов ДНК с протаминами. Последние служат жертвенными антиоксидантами, а также связывают переходные металлы, такие как медь, которые в противном случае катализировали бы образование гидроксильных радикалов и индукцию фрагментации ДНК (Kasprzak, 2002; Aitken et al., 2014). В соответствии с этой ролью протаминов мы обнаружили, что фрагментация ДНК в сперматозоидах человека обратно коррелирует с уровнем протаминирования ДНК, определяемым интеркалирующим красителем ДНК, хромомицином А3 (De Iuliis et al. , 2009). Защитная роль протаминирования хроматина неоднократно наблюдалась другими исследователями (Manochantr et al. , 2012; Fortes et al. , 2014; Ghasemzadeh et al. , 2015), что привело к формулировке двухэтапной гипотезы. фрагментации ДНК в сперматозоидах, включая: Шаг 1, где дефект спермиогенеза приводит к плохо протаминированному хроматину, создавая состояние уязвимости в клетке, и затем Шаг 2, во время которого этот уязвимый хроматин подвергается атаке АФК, вызывая высокие уровни образования 8OHdG (Де Юлиис и др., 2009 г.).

8OHdG, образованный в ходе этого процесса, направляется и удаляется первым ферментом пути эксцизии оснований (BER) 8-оксогуанин-ДНК-гликозилазой (OGG-1). Эта гликозилаза связана с ядром спермия и митохондриями и активно удаляет 8OHdG, высвобождая этот аддукт основания во внеклеточное пространство (Smith et al. , 2013a,b). Примечательно, что сперматозоиды не обладают нижестоящими компонентами основного пути эксцизионной репарации, апуриновой эндонуклеазой 1 (APE1) и клетками 1 китайского хомячка, дополняющими дефектную репарацию рентгеновских лучей (XRCC1).Следовательно, результатом этого усеченного BER является создание неразрешенного базового сайта в дуплексе ДНК, который не может быть подготовлен для введения нового основания сперматозоидом; эта задача ложится на ооцит, который богато наделен как APE1, так и XRCC1 (Smith et al. , 2013b). Присутствие таких неразрешенных абазических сайтов в конечном итоге дестабилизирует ДНК и делает ее уязвимой для разрыва цепи ДНК.

Одним из интересных практических следствий этого усеченного пути BER является то, что анализ мечения концов терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой dUTP (TUNEL) теоретически не может быть применен к сперматозоидам, поскольку этот анализ зависит от терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TdT), последовательно добавляющей меченые нуклеотиды к 3 ‘-гидроксильные концы двухцепочечных разрывов ДНК.В отсутствие APE1 никакие 3’-гидроксильные группы не будут доступны терминальной трансферазе для нацеливания. В соответствии с этим утверждением, когда повреждение ДНК сперматозоидов человека индуцируется перекисью водорода, клетки быстро становятся 8OHdG-положительными и демонстрируют признаки повреждения ДНК с помощью анализа структуры хроматина спермы (SCSA), но являются отрицательными в отношении анализа TUNEL. Несмотря на это, имеется множество доказательств того, что человеческие сперматозоиды — становятся TUNEL-положительными, если они дефектны (Mitchell et al., 2011). Эта загадка была решена, когда было обнаружено, что сперматозоиды, подвергшиеся окислительному стрессу, в конечном итоге становятся TUNEL-положительными, но для проявления этого изменения требуется около 48 часов (Smith et al. , 2013b). Такие наблюдения убедительно подтверждают перимортальную активацию нуклеазы в ядре сперматозоида, как предполагают другие (Boaz et al. , 2008). Однако личность этой предполагаемой внутриядерной нуклеазы еще предстоит определить.

Влияние повреждения ДНК сперматозоидов на следующее поколение

Одним из следствий усеченного пути BER в сперматозоидах млекопитающих является то, что сперматозоиды, вполне способные к оплодотворению, будут, тем не менее, нести в яйцеклетку как базисные сайты, так и неиссеченные аддукты 8OHdG в момент оплодотворения (Aitken et al., 1998). Присутствие таких окисленных оснований является источником беспокойства, поскольку они являются чрезвычайно мутагенными, вызывая мутации в потомстве, обычно включающие трансверсии G:C-A:T в результате спаривания оснований Хугстина. Например, рост числа случаев рака у детей, наблюдаемый у потомков курящих мужчин (Lee et al. , 2009), вполне может отражать повышенный уровень 8OHdG, наблюдаемый в сперматозоидах таких субъектов (Fraga et al. , 1996). . Точно так же увеличение частоты нарушений головного мозга, таких как аутизм, спонтанная шизофрения и биполярное расстройство, наблюдаемое с возрастом отца, также может быть связано с повышенным уровнем окислительного повреждения ДНК, наблюдаемым в сперматозоидах в результате процесса старения (Smith et al., 2013а). Такие отношения могут также лежать в основе повышенной заболеваемости аутизмом у детей, зачатых с помощью ИКСИ (Kissin et al. , 2015), что отражает высокий уровень экспрессии 8OHdG, наблюдаемый в сперматозоидах пациентов с мужским бесплодием (Meseguer et al. , 2008). ; Aitken и др. , 2010). Эти причинно-следственные связи между образованием 8OHdG в сперматозоидах, дефектным восстановлением этого повреждения в ооците и повышенной частотой мутаций у потомства являются критическим компонентом вклада отца в аномальное развитие (Aitken et al., 2004). Это лежит в основе влияния старения отца на здоровье и благополучие детей, а также может лежать в основе средств, с помощью которых сложный набор факторов окружающей среды, образа жизни и клинических факторов влияет на нормальное развитие детей. Примеры внешних факторов, которые потенциально могут влиять на здоровье потомства, вызывая окислительное повреждение ДНК в мужской зародышевой линии, включают электромагнитное излучение (Houston et al. , 2016), ожирение (Lane et al. , 2014), курение (Fraga ). и другие. , 1996) и широкий спектр загрязнителей окружающей среды, включая продукты химической промышленности (эфиры фталевой кислоты, бисфенол А), консерванты (парабены), инсектициды (фирпронил), гербициды (алахлор) и лечебные средства (парацетамол) (Гризард и др. ). , 2007; Khan и др. , 2015; Barbonetti и др. , 2016; Lu и др. , 2017).

Где окончательные испытания антиоксидантов?

Если окислительный стресс является такой важной причиной мужского бесплодия, то было бы разумно предложить, чтобы антиоксиданты были частью лечения.В моделях животных с бесплодием вследствие окислительного стресса (мыши с нокаутом GPx5 и модель нагревания яичек; Chabory et al. , 2009; Aitken, 2009; Pérez-Crespo et al. , 2008) неопровержимые доказательства того, что антиоксиданты могут эффективно устранять последствия окислительного стресса в мужской зародышевой линии in vivo (Gharagozloo and Aitken, 2011; Gharagozloo et al. , 2016). Точно так же in vitro имеется множество доказательств того, что антиоксиданты могут обратить вспять негативное воздействие окислительного стресса, возникающего при криогенном хранении сперматозоидов у большого количества разрозненных видов, включая жеребца (Ghallab et al., 2017), баран (Gastal et al. , 2017), бык (Eidan, 2016), коза (Seifi-Jamadi et al. , 2017), петух (Partyka et al. , 2017), кролик (Zhu et al. , 2017), человек (Thomson et al. , 2009; Parameswari et al. , 2017), кабан (Gadani et al. , 2017), 90 et al. , 2017), собака (Setyawan et al. , 2016) и мышь (Chen et al. , 2016). Тем не менее, данные, подтверждающие использование пероральной антиоксидантной терапии для лечения мужского бесплодия у человека, получить крайне сложно (Suleiman et al., 1996). Клинические испытания эффективности антиоксидантов, естественно, должны быть плацебо-контролируемыми и должны включать отбор пациентов на основе окислительного стресса в их сперматозоидах. Для отбора таких пациентов можно использовать различные биомаркеры, нацеленные на такие процессы, как перекисное окисление липидов (малоновый диальдегид, 4-гидроксиноненаль, 4-гидроксигексаналь, акролеин), окислительное повреждение ДНК (8OHdG), образование карбонилов белков и продукцию АФК. Кроме того, успех лечения следует оценивать с точки зрения улучшения выбранного маркера оксидативного стресса, а также аспектов функции сперматозоидов, которые, как известно, уязвимы для оксидативной атаки, включая подвижность (Jones et al., 1979; Айткен и др. , 1989a,b) и распознавание сперматозоидов и яйцеклеток (Bromfield et al. , 2015). Беременность, безусловно, является важным исходом (Showell et al. , 2014), однако существует множество факторов, способствующих успешному исходу в этом отношении, а не только качество сперматозоидов. В идеальном мире мы также смотрели бы не только на процент беременностей, но и на мутационную нагрузку, которую несет потомство.

Заключительные мысли

Мужское бесплодие — это аспект человеческой репродукции, остро нуждающийся во внимании.Согласно недавнему исследованию, это широко распространенное заболевание, которым страдает около 10% мужского населения (Datta et al. , 2016). Более того, это имеет отношение не только к рождаемости, но и к здоровью и благополучию будущих поколений. Тем не менее, после десятилетий исследований основная этиология этого состояния все еще остается неясной. Окислительный стресс, по-видимому, является основным компонентом ландшафта мужского бесплодия и, что важно, механизмом, с помощью которого внешние факторы окружающей среды и образа жизни могут влиять не только на фертильность людей, но и на здоровье их детей.Однако это не единственный фактор. Сперматогенез по своей природе является сложной, высокоинтегрированной системой, которая может быть нарушена по целому ряду генетических и эпигенетических причин, не имеющих ничего общего с окислительным стрессом (Jamsai and O’Bryan, 2011; Flannigan and Schlegel, 2017; Jenkins et al. ). , 2017). Некоторые из них нам известны (делеции Y-хромосомы, синдром Каллмана, первичные цилиарные дикинезии, глобозооспермия, дефицит протамина, мутации в CFTR и т. д.) и включают дефекты в известных генах.Однако вполне вероятно, что многие случаи бесплодия связаны не с мутациями в кодирующих областях генома, а с повреждениями в некодирующих областях, которые влияют на время и величину экспрессии генов, а не на функциональную целостность кодируемых ими белков. Какие бы регионы генома ни были вовлечены, последние данные ясно показывают, что мужское бесплодие имеет наследственный компонент, который вспомогательные репродуктивные технологии служат сохранению, гарантируя, что бесплодие, от которого страдают отцы детей ИКСИ, будет перенесено на их сыновей (Belva et al., 2016). Основная задача, которая теперь ожидает нашего внимания, состоит в том, чтобы определить относительный вклад таких генетических/эпигенетических факторов и окислительного стресса как в причинность мужского бесплодия, так и в долгосрочную траекторию здоровья потомства. Зеленые ростки открытий, безусловно, уже начинают появляться, но на данный момент стремление и достижения в этой области стоят на противоположных берегах реки, погруженной в непонимание и пренебрежение.

Авторские роли

р.Дж.А. задумал, написал и отредактировал этот обзор.

Конфликт интересов

Р.Дж.А. владеет акциями компании Memphasys, специализирующейся на разработке новых технологий выделения сперматозоидов с низким уровнем повреждения ДНК. Он также является почетным консультантом CellOxess, компании, занимающейся созданием антиоксидантной композиции (Fertilix®) для лечения мужского бесплодия. Р.Дж.А. также имеет патент, интеллектуальная собственность на который принадлежит Memphasys.

Финансирование

Для этой проверки не было обеспечено финансирование.

Каталожные номера

Айткен

РДЖ

.

Gpx5 защищает фамильные драгоценности

.

Дж Клин Инвест

2009

;

119

:

1849

–

1851

.

Айткен

РДЖ

.

Путь капацитации-апоптоза: оксистеролы и функция сперматозоидов млекопитающих

.

Биол Репрод

2011

;

85

:

9

–

12

.

Айткен

RJ

,

Бронсон

R

,

Смит

ТБ

,

Де Юлиис

GN

.

Источник и значение повреждения ДНК в сперматозоидах человека; комментарий к диагностическим стратегиям и заблуждениям соломенного человека

.

Моль Гум Репрод

2013

;

19

:

475

–

485

.

Эйткен

RJ

,

Букингем

DW

,

Фанг

HG

.

Анализ реакции сперматозоидов человека на A23187 с использованием нового метода оценки акросомной реакции

.

Дж Андрол

1993

а;

14

:

132

–

141

.

Эйткен

РДЖ

,

Букингем

Д

,

Харкисс

Д

.

Использование системы, генерирующей свободные радикалы ксантиноксидазы, для исследования цитотоксического действия активных форм кислорода на сперматозоиды человека

.

J Reprod Fertil

1993

b;

97

:

441

–

450

.

Aitken

RJ

,

Buckingham

,

D

,

D

,

,

K

,

WU

K

,

,

k

FC

,

Zikopoulos

K

,

Richardson

DW

.

Дифференциальный вклад лейкоцитов и сперматозоидов в образование активных форм кислорода в эякулятах пациентов с олигозооспермией и фертильных доноров

.

J Reprod Fertil

1992

;

94

:

451

–

462

.

Айткен

RJ

,

Кларксон

JS

.

Клеточная основа дефектной функции сперматозоидов и ее связь с образованием активных форм кислорода сперматозоидами человека

.

J Reprod Fertil

1987

;

81

:

459

–

469

.

Айткен

RJ

,

Кларксон

JS

,

Фишел

S

.

Генерация активных форм кислорода, перекисное окисление липидов и функция спермы человека

.

Биол Репрод

1989

b;

41

:

183

–

197

.

Aitken

RJ

,

CLARKSON

JS

,

JS

,

Hargreave

TB

,

Irvine

DS

,

WU

FC

.

Анализ взаимосвязи между дефектной функцией сперматозоидов и образованием активных форм кислорода при олигозооспермии

.

Дж Андрол

1989

а;

10

:

214

–

220

.

Aitken

RJ

,

de Iuliis

GN

,

GN

,

Finnie

JM

,

Hedges

A

,

MCACHLAN

RI

.

Анализ взаимосвязи между окислительным стрессом, повреждением ДНК и жизнеспособностью сперматозоидов у пациентов: разработка диагностических критериев

.

Hum Reprod

2010

;

25

:

2415

–

2426

.

Айткен

RJ

,

Элтон

РА

.

Значение теории распределения Пуассона при анализе взаимодействия между сперматозоидами человека и ооцитами хомячка без зон

.

J Reprod Fertil

1984

;

72

:

311

–

321

.

Айткен

RJ

,

Элтон

РА

.

Применение теории распределения Пуассона к тесту на проникновение ооцитов хомячка без зон для оценки функции сперматозоидов у мужчин с астенозооспермией

.

J Reprod Fertil

1986

;

77

:

67

–

74

.

Aitken

RJ

,

rj

JM

,

Muscio

L

,

L

,

,

S

,

Contaughaughton

HS

,

Kuczera

L

,

Rothkirch

TB

,

Де Юлиис

GN

.

Потенциальное значение переходных металлов в индукции повреждения ДНК средами для приготовления спермы

.

Hum Reprod

2014

;

29

:

2136

–

2147

.

aitken

RJ

,

Fisher

HM

,

HM

,

,

,

N

,

Gomez

E

,

Knox

E

W

,

Lewis

B

,

Irvine

S

.

Генерация активных форм кислорода сперматозоидами человека индуцируется экзогенным НАДФН и ингибируется ингибиторами флавопротеинов дифенилен йодонием и хинакрином

.

Мол Репрод Дев

1997

;

47

:

468

–

482

.

aitken

RJ

,

Flanagan

HM

,

HM

,

Connaughton

H

,

,

H

,

,

S

,

Hedges

A

,

Baker

MA

.

Участие гомоцистеина, гомоцистеинтиолактона и параоксоназы типа 1 (PON-1) в этиологии нарушения функции сперматозоидов человека

.

Андрология

2016

а;

4

:

345

–

360

.

aitken

RJ

,

Gordon

E

,

HARKISS

D

,

D

,

Twigg

JP

,

Milne

P

,

Jennings

Z

,

Irvine

DS

.

Относительное влияние окислительного стресса на функциональную компетентность и целостность генома сперматозоидов человека

.

Биол Репрод

1998

;

59

:

1037

–

1046

.

Айткен

РДЖ

,

Харкисс

Д

,

Букингем

Д

.

Взаимосвязь между катализируемым железом потенциалом перекисного окисления липидов и функцией сперматозоидов человека

.

J Reprod Fertil

1993

c;

98

:

257

–

265

.

Айткен

РДЖ

,

Ирвин

ДС

,

Ву

ФК

.

Проспективный анализ слияния сперматозоидов и образования активных форм кислорода как критерии диагностики бесплодия

.

Am J Obstet Gynecol

1991

;

164

:

542

–

551

.

Айткен

RJ

,

Купман

P

,

Льюис

SE

.

Семена, вызывающие обеспокоенность

.

Природа

2004

;

432

:

48

–

52

.

aitken

RJ

,

Muscio

L

,

L

,

S

,

Connaughton

HS

,

Fraser

BA

,

Nixon

B

,

SMITH

ND

,

Де Юлиис

GN

.

Анализ воздействия полифенолов на сперматозоиды человека обнаруживает неожиданное влияние на потенциал митохондриальной мембраны, окислительный стресс и целостность ДНК; последствия вспомогательных репродуктивных технологий

.

Biochem Pharmacol

2016

b;

121

:

78

–

96

.

Aitken

JB

,

Naumovski

,

N

,

N

,

Curry

B

,

B

,

Grupen

CG

,

GIBB

Z

,

aitken

RJ

.

Характеристика оксидазы L-аминокислот в сперматозоидах лошадей

.

Биол Репрод

2015

;

92

:

125

–

138

.

aitken

RJ

,

ross

A

,

A

,

Hargreave

T

,

Richardson

D

,

Лучшие

F

.

Анализ функции сперматозоидов человека после воздействия ионофора A23187. Сравнение мужчин с нормоспермией и олигозооспермией

.

Дж Андрол

1984

;

5

:

321

–

329

.

Айткен

RJ

,

Вест

КМ

.

Анализ взаимосвязи между продукцией активных форм кислорода и инфильтрацией лейкоцитов во фракциях спермы человека, разделенных на градиентах Перколла

.

Int J Андрол

1990

;

13

:

433

–

451

.

aitken

RJ

,

rj

,

,

S

,

de Iuliis

GN

,

GN

,

MCCLYMONT

S

,

Mitchell

La

,

Baker

MA

.

Электрофильные альдегиды, образующиеся в результате метаболизма сперматозоидов, активируют образование митохондриальных активных форм кислорода и апоптоз путем воздействия на сукцинатдегидрогеназу

.

J Biol Chem

2012

;

287

:

33048

–

33060

.

Aitken

RJ

,

WinGate

JK

,

DE IULIIS

GN

,

KOPPERS

AJ

,

MCLAAGHLIN

EA

.

Цис-ненасыщенные жирные кислоты стимулируют образование активных форм кислорода и перекисное окисление липидов в сперматозоидах человека

.

J Clin Endocrinol Metab

2006

;

91

:

4154

–

4163

.

Айткен

RJ

(ред.). Тест на проникновение ооцитов хомяка без зоны и диагностика мужской фертильности. Симпозиум Всемирной организации здравоохранения . Международный журнал андрологии

1986

; Дополнение 6.

Aquila

S

,

Gentile

M

,

MIDDEA

E

,

Catalano

S

,

And

S

.

Аутокринная регуляция секреции инсулина в эякулированных сперматозоидах человека

.

Эндокринология

2005

;

146

:

552

–

557

.

Оже

J

,

Жуанне

P

,

Юсташ

F

.

Еще один взгляд на морфологию спермы человека

.

Hum Reprod

2016

;

31

:

10

–

23

.

Baker

MA

,

Krutskikh

A

,

A

,

Curry

BJ

,

Heatherington

L

,

aitken

RJ

.

Идентификация цитохром-b5 редуктазы как фермента, ответственного за НАДН-зависимую люцигениновую хемилюминесценцию в сперматозоидах человека

.

Биол Репрод

2005

;

73

:

334

–

342

.

Baker

MA

,

KRUTSKHH

A

,

A

,

Curry

BJ

,

McLaughlin

EA

,

aitken

RJ

.

Идентификация цитохром Р450-редуктазы как фермента, ответственного за НАДФН-зависимое восстановление соли люцигенина и тетразолия в препаратах эпидидимальной спермы крыс

.

Биол Репрод

2004

;

71

:

307

–

318

.

Baker

MA

,

Weinberg

A

,

Heatherington

L

,

Villaverde

AI

,

Velkov

T

,

Baell

J

,

Gordon

CP

.

Определение механизмов, с помощью которых побочный продукт активных форм кислорода, 4-гидроксиноненаль, влияет на функцию сперматозоидов человека

.

Биол Репрод

2015

;

92

:

108

.

Barbonetti

A

,

A

,

Castellini

C

,

DI Giammarco

N

,

Santilli

N

G

,

Francavilla

S

,

Francavilla

F

.

Воздействие бисфенола А на сперматозоиды человека in vitro вызывает прооксидантную/апоптотическую митохондриальную дисфункцию

.

Reprod Toxicol

2016

;

66

:

61

–

67

.

Belva

F

,

F

,

Bonduelle

M

,

Roellans

M

,

Michielsen

D

,

VAN STEIRTEGHEM

A

,

Verheyen

G

,

Tournaye

H

.

Качество спермы молодых взрослых потомков ИКСИ: первые результаты

.

Hum Reprod

2016

;

31

:

2811

–

2820

.

Боаз

СМ

,

Домингес

К

,

Шаман

JA

,

Уорд

WS

.

Сперматозоиды мышей содержат нуклеазу, которая активируется предварительной обработкой ЭГТА и последующей инкубацией с кальцием

.

J Cell Biochem

2008

;

103

:

1636

–

1645

.

bromfield

, например,

,

aitken

RJ

,

anderson

al

,

mclaughlin

EA

,

Nixon

B

.

Влияние окислительного стресса на взаимодействие сперматозоидов и яйцеклеток человека, опосредованное шаперонами

.

Hum Reprod

2015

;

30

:

2597

–

2613

.

BROMField

EG

,

MIHALAS

BP

,

Dun

MD

,

aitken

RJ

,

mclaughlinlin

EA

,

Walters

JL

,

Nixon

B

.

Ингибирование арахидонат-15-липоксигеназы предотвращает вызванное 4-гидроксиноненалем повреждение белка в мужских половых клетках

.

Биол Репрод

2017

;

96

:

598

–

609

.

Bánfi

B

,

MOLNáAR

G

,

G

,

г

A

,

stegrger

K

,

The 50002 K

,

,

K

B

,

Demaurex

N

,

KRAUSE

KH

.

Са(2+)-активированная НАДФН-оксидаза в яичках, селезенке и лимфатических узлах

.

J Biol Chem

2001

;

276

:

37594

–

37601

.

CASSINA

A

,

Silveira

P

,

Cantu

L

,

L

,

MONTES

JM

,

RADE

R

,

SAPIRO

R

.

Дефектные сперматозоиды человека связаны с митохондриальной дисфункцией и выработкой оксидантов

.

Биол Репрод

2015

;

93

:

119

–

129

.

Chabory

E

,

Damon

C

,

Lenoir

A

,

Kauselmann

G

,

Kern

H

,

Zevnik

B

,

Garrel

C

,

Saez

F

,

Cadet

R

,

Henry-Berger

J

и др..

Селено-независимая глутатионпероксидаза 5 эпидидимиса поддерживает целостность ДНК сперматозоидов у мышей

.

Дж Клин Инвест

2009

;

119

:

2074

–

2085

.

CHAI

RR

,

CHEN

GW

,

SHI

HJ

,

O

WS

,

Martin-Deleon

,

CHEN

PA

,

ч

.

Участие прогибитина в образовании митохондриального супероксида в комплексе I в сперме человека

.

J Cell Mol Med

2017

;

21

:

121

–

129

.

CHEN

XJ

,

Чжан

Y

,

JIA

GX

,

MENG

QG

,

BUCH

TD

,

LIU

GS

,

ZHU

SE

,

Xhou

ГБ

.

Влияние добавок мелатонина на качество криоконсервированной спермы у мышей

.

Cryo Letters

2016

;

37

:

115

–

122

.

Cooper

TG

,

NOONAN

E

,

E

,

VON ECKARDSTEIN

S

J

,

J

,

Baker

HW

,

¥

HM

,

HAUGEN

TB

,

Kruger

T

,

Wang

C

,

Mbizvo

MT

и др..

Референтные значения Всемирной организации здравоохранения для характеристик человеческой спермы

.

Обновление воспроизведения шума

2010

;

16

:

231

–

245

.

Datta

J

,

Palmer

MJ

,

Tanton

C

,

Gibson

LJ

,

Jones

кг

,

Macdowall

W

,

Glasier

A

,

Sonnenberg

P

,

Field

N

,

Mercer

CH

и др..

Распространенность бесплодия и обращения за помощью среди 15000 женщин и мужчин

.

Hum Reprod

2016

;

31

:

2108

–

2118

.

de iuliis

de iuliis

GN

,

thomsson

lk

,

mitchell

la

,

aj

jm

,

koppers

AJ

,

Hedges

A

,

Nixon

B

,

Айткен

РДЖ

.

Повреждение ДНК в сперматозоидах человека сильно коррелирует с эффективностью ремоделирования хроматина и образованием 8-гидрокси-2′-дезоксигуанозина, маркера окислительного стресса

.

Биол Репрод

2009

;

81

:

517

–

524

.

de Iuliis

de Iuliis

GN

,

WinGate

JK

,

KOPPERS

AJ

,

McLaughlin

EA

,

aitken

RJ

.

Окончательное доказательство немитохондриального производства супероксид-аниона сперматозоидами человека

.

J Clin Endocrinol Metab

2006

;

91

:

1968

–

1975

.

де Ламиранд

E

,

Харакат

A

,

Ганьон

C

.

Капацитация сперматозоидов человека, вызванная биологическими жидкостями и прогестероном, но не НАДН или НАДФН, связана с продукцией супероксидного аниона

.

Дж Андрол

1998

;

19

:

215

–

225

.

Donà

G

,

Fiore

C

,

C

,

Andrisani

A

,

Ambrosini

G

,

Brunati

A

,

Ragazzi

E

,

Armanini

D

,

Бордин

Л

,

Клари

Г

.

Оценка правильного содержания эндогенных активных форм кислорода для капацитации сперматозоидов человека и участия НАДФН-оксидазной системы

.

Hum Reprod

2011

;

26

:

3264

–

3273

.

du plessiss

du plessiss

SS

,

Mcallister

DA

,

LUU

A

,

SAVIA

J

,

Agarwal

A Agarwal

A

,

FAMPIAO

F

.

Воздействие H ₂ O ₂ на параметры подвижности сперматозоидов человека, уровни активных форм кислорода и уровни оксида азота

.

Андрология

2010

;

42

:

206

–

210

.

Двайер

АА

,

Райвио

Т

,

Питтелоуд

N

.

Замена гонадотропина для индукции фертильности у мужчин с гипогонадизмом

.

Best Pract Res, Clin Endocrinol Metab

2015

;

29

:

91

–

103

.

Ebisch

IM

,

Peters

WH

,

THOMAS

см

,

WiTzels

AM

,

Peer

PG

,

STEEGERS-TUUNISSEN

RP

.

Гомоцистеин, глутатион и родственные тиолы влияют на параметры фертильности у (суб)фертильной пары

.

Hum Reprod

2006

;

21

:

1725

–

1733

.

Эйдан

СМ

.

Влияние на характеристики спермы быков голштинской породы после криоконсервации при добавлении комбинации витамина С и либо каталазы, либо восстановленного глутатиона к трис-разбавителю

.

Anim Reprod Sci

2016

;

167

:

1

–

7

.

Фланниган

R

,

Шлегель

PN

.

Генетическая диагностика мужского бесплодия в клинической практике

.

Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol

2017

;

44

:

26

–

37

.

Fortes

MR

,

SATAKE

N

,

N

,

Corbet

DH

,

Corbet

NJ

,

Burns

BM

,

Moore

SS

,

Boe-Hansen

GB

.

Дефицит протамина в сперме коррелирует с повреждением ДНК сперматозоидов у быков Bos indicus

.

Андрология

2014

;

2

:

370

–

378

.

Fraga

CG

,

Motchnik

PA

,

PA

,

Wyrobek

AJ

,

REMPEL

DM

,

AMES

BN

.

Курение и низкий уровень антиоксидантов увеличивают окислительное повреждение ДНК сперматозоидов

.

Мутация Res

1996

;

351

:

199

–

203

.

GADANI

B

,

B

,

BUCCI

D

,

Spinaci

M

,

Tamanini

C

,

Galeti

G

.

Добавление ресвератрола и эпигаллокатехин-3-галлата к размороженной сперме хряка улучшает оплодотворение in vitro

.

Териогенология

2017

;

90

:

88

–

93

.

Gastal

GD

,

Silva

EF

,

MION

B

,

Varela Munior

AS

,

ROSA

CE

,

CORCINI

CD

,

Mondadori

RG

,

Vieira

AD

,

Bianchi

I

,

Lucia

T

Jr.

Антиоксидантное действие ксантановой камеди на сперму барана после замораживания и оттаивания 9.

Cryo Letters

2017

;

38

:

187

–

193

.

GE

YF

,

Wang

CH

,

OUYANG

LX

,

SHAO

Y

,

YAO

B

,

XIA

XY

,

Shang

XJ

,

Хуанг

YF

.

Определение уровня гомоцистеина в плазме у пациентов с олигоспермией и/или астеноспермией

.

Чжунхуа Нан ​​Кэ Сюэ

2008

;

14

:

1112

–

1114

.

Ghallab

AM

,

Shahat

AL

,

FADL

,

FADL

AYOUB

,

AYOUB

мм

,

Moawad

Ar

.

Влияние добавления антиоксидантов в разбавитель спермы на качество охлажденных или криоконсервированных сперматозоидов арабского жеребца

.

Криобиология

2017

;

79

:

14

–

20

.. номер: S0011-2240(17)30213-4.

Гарагозлоо

P

,

Айткен

RJ

.

Роль окислительного стресса сперматозоидов в мужском бесплодии и значение пероральной антиоксидантной терапии

.

Hum Reprod

2011

;

26

:

1628

–

1640

.

Gharagozloo

P

,

P

,

Gutiérrez-Adán

A

,

Champroux

A

,

Noblance

A

,

Kocer

A

,

Calle

A

A

,

Pérez-Cerezales

S

,

Перикуэста

E

,

Полхемус

A

,

Моазамский

A

и др..

Новый антиоксидантный состав, предназначенный для лечения мужского бесплодия, связанного с окислительным стрессом: многообещающие доклинические данные на животных моделях

.

Hum Reprod

2016

;

31

:

252

–

262

.

Ghasemzadeh

J

,

Talebi

AR

,

AR

,

Khalili

MA

,

MA

,

FESAHAT

F

,

Halvaei

I

,

Nabi

A

,

Ashourzadeh

S

.

Параметры спермы, дефицит протамина и апоптоз при тотальной глобозооспермии

.

Иран J Reprod Med

2015

;

13

:

495

–

502

.

Gomez

E

,

E

,

DW

,

DW

,

Brindle

J

,

Lanzafame

F

,

Irvine

DS

,

Aitken

RJ

.

Разработка системы анализа изображений для мониторинга сохранения остаточной цитоплазмы сперматозоидами человека: корреляция с биохимическими маркерами цитоплазматического пространства, окислительного стресса и функции сперматозоидов

.

Дж Андрол

1996

;

17

:

276

–

287

.

GRIZARD

G

,

ECHCHANE

,

L

,

L

,

RODDIER

H

,

,

Sion

C

,

Sion

C

,

,

Vasson

MP

,

Janny

L

.

Влияние алахлора in vitro на образование активных форм кислорода, модели подвижности и маркеры апоптоза в сперматозоидах человека

.

Reprod Toxicol

2007

;

23

:

55

–

62

.

Хьюстон

Б

,

Карри

Б

,

Эйткен

РДЖ

.

Сперматозоиды человека содержат оксидазу l-аминокислот IL4I1, потенциально играющую роль в функционировании сперматозоидов

.

Репродукция

2015

;

149

:

587

–

596

.

Houston

BJ

,

Nixon

B

,

B

,

King

BV

,

de Iuliis

GN

,

aitken

RJ

.

Влияние радиочастотного электромагнитного излучения на функцию сперматозоидов

.

Репродукция

2016

;

152

:

R263

–

R276

.

Ирвин

ДС

,

Эйткен

РДЖ

.

Прогностическая ценность функциональных тестов сперматозоидов in vitro в контексте службы AID

.

Hum Reprod

1986

;

1

:

539

–

545

.

Джамсай

Д

,

О’Брайан

МК

.

Мышиные модели в исследованиях мужской фертильности

.

Азиатский J Андрол

2011

;

13

:

139

–

151

.

Дженкинс

ТГ

,

Астон

КИ

,

Джеймс

ER

,

Каррелл

DT

.

Эпигенетика сперматозоидов в изучении мужской фертильности, здоровья потомства и потенциального клинического применения

.

Сист Биол Репрод Мед

2017

;

63

:

69

–

76

.

Джонс

Р

,

Манн

Т

,

Шеринс

Р

.

Пероксидативное расщепление фосфолипидов в сперматозоидах человека, спермицидные свойства пероксидов жирных кислот и защитное действие семенной плазмы

.

Fertil Steril

1979

;

31

:

531

–

537

.

Каспшак

КС

.

Окислительное повреждение ДНК и белков при отравлении металлами и канцерогенезе

.

Free Radic Bio Med

2002

;

32

:

958

–

967

.

KESSOPOULOU

E

,

E

,

Tomlinson

MJ

,

BARRATT

CL

,

BOLTON

AE

,

COOKE

ID

.

Происхождение активных форм кислорода в сперме человека: сперматозоиды или лейкоциты ?

.

J Reprod Fertil

1992

;

94

:

463

–

470

.

Хан

S

,

Январь

MH

,

Кумар

D

,

Теланг

AG

.

Спермотоксичность, вызванная фирпронилом, связана с окислительным стрессом, повреждением ДНК и апоптозом у самцов крыс

.

Пестик Биохим Физиол

2015

;

124

:

8

–

14

.

KISSIN

DM

,

ZHANG

Y

,

Y

,

Boulet

SL

,

Fountain

C

,

Bearman

C

P

,

Schieve

L

,

MAIN-ALLSOPP

M

,

Джеймисон

Диджей

.

Ассоциация лечения вспомогательными репродуктивными технологиями (ВРТ) и диагностики родительского бесплодия с аутизмом у детей, зачатых с помощью ВРТ

.

Hum Reprod

2015

;

30

:

454

–

465

.

Kocer

A

,

A

,

J

,

J

,

Noblance

A

,

Champroux

A

,

Pogorelcnik

R

,

Guiton

R

,

Janny

L

,

Pons-Rejraji

H

,

Saez

F

,

Johnson

GD

и др..

Окислительное повреждение ДНК в хромосомах спермы мыши: размер имеет значение

.

Free Radic Biol Med

2015

;

89

:

993

–

1002

.

Kodama

H

,

H

,

R

,

R

,

Fukuda

J

,

Kasai

H

,

Tanaka

T

.

Повышенное окислительное повреждение дезоксирибонуклеиновой кислоты в сперматозоидах бесплодных пациентов мужского пола

.

Fertil Steril

1997

;

68

:

519

–

524

.

Koppers

aj

,

de Iuliis

GN

,

GN

,

Finnie

JM

,

McLaughlinh

EA

,

aitken

RJ

.

Значение митохондриальных активных форм кислорода в возникновении окислительного стресса в сперматозоидах

.

J Clin Endocrinol Metab

2008

;

93

:

3199

–

3207

.

Копперс

AJ

,

Гарг

ML

,

Айткен

RJ

.

Стимуляция митохондриальной продукции активных форм кислорода неэтерифицированными ненасыщенными жирными кислотами в дефектных сперматозоидах человека

.

Free Radic Bio Med

2010

;

48

:

112

–

119

.

Koppers

aj

,

mitchell

la

,

Wang

p

,

lin

m

,

aitken

RJ

.

Участие сигнального пути фосфоинозитид-3-киназы в усеченном апоптотическом каскаде, связанном с потерей подвижности и окислительным повреждением ДНК в сперматозоидах человека

.

Biochem J

2011

;

436

:

687

–

698

.

Lane

M

,

McPherson

,

NO

,

FULLSTON

T

,

Spillane

T

M

,

M

,

Sandeman

L

,

Kang

WX

,

ZANDER-FOX

DL

.

Окислительный стресс в сперме мыши нарушает развитие эмбриона, рост плода и изменяет ожирение и регуляцию уровня глюкозы у потомства женского пола

.

PLoS One

2014

;

9

:

e100832

.

Lee

км

,

Уорд

мм

,

HAN

S

,

,

HS

,

Kang

HJ

,

CHOI

HS

,

Shin

HY

,

Koo

HH

,

Seo

JJ

,

Choi

JE

и др..

Курение отца, генетические полиморфизмы CYP1A1 и риск детской лейкемии

.

Лейк Рез

2009

;

33

:

250

–

258

.

Li

Y

,

Труш

MA

.

Дифениленйодоний, ингибитор НАД(Ф)Н-оксидазы, также сильно ингибирует выработку митохондриальными активными формами кислорода

.

Biochem Biophys Res Commun

1998

;

253

:

295

–

299

.

LI

y

,

Wang

,

,

LIU

J

,

LI

J

,

,

Wang

N

,

Wang

YW

,

Wang

WT

,

LI

JY

.

Характеристика запретинов в мужской репродуктивной системе и их экспрессия при окислительном стрессе

.

Ж Урол

2016

;

195

:

1160

–

1167

.

Longobardi

V

,

V

,

Zullo

G

,

Salzano

A

,

de Canditiis

C

,

Cammarano

A

,

De Luise

L

,

Puzio

MV

,

Неглия

Г

,

Гаспаррини

Б

.

Ресвератрол предотвращает изменения, подобные капацитации, и улучшает оплодотворяющую способность замороженной-размороженной спермы буйвола in vitro

.

Териогенология

2017

;

88

:

1

–

8

. .

Геномные расстройства в психиатрии. Что должен знать клиницист?

Curr Psychiatry Rep

2017

;

19

:

82

.

Lu

Y

,

Lin

M

,

Айткен

RJ

.

Воздействие дибутилфталата на сперматозоиды вызывает аномальное эмбриональное развитие у морских беспозвоночных Galeolaria caespitosa (Polychaeta: Serpulidae)

.

Aquat Toxicol

2017

;

191

:

189

–

200

.

majzoub

A

,

TADROS

NN

,

NN

,

Polackwich

AS

,

Sharma

R

,

Agarwal

A

,

Sabanegh

E

JR.

Анализ спермы с обратной вазэктомией: новые референсные диапазоны предсказывают беременность

.

Fertil Steril

2017

;

107

:

911

–

915

.

Маночантр

С

,

Чиамчанья

С

,

Собхон

Р

.

Взаимосвязь между конденсацией хроматина, целостностью ДНК и качеством эякулированных сперматозоидов бесплодных мужчин

.

Андрология

2012

;

44

:

187

–

199

.

MEEGUGUER

M

,

M

,

Martínez-Conejero

JA

,

O’CONNOR

JE

,

PELLICER

A

,

REMOHI

J

,

Garrido

N

.

Значение окисления ДНК сперматозоидов в развитии эмбриона и репродуктивных исходах в программе донорства ооцитов: новая модель для изучения прогностического фактора мужского бесплодия

.

Fertil Steril

2008

;

89

:

1191

–

1199

.

Mitchell

LA

,

De Iuliis

GN

,

Aitken

RJ

.

Анализ TUNEL последовательно недооценивает повреждение ДНК в сперматозоидах человека и зависит от уплотнения ДНК и жизнеспособности клеток: разработка улучшенной методологии

.

Int J Андрол

2011

;

34

:

2

–

13

.

MUSSET

B

,

CLARK

RA

,

RA

,

Decoursey

TE

,

Petheo

GL

,

Geiszt

M

,

CHEN

Y

,

Cornell

JE

,

Эдди

CA

,

Бжиски

RG

,

Эль Джамали

А

.

NOX5 в сперматозоидах человека: экспрессия, функция и регуляция

.

J Biol Chem

2012

;

287

:

9376

–

9388

.

Noblance

A

,

Damon-Soubeyrand

C

,

Karrich

,

Karrich

B

,

Heenry-Berger

J

,

Cadet

R

,

SAEZ

F

,

Guiton

R

,

Янни

L

,

Понс-Рейрайи

H

,

Альварес

JG

и др..

Окислительное повреждение ДНК сперматозоидов млекопитающих: где и почему поражается мужское ядро?

Свободный радикал Биол Мед

2013

;

65

:

719

–

723

.

OPII

WO

,

NUKALA

VN

,

VN

,

Sultana

R

,

Pandya

JD

,

день

км

,

Merchant

мл

,

KLEIN

JB

,

Салливан

PG

,

Баттерфилд

DA

.

Протеомная идентификация окисленных митохондриальных белков после экспериментальной черепно-мозговой травмы

.

J Нейротравма

2007

;

24

:

772

–

789

.

R

,

R

,

R

,

RAO

KA

,

KA

,

Manigandan

P

,

Vickram

AS

,

Archana

A

,

Sridharan

TB

.

Чай полифенол-Т.кора арджуны в качестве антиоксиданта для сперматозоидов у бесплодных курильщиков

.

Cryo Letters

2017

;

38

:

95

–

99

.

Partyka

A

,

RODAK

O

,

Bajzert

J

,

Kochan

J

,

Niżański

W

.

Влияние добавок L-карнитина, гипотаурина и таурина на качество криоконсервированной куриной спермы

.

BioMed Res Int

2017

;

2017

:

7279341

.

Пухьянто

DA

,

Карри

BJ

,

Айткен

RJ

.

Пролактин способствует выживанию сперматозоидов человека посредством механизмов, которые включают стимуляцию фосфорилирования Akt и подавление активации и капацитации каспаз

.

Эндокринология

2010

;

151

:

1269

–

1279

.

Purdey

MS

,

Connaughton

HS

,

HS

,

,

Schartner

,

Schartner

EP

,

MONRO

TM

,

THOMPSON

JG

,

aitken

RJ

,

Абелл

AD

.

Боронатные зонды для обнаружения выделения перекиси водорода из сперматозоидов человека

.

Free Radic Biol Med

2015

;

81

:

69

–

76

.

Перес-Креспо

M

,

Пинтадо

B

,

Гутьеррес-Адан

A

.

Влияние теплового стресса мошонки на жизнеспособность сперматозоидов, целостность ДНК сперматозоидов и соотношение полов потомства у мышей

.

Мол Репрод Дев

2008

;

75

:

40

–

47

.

Ричардсон

ДВ

. AID и банки спермы в Великобритании. В:

Дэвид

G

,

Цена

WS

(ред.).

Искусственное осеменение человека и сохранение спермы

.

New York, NY

:

Plenum Press

,

1980

:

11

–

14

.

ROHAYEM

J

,

SINTHOFEN

N

,

Nieschlag

E

,

Kliesch

S

,

Zitzmann

M

.

Причины гипогонадотропного гипогонадизма предсказывают ответ на заместительную терапию гонадотропинами у взрослых

.

Андрология

2016

;

4

:

87

–

94

.

Saleh

RA

,

RA

,

Agarwal

A

,

Kandirali

E

,

Sharma

RK

,

Thomas

AJ

,

NADA

EA

,

Evenson

DP

,

Альварес

JG

.

Лейкоцитоспермия связана с повышенной выработкой активных форм кислорода сперматозоидами человека

.

Fertil Steril

2002

;

78

:

1215

–

1224

.

Sawyer

DE

,

Mercer

BG

,

Wiklendt

AM

,

Aitken

RJ

.

Количественный анализ геноспецифических повреждений ДНК в сперматозоидах человека

.

Мутат Рез

2003

;

529

:

21

–

34

.

Сейфи-Джамади

A

,

Ахмад

E

,

Ансари

M

,

Корам

H

.

Антиоксидантное действие кверцетина в разбавителе, содержащем ДМА или глицерин, на способность к замораживанию спермы козы

.

Криобиология

2017

;

75

:

15

–

20

.

Setyawan

EM

,

EM

,

KIM

MJ

,

OH

HJ

,

KIM

GA

,

JO

YK

,

Lee

Sh

,

CHOI

YB

,

Ли

БК

.

Спермин снижает уровни активных форм кислорода и уменьшает криокапацитацию при криоконсервации спермы собак

.

Biochem Biophys Res Commun

2016

;

479

:

927

–

932

.

Showell

мг

,

Mackenzie-Proctor

R

,

BROWN

J

,

Yazdani

A

,

stankiewicz

MT

,

HART

RJ

.

Антиоксиданты при мужском бесплодии

.

Cochrane Database Syst Rev

2014

;

19

:

CD007411

. .

Склонная к ускоренному старению мышь 8 как модель окислительного стресса и нарушения репарации ДНК в мужской зародышевой линии

.

Репродукция

2013

а;

146

:

253

–

262

.

SMITH

TB

,

DUN

MD

,

SMITH

ND

,

Curry

,

Curry

BJ

,

Connaughaughton

HS

,

aitken

RJ

.

Наличие в сперматозоидах человека пути эксцизионной репарации усеченного основания, опосредованного OGG1

.

J Cell Sci

2013

b;

126

:

1488

–

1497

.

Speichinger

JP

,

Mattox

JH

.

Гомологичное искусственное осеменение и олигоспермия

.

Fertil Steril

1976

;

27

:

135

–

138

.

SULEIMAN

SA

,

ALI

ME

,

ME

,

ZAKI

ZM

,

EL-MALIK

EL

,

NASR

MA

.

Перекисное окисление липидов и подвижность сперматозоидов человека: защитная роль витамина Е

.

Дж Андрол

1996

;

17

:

530

–

537

.

Thomson

LK

,

FLEMING

SD

,

SD

,

aitken

RJ

,

de iuliis

GN

,

Zieschang

JA

,

CLARK

AM

.

Вызванное криоконсервацией повреждение ДНК сперматозоидов человека преимущественно опосредовано окислительным стрессом, а не апоптозом

.

Hum Reprod

2009

;

24

:

2061

–

2070

.

Тосик

Дж

,

Уолтон

А

.

Метаболизм сперматозоидов. Образование и выведение перекиси водорода сперматозоидами и влияние на подвижность и выживаемость

.

Biochem J

1950

;

47

:

199

–

212

.

Treulen

F

,

Uribe

P

,

Boguen

R

,

Villegas

СП

.

Изменение проницаемости митохондрий увеличивает выработку активных форм кислорода и вызывает фрагментацию ДНК в сперматозоидах человека

.

Hum Reprod

2015

;

30

:

767

–

776

.

Тур-Каспа

I

,

Дудкевич

А

,

Конфино

Е

,

Глейхер

3 Н 90.

Объединенные последовательные эякуляты: способ увеличения общего количества подвижных сперматозоидов у мужчин с олигозооспермией

.

Fertil Steril

1990

;

54

:

906

–

909

.

Uribe

P

,

Boguen

R

,

Treulen

F

,

F

,

Sánchez

R

,

Villegas

JV

.

Опосредованный пероксинитритом нитрозативный стресс снижает подвижность и потенциал митохондриальной мембраны сперматозоидов человека

.

Моль Гум Репрод

2015

;

21

:

237

–

243

.

Уоллес

EM

,

Эйткен

RJ

,

Ву

FC

.

Остаточная функция сперматозоидов при олигозооспермии, вызванной энантатом тестостерона, применяемым в качестве потенциального стероидного мужского контрацептива

.

Int J Андрол

1992

;

15

:

416

–

424

.

Васим

М

,

Табассум

Х

,

Парвез

S

.

Мелатонин модулирует переходную пору проницаемости и индуцирует 5-гидроксидеканоат ингибирование КАТФ-канала в изолированных митохондриях мозга

.

Митохондрия

2016

;

31

:

1

–

8

.

Уиттингтон

К

,

Форд

WC

.

Относительный вклад лейкоцитов и сперматозоидов в продукцию активных форм кислорода в суспензиях спермы человека

.

Int J Androl

1999

;

22

:

229

–

235

.

Всемирная организация здравоохранения

Лабораторное руководство ВОЗ по исследованию и обработке спермы человека

, 5-е изд.

Geneva, Switzerland

:

WHO Press

,

2010

.

Целевая группа Всемирной организации здравоохранения по методам регулирования мужской фертильности

.

Контрацептивная эффективность тестостерон-индуцированной азооспермии и олигозооспермии у нормальных мужчин

.

Fertil Steril

1996

;

65

:

821

–

829

. .

Использование яйцеклеток животных без зон в качестве тест-системы для оценки оплодотворяющей способности сперматозоидов человека

.

Биол Репрод

1976

;

15

:

471

–

476

.

Чжан

ys

,

Wei

,

,

CHEN

,

CHEN

B

,

XU

LH

,

Tang

D

,

PENG

CL

,

LIU

JJ

.

Влияние референтных значений для анализа спермы, предложенных в 5-м издании Лабораторного руководства ВОЗ, на спектр показаний для внутриматочной инсеминации]

.

Чжунхуа Нан ​​Кэ Сюэ

2014

;

20

:

253

–

256

.

ZHU

Z

,

REB

Z

,

Z

,

вентилятор

x

,

Pan

y

,

LV

S

,

,

C

,

LEI

A

,

Цзэн

Вт

.

Цистеин защищает сперматозоиды кроликов от повреждений, вызванных активными формами кислорода

.

PLoS One

2017

;

12

:

e0181110

.

© Автор(ы) 2018.Опубликовано Oxford University Press от имени Европейского общества репродукции человека и эмбриологии. Все права защищены. Для получения разрешений отправьте электронное письмо по адресу: [email protected]

.

Воздействие системного инсектицида Фипронил на трутней косвенно снижает репродуктивный потенциал маток

Фипронил влияет на фертильность самцов

Очевидные последствия сублетального воздействия фипронила исследовались в полуполевых условиях (). Не наблюдалось значительного влияния на поведение рабочих при поиске пищи (,С) или на выживаемость трутней ().Эти результаты неудивительны, поскольку поведенческие эффекты фипронила наблюдаются у рабочих пчел только при концентрациях ≥1 мкг.кг ^{-1  33 ,34 ,36} . Однако никакой информации о воздействии фипронила на дронов не было. В этом контексте трутни подвергались воздействию фипронила через пищу, принесенную собирателями в улей в период от вылупления до половой зрелости трутней. Однако нельзя исключать, что трутни непосредственно потребляют сироп с фипронилом в концентрации 0,1  мкг/л по возвращении собирателей.Кроме того, трутни также могли потреблять зараженную пищу, хранящуюся в улье, с концентрацией фипронила, отличной от концентрации сиропа. Во время хранения в улье и во время созревания меда фипронил может концентрироваться, частично передаваться пчелам или метаболизироваться пчелами или ферментами, выделяемыми с медом ⁴³ , и могут появляться метаболиты. Таким образом, в этот период воздействие дронов напрямую не контролируется. Следовательно, для оценки воздействия фипронила концентрация фипронила и его метаболитов в меде, хранящемся в ульях, после 20 дней кормления определялась с помощью химического анализа ГХ-МС/МС.Однако значения концентраций фипронила и метаболитов были ниже предела обнаружения (LOD = 0,2 мкг/кг меда). Остатки у самцов не анализировались, поскольку мы провели предварительную оценку экспозиции. Эта последняя оценка была основана на потреблении сахара трутнями (21–90 мг/трутень/день ⁴⁴ ), концентрации сахара в пище (50% вес./об.), периоде воздействия (20 дней) и концентрации фипронила. в сиропе (0,1 мкг/л). Таким образом, в худшем случае (т.д., максимальное потребление пищи, отсутствие элиминации и полное биоаккумуляция проглоченных доз), кумулятивная доза фипронила, проглоченная на одного трутня в течение периода воздействия, оценивалась в 360 мкг/трутня. Учитывая, что трутни весят примерно 196–225 мг ⁴⁵ , это кумулятивное количество фипронила соответствует 1,84 мкг фипронила на кг трутня при массе дрона 196 мг; это количество было меньше LOD аналитического метода (3  мкг/кг пчел). Несмотря на такой низкий уровень воздействия, нельзя исключать влияние фипронила на развитие трутней.Однако не наблюдалось никакого влияния на скорость половой зрелости трутней или объем спермы ().

Поиск пищи в колониях.

В течение 20 дней, от появления трутней до половой зрелости, колонии ежедневно снабжались сахарным сиропом (50% вес./об.) вволю с использованием кормушки, для сбора собирателями с 8:30 до 11:30; сироп заменили измельченной пыльцой и водой до конца дня. В то время как ульи кормились в течение периода воздействия, кормовое поведение отслеживалось в 44 колониях из 22 отсеков туннеля.( A ) Иллюстрация экспериментальной платформы; ( B ) кумулятивный кормовой сироп; и ( C ) кумулятивная пыльца. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение суточного совокупного количества корма, наблюдаемого в каждом отсеке (1 кормушка на 2 улья). Для каждого лечения данные соответствуют набору значений из 4 экспериментов, проведенных в период с 2012 по 2014 год (n = 11). Статистический анализ темпов роста кумулятивного кормодобывания (α) и максимальных кумулятивных количеств (β) проводили с использованием обобщенной линейной смешанной модели со случайным влиянием на различные эксперименты.

Таблица 1

Влияние хронического воздействия фипронила на характеристики жизненного цикла трутней.

+

	Ctrl (п = 22)	Фип (п = 22)	Значение р
	среднее ± стандартное отклонение	среднее ± SD
Дрон коэффициент выживаемости ( %)	45,3 ± 22,8	39,8 ± 22,4	0,296
Уровень зрелости трутней (%)	62 ± 6	64696	64696	64696		0,405
Объем спермы (мкл / дрон)	0.83 ± 0.11	0,85 ± 0.11	0,64724 946

Поскольку на индивидуальном уровне наблюдалось никакие видимые эффекты качество спермы изучалось более детально путем анализа количества сперматозоидов и других физиологических показателей. Трутни достигают сперматогенеза на личиночной стадии. Таким образом, количество сперматозоидов при появлении определяется рано. Таким образом, поскольку воздействие фипронила начиналось при вылуплении, оно не могло повлиять на выработку сперматозоидов и могло повлиять только на выработку семенной жидкости, которая происходит во время полового созревания трутней примерно через 15–20 дней после вылупления.В течение этого периода сперматозоиды созревают в семенных пузырьках с головкой, закрепленной в секреторном эпителии, и высвобождаются в семенной железе при половой зрелости ⁴⁶ . В настоящем исследовании объем спермы, производимой на трутня, не зависел от воздействия фипронила, что также свидетельствует о том, что фипронил не оказывает явного влияния на качество спермы (). Тем не менее, воздействие фипронила вызывало снижение общей концентрации сперматозоидов (медиана 8,59 × 10 ⁶ сперматозоидов против10,47 × 10 ⁶ сперматозоидов в контроле, P  < 0,0001, ) и повышенный уровень смертности сперматозоидов (медиана 40,91% против 30,32% в контроле, P  < 0,0001, ) у зрелых трутней. Можно предложить две гипотезы, связывающие снижение концентрации сперматозоидов в сперме с воздействием фипронила: (i) часть сперматозоидов (мертвых или живых) оставалась связанной с мембраной семенных пузырьков и не была доступна в эякулированной сперме; и/или (ii) сперматозоиды, погибшие в процессе созревания, также могут подвергаться лизису до эякуляции.

Влияние хронического воздействия фипронила на фертильность трутней.

На следующий день после сбора образцы спермы были проанализированы для оценки воздействия фипронила на фертильность трутней. ( A ) Общая концентрация сперматозоидов (spz) в сперме, включая живые и мертвые сперматозоиды. ( B ) Коэффициент смертности от spz, выраженный в процентах (%). ( C ) Восстановительный потенциал спермы в единицах поглощения (AU λ = 570 нм), соответствующий скорости восстановления резазурина на миллион спз.( D ) Уровень аденозинтрифосфата (АТФ) в spz, выраженный как интенсивность люминесценции (LI) на миллион spz. Для каждого параметра данные соответствуют значениям, полученным в экспериментах, проведенных в период с 2012 по 2014 гг. Определение восстановительного потенциала и содержания АТФ проводили только в первых трех экспериментах; «n» указывает количество образцов для каждой обработки и параметра. Статистический анализ проводился с использованием обобщенной линейной смешанной модели со случайным влиянием на различные эксперименты.

На клеточном уровне восстановительный потенциал соответствует способности клеток метаболически восстанавливать соединения или пассивно восстанавливать оксиданты в результате метаболической активности или ионизирующих лучей. Восстановительный потенциал увеличивался при воздействии фипронила (медиана 0,59 единиц поглощения (AU) против 0,42 AU в контроле, P  < 0,0001, ). Содержание клеточного АТФ, продуцируемого митохондриями, также было увеличено (медиана интенсивности люминесценции (LI) 2002,59 против 2676,78 LI в контроле, P  < 0.0001, ). В сперматозоидах АТФ соответствует запасу энергии, доступной не только для метаболической активности, но и для подвижности. Подобные метаболические модуляции наблюдались в других типах клеток, а также в митохондриях ^{31 ,47 ,48 ,49} ; кроме того, в зависимости от режима воздействия эти модуляции могут привести к гибели клеток ^{48 ,49 ,50} . Мы предполагаем, что это влияние на смертность и концентрацию сперматозоидов связано с физиологическими нарушениями, поскольку увеличение энергетического метаболизма может привести к окислительным повреждениям за счет образования активных форм кислорода, как ранее было подтверждено для фипронила ^{38 ,49 ,50} .Хотя сперматозоиды обладают антиоксидантной защитой ⁵¹ , перегрузка этой защиты может привести к гибели клеток, что объясняет высокую смертность сперматозоидов у трутней, подвергшихся воздействию фипронила. Более того, более высокие уровни АТФ, наблюдаемые в сперме подвергшихся воздействию трутней, могут быть связаны не только с усилением метаболизма, но и со снижением потребления АТФ, что приводит к снижению подвижности сперматозоидов. Это сниженное потребление АТФ может неблагоприятно повлиять на фертильность матки, потому что подвижность участвует в конкуренции между сперматозоидами в процессе миграции, чтобы сначала достичь сперматеки ⁵² , а затем оплодотворить яйцеклетки ⁵³ .Эти результаты убедительно свидетельствуют о том, что на репродуктивный потенциал трутней может влиять хроническое воздействие фипронила через пищу. Эти пагубные эффекты фипронила на качество спермы трутней также предполагают потенциальное влияние на оплодотворение матки.

Заболеваемость у матки

Воздействие фипронила на матку было исследовано путем анализа веса и содержания сперматозоидов сестринских маток через 14 дней после их инструментального осеменения фиксированным объемом спермы (8  мкл) ⁵⁴ .Никаких существенных различий в весе маток, осемененных спермой трутней, подвергшихся или не подвергшихся воздействию фипронила, не наблюдалось. Наоборот, матки, осемененные спермой экспонированных трутней, содержали меньше сперматозоидов (медиана: 5,52 × 10 ⁶ по сравнению с 6,86 × 10 ⁶ в контроле, P  = 0,0303, ) и демонстрировали большую долю мертвых сперматозоидов (медиана сперматозоидов). : 38,72% против 25,96% в контроле, P  = 0,0035, ). Следовательно, количество живых сперматозоидов, обнаруженных в сперматеке, уменьшилось на 30% (медианные значения: 4.62 × 10 ⁶ в группе лечения по сравнению с 3,14 × 10 ⁶ сперматозоидов в контроле, P  = 0,0005, ), что отражает снижение потенциала оплодотворения яйцеклеток. Известно, что объем сперматеки коррелирует с массой тела матки ¹⁹ , которая была одинаковой в двух группах маток. Таким образом, различия в содержании сперматеки в двух группах маток объясняются различиями в свойствах спермы, а не физиологией маток. Этот беспрецедентный результат демонстрирует, что химический стрессор может косвенно влиять на репродуктивный потенциал королевы, изменяя сперму трутней, подвергшихся воздействию.

Последствия воздействия трутней на маток.

После воздействия трутней в эксперименте, проведенном в 2014 г., часть собранной спермы была использована для инструментального осеменения 2 групп по 40 маток в каждой. Две недели спустя выживших маток в контрольной (n = 28) и фипрониловой группах (n = 30) взвешивали и препарировали, а сперматеки анализировали для определения ( a ) веса матки, ( b ) числа сперматозоидов (spz), хранящихся в сперматеке, ( c ) уровень смертности spz, выраженный в процентах (%) от хранящихся spz, и ( d ) живых spz, доступных для оплодотворения яйцеклеток, вычитаемых из двух предыдущих параметров .Критерий Стьюдента применяли к статистически проанализированному весу маток ( и ). Для параметров ( b – d ) статистические анализы проводились с использованием обобщенной линейной смешанной модели со случайным воздействием на улей, из которого произошли капилляры спермы.

Эти результаты свидетельствуют о воздействии на механизмы переноса спермы, которые у медоносной пчелы несколько сложны. Сходство характеристик содержимого сперматеки (количество общих и живых сперматозоидов) с введенной спермой свидетельствует о пассивном переходе сперматозоидов из яйцеводов в сперматозоиды.После спаривания яйцеводы маток получают избыток примерно 90 ×10 ⁶ сперматозоидов от нескольких трутней, и лишь небольшая их часть (от 4 × 10 ⁶ до 7 × 10 ⁶ ) достигает сперматеки путем активной миграции или пассивный транспорт ^{52 ,55} . Это говорит о том, что небольшое изменение исходного количества сперматозоидов, полученных маткой, не влияет на количество сперматозоидов, хранящихся в сперматеке. Это предположение согласуется с отсутствием корреляции между исходным количеством сперматозоидов в сперме, использованной для осеменения маток, и количеством сперматозоидов, извлеченных из сперматеки ( P  = 0.386, ). Поскольку качество спермы в семяприемнике выше, чем в яйцеводе ⁵⁶ и поскольку мертвые сперматозоиды не мигрируют в семяприемник ^{52 ,57} , процесс миграции можно рассматривать как механизм отбора лучших сперматозоидов. для хранения, чтобы компенсировать более низкое качество спермы и поддерживать устойчивость вида. Наши данные показывают, что этот защитный механизм можно обойти, когда оплодотворение осуществляется измененной спермой трутней, подвергшихся воздействию загрязнителей окружающей среды, таких как фипронил, что приводит к уменьшению количества спермы и смертности в сперматеке.При рассмотрении всех модальностей вместе, только число ( P  < 0,035, ), но не уровень смертности ( P  = 0,261, ) сперматозоидов, хранящихся в сперматеке, зависело от количества мертвых сперматозоидов в сперме во время миграционного процесса. . При рассмотрении модальностей по отдельности расхождение в наблюдаемом количестве сперматозоидов и смертности в сперматеке между контрольной и фипрониловой модальностями могло быть результатом отсроченных эффектов воздействия дрона.Эти отсроченные эффекты могут быть следствием, по крайней мере частично, метаболических нарушений, ранее наблюдавшихся в сперме, т. е. повышенного восстановительного потенциала и содержания АТФ. Таким образом, мы предполагаем, что уменьшенное количество сперматозоидов, извлеченных из сперматеки маток, осемененных спермой экспонированных трутней, также может быть объяснено, независимо от описанного выше явления, предполагаемым негативным влиянием таких метаболических нарушений на способность сперматозоидов к миграции.Аналогичным образом мы предполагаем, что более высокая смертность сперматозоидов, наблюдаемая в сперматеке, может быть объяснена либо нарушением адаптации сперматозоидов, достигших сперматеки, к семенной жидкости, что необходимо для длительного хранения ⁵⁸ , либо увеличение динамики смертности хранящихся сперматозоидов, что является естественным явлением в сперматеке с течением времени ⁵⁹ .

Взаимосвязь между характеристиками спермы трутней и содержанием сперматозоидов.

Для всех инструментально осемененных маток (IIQ) (n = 58) количество и смертность инъецированных сперматозоидов (spz) сравнивали с таковыми spz, хранящимися в сперматеке. Стрелки соответствуют влиянию одного фактора на другой. Количество spz, полученное маткой, рассчитывали на основе концентрации и объема введенного spz (8  мкл). Статистический анализ проводился с использованием обобщенной линейной смешанной модели со случайным воздействием на улей, из которого произошли капилляры спермы.линейная смешанная модель со случайным влиянием на различные эксперименты.

Эти результаты показывают, что воздействие пестицидов, таких как фипронил, на трутней медоносных пчел может отрицательно сказаться на плодовитости не подвергавшихся воздействию маток. Кроме того, в действительности ситуация может быть еще хуже, учитывая, что могут возникнуть дополнительные эффекты, если ферзи также будут открыты. Наши результаты поднимают вопросы о судьбе маток, оплодотворенных трутнями, подвергшимися воздействию пестицидов, и об устойчивости их колоний.

Потенциальное воздействие на потомство матки

Семьи медоносных пчел обладают высоким потенциалом развития благодаря высокой активности матки, которая может откладывать до 200 000 яиц в год ⁴⁵ . Этот высокий потенциал развития поддерживается тремя основными свойствами семени, которое хранится в сперматеке матки и связано с полиандрическими практиками матки. (i) Хранящаяся сперма демонстрирует генетическое разнообразие благодаря спариванию матки с 20 трутнями ^{55 ,60} .Это генетическое разнообразие обеспечивает эволюционное преимущество, которое приводит к улучшению приспособленности колонии за счет улучшения адаптации к факторам стресса окружающей среды ^{61 ,62} . (ii) Сперматека содержит большое количество SPERMATOZOA ^{, 54 , 54 , 59 , 60 , 60} , а (iii) Spermatozoa демонстрируют высокую жизнеспособность ^{20 , 56 , 57 , 57 , 57 , 57 ,59 ,60} . Последние два свойства, которые были исследованы в этом исследовании, имеют большое значение, поскольку они являются неотъемлемой частью важной деятельности по откладыванию яиц, которая происходит в течение нескольких лет.Таким образом, оптимизация производства рабочих относительно потребностей колонии и процесс роения для создания новой колонии ⁴⁵ могут быть поставлены под угрозу. Поскольку мы наблюдали, что фипронил вызывает снижение численности и жизнеспособности сперматозоидов у матки, фипронил может оказывать неблагоприятное и косвенное воздействие на продуктивность матки, приводя к сокращению продолжительности жизни матки и/или численности потомства из-за изменения фертильности матки. Королева.

Несостоятельность маток или вытеснение маток является основным долгосрочным последствием снижения качества содержимого сперматозоидов.Вполне вероятно, что матка с меньшим количеством живых сперматозоидов не способна откладывать оплодотворенные яйца так же долго, как матка с лучшим потомством. Кроме того, плохое содержание сперматеки может количественно и качественно модулировать профиль феромонов матки, что может стать менее привлекательным для рабочих, что приведет к ухудшению социальных взаимодействий и сплоченности колонии ⁶³ . Эти процессы способствуют ожидаемой вытеснению, за которой следует критический период, в течение которого не только отсутствует производство расплода, но также существует риск того, что новая матка будет убита во время брачного полета или плохо осеменена, что может иметь пагубные последствия для устойчивости колонии.

Содержимое сперматеки также необходимо для оплодотворения яйцеклетки, процесс, который плохо изучен. Неизвестно, выделяют ли матки исключительно живые сперматозоиды или случайную смесь живых и мертвых сперматозоидов для оплодотворения яиц. Если матка выпускает случайную смесь живых и мертвых сперматозоидов, более высокое количество мертвых сперматозоидов в сперматеке маток, осемененных спермой трутней, подвергшихся воздействию фипронила, может привести к большей доле отложенных неоплодотворенных яиц, что приведет к дефициту рабочего расплода. .Вероятность наличия неоплодотворенных яйцеклеток из-за исключительного выброса мертвых сперматозоидов особенно важна, поскольку матка экономна с точки зрения использования спермы ⁶⁴ . Если матка выпускает только живые сперматозоиды, дефекты производства расплода потенциально могут возникнуть в результате изменения функциональной и структурной целостности сперматозоидов, особенно мембран или ДНК, на которые, как было показано, влияет окислительный стресс у крыс после воздействия фипронила ³⁸ . Повреждение ДНК также наблюдается в сперматозоидах насекомых, особенно у Drosophila, после нарушения окислительно-восстановительного гомеостаза, вызванного стрессором окружающей среды ⁶⁵ .Таким образом, можно предположить, что аналогичные эффекты могут возникать в сперматозоидах медоносных пчел, которые проявляют высокий восстановительный потенциал после воздействия фипронила трутнями; однако для подтверждения этой гипотезы необходимы дальнейшие исследования. Если такая гипотеза будет продемонстрирована у медоносной пчелы, повреждение ДНК может быть вызвано фипронилом или его метаболитами, что приведет к модификациям ДНК, которые могут привести к мутациям или нарушению эпигенетических процессов ⁶⁶ . Это предположение подтверждается способностью фипронила воздействовать на митохондрии ^{31 ,47 ,48} , которые имеют решающее значение для эпигенетической регуляции и ответа на повреждение ДНК ⁶⁷ .После воздействия загрязнителей окружающей среды, включая пестициды, трансгенерационные эффекты, такие как снижение фертильности и/или некоторые задержки в развитии, могут повлиять на здоровье потомства в течение нескольких поколений, как это наблюдается у не подвергавшихся воздействию особей F1 других видов насекомых ^{11 ,12 ,68} . Следовательно, мы предполагаем, что аналогичные вредные эффекты могут возникать у медоносных пчел. Однако необходимы дополнительные исследования вертикальной передачи между колониями, которая также может происходить через маток, несущих модификации ДНК (поколение ≥ F1), и трутней, полученных от этих маток.Если бы это предположение было продемонстрировано для трутней, гаплоидных с генетическим материалом маток, поскольку они развиваются из неоплодотворенных яиц, то передача измененного генетического материала могла бы происходить только от F2. Следовательно, косвенные эффекты пестицидов, такие как наблюдаемые в этом исследовании у маток на индивидуальном уровне, могут распространяться на колониальный уровень даже для колоний и их линий, которые никогда не подвергались воздействию исходного стрессора. Этот способ передачи эффекта пестицидов может отрицательно сказаться на видах и объяснить сокращение численности медоносных пчел, по крайней мере, частично.Эта ситуация может ухудшиться из-за воздействия на производителей медоносных пчел множества загрязняющих веществ, включая другие пестициды ⁶⁹ , которые могут действовать отдельно или в синергии ⁷⁰ или взаимодействовать с инфекционными агентами и паразитами ^{71 ,72} .

Наши результаты не позволяют исключить воздействие на потомство матки, но они убедительно свидетельствуют о том, что плохое качество трутней, приводящее к плохому спариванию маток, может быть механистическим объяснением отказа матки.Для подтверждения этого предположения следующим шагом будет мониторинг колоний в полевых условиях после реинтродукции искусственно осемененных маток. Интересным дальнейшим шагом может стать оценка способности трутней передавать свою сперму в естественном контексте спаривания. В этом контексте возникает сильная конкуренция между трутнями, и успех спаривания трутней можно изучить. Таким образом, если подвергшиеся воздействию трутни не могут спариваться, в сперматеке не будет присутствовать измененной спермы. Однако фертильность может быть нарушена без изменения жизнеспособности трутней, как это наблюдается у людей, у которых наблюдается постоянное снижение фертильности в течение более 50 лет ⁵ .Следовательно, трутни с пониженной плодовитостью могут иметь такие же шансы на спаривание, как и необлученные трутни. Таким образом, в случае успеха бедная сперма, выдаваемая открытыми трутнями, может быть разбавлена ​​в сперматеке здоровой спермой, потому что пчелиные матки спариваются с 20 трутнями ^{55 ,60} и имеют избыток сперматозоидов. Следовательно, нельзя исключать, что такое спаривание приведет к ненаблюдаемым последствиям для потомства. Однако шансы увидеть здоровых мужчин без снижения фертильности могут быть относительно низкими.В естественных условиях колонии и, следовательно, трутни подвергаются многочисленным стрессовым факторам окружающей среды из-за повсеместного распространения биотических стрессоров ¹³ и химических веществ в ульях ^{73 ,74} . Следовательно, кажется более вероятным, что произойдет общее снижение фертильности трутней, что приведет к обеднению спермы, хранящейся у маток, как это продемонстрировано с фипронилом, что приведет к отказу маток.

Для медоносных пчел наличие таких нарушений фертильности, в дополнение к сублетальным эффектам, при очень низких уровнях воздействия поднимает вопрос об экологических рисках, связанных с использованием системных пестицидов, таких как фенилпиразолы и неоникотиноиды.Таким образом, репродуктивные нарушения, вызванные агрохимикатами у медоносных пчел, также должны учитываться при оценке пестицидных рисков.

В условиях сокращения популяций опылителей ⁷⁵ было бы удивительно, если бы нарушения репродуктивной функции ограничивались медоносными пчелами, не затрагивая других насекомых-опылителей. Это снижение плодородия может привести к исчезновению многих видов насекомых-опылителей, что, в свою очередь, угрожает воспроизводству растений и, следовательно, биологическому разнообразию.Таким образом, нарушение репродуктивной функции стрессорами внешней среды, такими как агрохимические загрязнители и биологические агенты, можно рассматривать как катализатор феномена вымирания видов.

Тимохинон ослабляет тестикулярную и спермотоксичность после субхронического воздействия свинца на самцов крыс: задействованы возможные механизмы

Цели Семенники являются одним из основных органов-мишеней для отравления свинцом (Pb). В текущем исследовании изучался механизм (механизмы) терапевтического потенциала тимохинона (TQ), активного начала семян Nigella sativa, против токсичности яичек после субхронического воздействия свинца в свете цитопатических эффектов, апоптотических сигнальных путей, окислительного стресса, сыворотки. уровни половых гормонов и экспрессия гена тестикулярной ароматазы.Материалы и методы Тридцать два самца белых крыс были случайным образом распределены в контрольную группу, PbAc (20 мг PbAc/кг массы тела, перорально), TQ (5 мг TQ/кг массы тела, растворенные в кукурузном масле, перорально) и группы PbAc + TQ на 56 последовательных дней. Ключевые результаты Крысы, получавшие PbAc, показали значительное снижение массы семенников и придатков яичек, количество сперматозоидов, подвижность и жизнеспособность, показатель сперматогенеза и уровни ФСГ, ЛГ, тестостерона и эстрадиола в сыворотке, а также значительное снижение молекул антиоксидантов в яичках (фермент супероксиддисмутазы и восстановленный глутатион). , а также значительное повышение аномалий спермы, окислительных биомаркеров (малонового диальдегида и оксида азота) по сравнению с контрольной группой.Кроме того, Pb индуцировал значительное подавление экспрессии гена ароматазы, активацию путей апоптоза Bax и каспазы-3. Кроме того, Pb вызывал полную гиалинизацию семенных канальцев (38%), отторжение зародышевого эпителия (15%) и гипоцеллюлярность (8%). Однако введение TQ с PbAc улучшало качество спермы, гистологию яичек и окислительный/антиоксидантный статус, а также уровни ЛГ, тестостерона и E2 в сыворотке по сравнению с группой PbAc. Кроме того, TQ с PbAc значительно снижает интенсивность окрашивания и площадь иммуноэкспрессии Bax и каспазы-3.Значение TQ может проявлять свой приемлемый терапевтический потенциал против Pb-индуцированной тестикулярной и спермотоксичности через антиоксидантные, эндокринные и антиапоптотические пути.

Жизнь | Бесплатный полнотекстовый | Экзогенные факторы, влияющие на функциональную целостность мужской репродукции

Эндокринные разрушители представляют собой большую группу ксенобиотических соединений окружающей среды, которые могут нарушать биосинтез, секрецию, действие или метаболизм эндогенных гормонов, что в конечном итоге приводит к изменению эффективности этих гормонов. [120,121].ЭД могут иметь природное происхождение (фитоэстрогены, гормоны и др.) или являться результатом антропогенной деятельности (лекарственные препараты, диоксины, пестициды и др.) [35]. Поскольку большинство из них могут взаимодействовать с клеточными поверхностями или ядерными рецепторами, они могут вызывать изменения клеточного гомеостаза даже при крайне низких концентрациях, что относит их к особой категории токсических веществ с точки зрения риска для здоровья [122]. Эти вещества характеризуются персистентностью и свойствами биоаккумуляции, которые связаны с торможением и нарушением физиологических процессов на уровне клеток и молекулярных сигнальных путей.Результатом являются необратимые изменения в эндокринной, сердечно-сосудистой, нервной, репродуктивной и иммунной системах [123]. Из-за своей способности вмешиваться в рецепторы эстрогена, прогестерона и андрогена эндокринные разрушители представляют чрезвычайно серьезный риск для здоровья в связи с нарушением мужской репродуктивной функции [124]; на переднем крае обсуждений находится бесплодие из-за уменьшения количества сперматозоидов, снижения качества спермы и ингибирования стероидогенеза [7,125,126]. Многие ксенобиотики обладают свойствами, разрушающими эндокринную систему, включая промышленные химикаты, растворители, полициклические ароматические углеводороды, пластификаторы и соединения, содержащиеся в моющих средствах, косметике, сельскохозяйственных химикатах и ​​пестицидах, а также природные и синтетические гормоны и лекарства.Эти химические вещества широко распространены в окружающей среде, особенно по трофической цепи и в сточных водах [127,128]. В настоящее время внимание науки в области ЭД сосредоточено в основном на синтетических промышленных химикатах из-за отсутствия эволюционной адаптации к этим ксенобиотикам [129]. Это пластификаторы и другие химические вещества, присутствующие в пластиковой, а также в бумажной упаковке пищевых продуктов, которые практически постоянно подвергают человеческое население воздействию эндокринных разрушителей через пищу [130].Это явление было подтверждено многочисленными исследованиями, результаты которых свидетельствуют о повышении концентрации бисфенолов, алкилфенолов, фталатов и перфторалкильных соединений в слюне, моче и молоке подвергшихся воздействию лиц, а также в пищевых продуктах ежедневного потребления [131]. К ЭД также относятся многие агрохимикаты и пестициды, которые проявляют разрушающую эндокринную активность в живом организме [132]. В частности, пестициды первого поколения представляют собой опасное наследие для современного населения, поскольку они сохраняются в почве, водных отложениях, биоаккумулируются в тканях беспозвоночных и позвоночных и продвигаются вверх по трофическим цепям [133, 134].Многочисленные исследования подтверждают, что ежегодно увеличивающееся количество бесконтрольно выбрасываемых в окружающую среду соединений, которые мы классифицируем как эндокринные разрушители, наносят вред здоровью животных и человека, и необходимо следить за их действием и последствиями в организмах [7,135,136,137].

Как долго сохраняется сперма? Внутри тела или после заморозки

---

Как долго живут сперматозоиды — внутри тела или на других поверхностях — это больше, чем просто «забавный факт». На самом деле это может повлиять на вашу способность к зачатию.Знание того, что сперматозоиды живут в женской репродуктивной системе, например, 3–5 дней, означает, что вы можете заняться сексом за несколько дней до овуляции вашего партнера, и все равно это приведет к беременности.

Давайте узнаем, как долго могут жить сперматозоиды в различных сценариях, и попутно развеем несколько мифов.

 

Как долго сперматозоиды сохраняются в женских половых путях?

Одним из широко распространенных мифов является то, что сперматозоиды живут очень короткое время. Исследования показывают, что средняя продолжительность жизни сперматозоидов после эякуляции или введения в женскую репродуктивную систему составляет около трех дней.Однако это зависит от того, на каком этапе менструального цикла она находится — при правильном выборе времени более сильные сперматозоиды могут сохраняться до пяти дней.

Многое зависит от консистенции цервикальной слизи. Во время овуляции гормональные изменения изменяют состав цервикальной слизи, обеспечивая защитный эффект, предотвращающий быстрое высыхание сперматозоидов. Вместо своей характерной непрозрачной текстуры слизь разжижается, создавая подходящую среду для защиты сперматозоидов, не препятствуя движению.

В шейке матки также есть еще один способ удержания сперматозоидов во время овуляции: цервикальные «крипты», небольшие каналы от канала шейки матки. Эти склепы могут фактически служить временными хранилищами для спермы, которая затем со временем высвобождается, увеличивая шансы на оплодотворение.

Это означает, что «окно фертильности» составляет , на самом деле , за 5 дней до овуляции женщины. Это также означает, что вы можете заняться сексом в один прекрасный день, а оплодотворить яйцеклетку можно только через несколько дней — и на самом деле это происходит с большинством беременностей (поскольку точно определить момент овуляции удается редко).Это важно знать, пытаетесь ли вы зачать ребенка или пытаетесь избежать беременности.

 

Как долго сперматозоиды живут в другом месте?

Всем известен городской миф: двое подростков целуются в джакузи, а один эякулирует. Сперматозоиды плывут сквозь воду во влагалище другой, и это сюрприз! Беременность, хотя секса не было.

К счастью, это не реальность. Сперматозоиды очень маловероятно:

• плыть так далеко. Сперматозоиды не являются олимпийскими пловцами. Женская репродуктивная система на самом деле помогает увлекать сперму; без этой помощи они далеко не уйдут.
• выжить в жару. Исследования, начавшиеся примерно в 1941 году, предполагают, что температура выше температуры человеческого тела влияет на срок службы и качество спермы. Хотя в этих исследованиях измеряется температура мошонки, мы можем сделать вывод, что тепло само по себе оказывает негативное влияние на жизнеспособность сперматозоидов.

Таким образом, по всей вероятности, сперматозоиды, эякулированные в горячую ванну или ванну, не проживут достаточно долго, чтобы попасть во влагалище — они проживут всего несколько минут.

Даже при комнатной температуре или температуре тела сперматозоиды вряд ли выживут более часа или около того вне тела. Одним из наиболее важных факторов, влияющих на выживаемость сперматозоидов, является влажность. Сперматозоиды переносятся в сперме, жидкости, которая их питает и защищает; как только сперма испарится, защитить сперму нечем. Сперматозоидам, попадающим на сухую поверхность, повезло, что они продержались бы более часа.

Подождите, а как работает тестирование спермы по почте?

Наборы для тестирования спермы

, такие как Legacy, используют транспортную среду, ингредиент, который, как клинически доказано, защищает сперму во время ночной доставки.Кроме того, наши наборы изолированы и тщательно протестированы, чтобы гарантировать, что образцы не чувствительны к внезапным изменениям температуры при транспортировке. Эти меры продлевают срок жизни сперматозоидов вне организма как минимум до 48 часов, не оказывая существенного влияния на здоровье сперматозоидов.

Узнайте больше о науке о домашнем тестировании спермы .

 

Как долго сперматозоиды сохраняются в яичках?

Сперматогенез, или процесс производства сперматозоидов, занимает примерно 72 дня и постоянно происходит в яичках.После созревания сперматозоиды живут в «хранилище» в яичках, в частности, в хвостовом придатке яичка, в течение нескольких недель. После этого они реабсорбируются в организме.

Но при хранении качество спермы довольно быстро снижается. Исследования показывают, что фрагментация ДНК и повреждение митохондрий увеличиваются после 5 дней воздержания, а подвижность также снижается примерно через 7 дней.

Вот почему, хотя количество сперматозоидов увеличивается примерно через день после эякуляции, длительный период воздержания не приносит пользы сперматозоидам.Если вы пытаетесь забеременеть, лучше всего заниматься сексом каждые 1–2 дня в период фертильного периода вашего партнера.

 

Как долго может храниться сперма, если ее заморозить?

Замораживание вашей спермы защищает ее качество, независимо от того, замораживаете ли вы ее на короткое время или ищете место для длительного хранения. (Мы не говорим о том, чтобы засунуть сперму в домашний морозильник — медицинская криоконсервация осуществляется жидким азотом при температуре -196ºC.)

В исследовании, проведенном в 2019 году, изучалось долгосрочное влияние замораживания на сперму человека и исходы беременности с учетом более 119 000 образцов донорской спермы.Исследование показало, что:

• Криохранение продолжительностью до 5 лет не повлияло на выживаемость сперматозоидов.
• Через 5 лет отмечено небольшое снижение выживаемости сперматозоидов (с 86% до 74% за 15 лет). Однако это оказало лишь незначительное влияние на уровень рождаемости, когда эта сперма фактически использовалась для осеменения. Уровень живорождения для группы со сроком хранения менее 5 лет составил 82%; для группы со сроком хранения 6–15 лет LBR составил 80%.

Исследователи пришли к выводу, что «длительное криохранение спермы в банке спермы человека не влияет на клинические результаты.Итак, можно смело сказать, что однажды замороженная сперма может храниться бесконечно долго.

 

Выбор сохранения спермы

Если вы планируете заморозить свою сперму, использование ведущего в отрасли криохранилища может обеспечить наилучшие результаты, когда вы решите стать родителем. Если вы заморозите с помощью Legacy, ваши образцы будут храниться в нескольких разных хранилищах, чтобы снизить любые риски, связанные с местоположением, и контролироваться 24 часа в сутки, 7 дней в неделю. Это один из шагов, которому вы можете доверять, чтобы сохранить свою сперму в безопасности и защитить свои шансы на создание семьи.

---

 

Воздействие кодеина in vivo вызывает репродуктивную токсичность: роль сигнального пути HER2 и p53/Bcl-2

https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2020.e05589Get rights and content Применение кодеина в этиопатогенезе мужского бесплодия. Цель этого исследования состояла в том, чтобы изучить роль сигнальных путей HER2, Ki67, эстрогена и p53/Bcl-2, а также возможный результат прекращения приема кодеина на репродуктивную токсичность, вызванную кодеином.Тридцать взрослых самцов крыс Wistar сопоставимого возраста и веса были случайным образом разделены на 5 групп. Контрольные животные получали дистиллированную воду перорально (перорально) , в то время как животные в группах, получавших кодеин с низкой дозой (LDC) и высокой дозой (HDC), получали 2 и 5 мг/кг/день кодеина соответственно перорально для 6 недель. Животные в группах восстановления с низкой дозой кодеина (LDC-R) и восстановления с высокой дозой кодеина (HDC-R) получали лечение как LDC и HDC соответственно, после чего следовал еще один период восстановления без лекарств в течение шести недель.Прекращение воздействия кодеина привело к частичному устранению вызванного кодеином плохого качества спермы, уменьшению размера и веса помета, усилению окислительного повреждения яичек, апоптоза яичек и повреждения ДНК яичек, вызванного введением кодеина. Вызванная кодеином гонадо-спермотоксичность была связана со снижением циркулирующего тестостерона, подавлением тестикулярной экспрессии HER2, Ki67 и Bcl-2, подавлением передачи сигналов эстрогена и повышением активности тестикулярной каспазы 3 и сигнального пути р53.Заключение. Активация передачи сигналов эстрогена, связанная с повышенной экспрессией HER2 и Ki67 в яичках в период восстановления, по-видимому, полезна для защиты от повреждения яичек, связанного с кодеином, и бесплодия.

ключевые слова

Opioid

Окислительный стресс

P53

P53

BCL-2

KI67

KI67

Биологические науки

Химия

Экологические науки

Экологические науки

Науки на здоровье

Ветеринарная медицина

Рекомендуемая статьи на Статьи (0 )

© 2020 Автор(ы).